Silvia Maria Fátima Di Santi

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Produções bibliográficas

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• IBRAHIM, AMY ; MANKO, EMILIA ; DOMBROWSKI, JAMILLE G. ; CAMPOS, MÓNICA ; BENAVENTE, ERNEST DIEZ ; NOLDER, DEBBIE ; SUTHERLAND, COLIN J. ; NOSTEN, FRANCOIS ; FERNANDEZ, DIANA ; VÉLEZ-TOBÓN, GABRIEL ; CASTAÑO, ALBERTO TOBÓN ; AGUIAR, ANNA CAROLINE C. ; PEREIRA, DHELIO BATISTA ; DA SILVA SANTOS, SIMONE ; SUAREZ-MUTIS, MARTHA ; DI SANTI, SILVIA MARIA ; REGINA DE SOUZA BAPTISTA, ANDREA ; DANTAS MACHADO, RICARDO LUIZ ; MARINHO, CLAUDIO R.F. ; CLARK, TAANE G. ; et.al . Population-based genomic study of Plasmodium vivax malaria in seven Brazilian states and across South America. The Lancet Regional Health - Americas , v. 18, p. 100420, 2023.

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• Lima, Giselle FMC ; SANCHEZ, MARIA CARMEN ; Levi, José E ; MAHYUMI, F. ; CARAMELO, L. C. ; SANCHEZ, ARIANNI RONDELLI ; Ramos-Sanchez, EM ; Inoue J ; Costa-Nascimento, Maria de Jesus ; MENDRONE, ALFREDO ; DI SANTI SM . Asymptomatic infections in blood donors harboring Plasmodium: an invisible risk detected by molecular and serological tools.. Blood Transfusion , 2016.

• DI SANTI SM . Deonças Tropicais e Saúde Internacional. 2008. (Apresentação de Trabalho/Outra).

• DI SANTI SM . Membro efetivo " Grupo de Trabalho em Malária. 1993. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• DI SANTI SM . Diagnóstico hemoscópico da malária. 2010. (Curso de curta duração ministrado/Especialização).

• DI SANTI SM . Aspectos epidemiológicos da malária: distribuição global da doença: incidencia morbidade e mortalidade dinâmica de expansão da endemia; fatores determinantes da malãria no Brasil; características da malária extra-amazonica; iniciativas de controle no Brasil e no mundo. 2010. (Curso de curta duração ministrado/Especialização).

• DI SANTI SM . Malária - aspectos diagnósticos e epidemiológicos. 2010. (Curso de curta duração ministrado/Especialização).

• DI SANTI SM . Diagnóstico molecular da malária. 2009. (Curso de curta duração ministrado/Especialização).

• DI SANTI SM . Malária: aspectos gerais. 2009. (Curso de curta duração ministrado/Especialização).

• DI SANTI SM . Diagnóstico e epidemiologia da malária. 2009. (Curso de curta duração ministrado/Especialização).

• DI SANTI SM . Infecções assintomáticas por plasmodium. 2009. (Curso de curta duração ministrado/Especialização).

• DI SANTI SM . Diagnóstico sobre Biossegurança nos SRs. 2009. (Curso de curta duração ministrado/Especialização).

• DI SANTI SM . Malária: aspectos diagnósticos e epidemiológicos. 2009. (Curso de curta duração ministrado/Especialização).

• DI SANTI SM . Mlalária autóctone em São Paulo com malária transfusional. 2008. (Curso de curta duração ministrado/Especialização).

• DI SANTI SM . Malária: aspectos diagnósticos e epidemiológicos. 2008. (Curso de curta duração ministrado/Especialização).

• DI SANTI SM . Malária: aspectos diagnósticos e epidemiológicos. 2008. (Curso de curta duração ministrado/Especialização).

• DI SANTI SM . Riscos Transfusional emergentesr - o probema da malária na região sudeste. 2007. .

• DI SANTI SM . Aspectos atuais da malária no Estado de São Paulo. 2007. (Curso de curta duração ministrado/Extensão).

• DI SANTI SM . Diagnóstico laboratorial: hemoscopia, testes imunocromatográficos, diagnóstico molecular; uso da sorologia em situações específicas; análise critica dos diferentes métodos e sua aplicabilidade no campo; na rotina de laboratório e em pesquisa cientifica. 2006. (Curso de curta duração ministrado/Especialização).

• DI SANTI SM . Malária autóctone em São Paulo relacionada com malária transfusional. 2006. (Curso de curta duração ministrado/Especialização).

• DI SANTI SM . malária no Estado de São Paulo. 2006. .

• DI SANTI SM . Diagnóstico laboratorial da malária. 2005. .

• DI SANTI SM . A importancia da Malária no Estado de São Paulo. 2005. .

• DI SANTI SM . Lavagem de materiais. 2004. (Curso de curta duração ministrado/Outra).

• DI SANTI SM . Laboratório de malária no módulo medicina de viajante. 2001. (Curso de curta duração ministrado/Especialização).

• DI SANTI SM . Diagnóstico da Malária. 2001. (Curso de curta duração ministrado/Especialização).

• DI SANTI SM . Diagnóstico Laboratorial da Malária. 2001. (Curso de curta duração ministrado/Especialização).

• DI SANTI SM . Aspectos parasitológicos da malária. 1996. (Curso de curta duração ministrado/Especialização).

• DI SANTI SM . Testes de sensibiliade dos plasmódios aos quimioterápicos. 1985. (Curso de curta duração ministrado/Especialização).

• DI SANTI SM . Alternativas no diagnóstico laboratorial. 2001 (Mesa Redonda) .

Projetos de pesquisa

• 2022 - Atual

  Caracterização genômica de Plasmodium falciparum e Plasmodium vivax: análise comparativa de isolados de pacientes infectados em diferentes estados da Amazônia Legal brasileira no período de 1985 a 2022, Descrição: De acordo com dados da Organização Mundial de Saúde, em 2020 foram registrados 241 milhões de casos de malária no mundo, com 627 mil óbitos, principalmente em crianças com menos de cinco anos de idade (WHO, 2021). No mesmo ano foram notificados 145.205 casos no Brasil, 99% transmitidos nos nove estados que compõem a Amazônia Legal. As infecções por Plasmodium vivax corresponderam a 83% dos casos; P. falciparum e infecções associadas somaram 17% (Brasil, 2022). As estratégias dos programas de controle da malária são baseadas no diagnóstico precoce e tratamento oportuno para cada espécie de Plasmodium. O teste de referência para malária é a hemoscopia, porém os testes de diagnóstico rápido (TDRs) têm papel fundamental em áreas remotas. Um dos principais biomarcadores utilizados nos TDRs é a pfHRP2, no entanto deleções no gene que codifica para essa proteína comprometem o uso de testes baseados neste antígeno. Com relação ao tratamento, a resistência de P. falciparum aos antimaláricos é um dos maiores desafios para o controle e eliminação da malária. Dados gerados a partir da vigilância molecular dos parasitos podem basear iniciativas de controle mais eficazes, contribuindo para o conhecimento da dinâmica de transmissão da doença. Nossa proposta visa gerar dados para caracterizar a população de parasitos de diferentes estados da Amazônia Legal brasileira, coletados desde a década de 1980. Apesar de vasta literatura sobre malária no Brasil, há pouca informação sobre marcadores moleculares de resistência aos antimaláricos e sobre a prevalência de deleções no gene pfhrp2 nos diferentes estados da área endêmica. Neste estudo serão sequenciados 302 isolados de P. falciparum e P. vivax de pacientes procedentes dos nove estados da Amazônia Legal, coletados entre 1985 e 2022. Dados clínicos e epidemiológicos de cada isolado estão disponíveis em banco de dados, com garantia do direito de confidencialidade aos pacientes. Além do sequenciamento direcionado de genes utilizados como alvo para diagnóstico e como marcadores de resistência a antimaláricos, o sequenciamento completo do genoma (WGS) utilizando tecnologia de última geração (Runtuwene et al, 2018) contribuirá para implementar a genômica como ferramenta de diagnóstico, controle e vigilância. A utilização da genômica para detectar mutações nos genes pfdhfr, pfdhps, pfcrt, pfmdr1 e pfkelch13, que conferem resistência de P. falciparum aos antimaláricos, assim como a detecção de assinaturas de seleção positiva sugerindo resistência emergente em P. vivax contribuirão para as estratégias de eliminação da malária no Brasil, construindo uma ponte entre a genômica e a formulação de políticas, o que é essencial para acelerar os esforços para reduzir a malária.. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) . , Integrantes: Silvia Maria Fátima Di Santi - Coordenador / Maria de Jesus Costa-Nascimento - Integrante / José Eduardo Levi - Integrante / ASCHAR, MARIANA - Integrante / Larissa Alessandra Bafoni - Integrante.

• 2021 - Atual

  Triagem in vitro e ex vivo de fármacos candidatos a antimaláricos obtidos de produtos naturais, em isolados de Plasmodium falciparum, Descrição: A malária é causada por protozoários do gênero Plasmodium, transmitida por fêmeas de Anopheles. P. falciparum é responsável por alta mortalidade em crianças e gestantes. Em 2020 foram notificados 241 milhões de casos, com 627.000 óbitos. O quinino foi adotado como antimalárico no século 19. Porém, o uso deste alcaloide foi limitado pelo aparecimento de cepas resistentes de P. falciparum. A cloroquina foi desenvolvida na década de 1940, mas o surgimento de P. falciparum resistente limitou seu uso. A mefloquina surgiu na década de 1980, porém está associada a efeitos colaterais, além de induzir resistência. A artemisinina, extraída da Artemísia annua em 1972, atua inibindo as fases eritrocíticas do parasito. É uma droga segura, potente e rápida, mas não indicada em monoterapia, sendo recomendada em combinação com lumefantrina, mefloquina e piperaquina. A resistência às artemisininas é associada a SNPs no gene k13, sendo C580Y a mutação mais prevalente. O tratamento da malária possui um forte histórico de compostos naturais como fonte para novos fármacos. O objetivo deste estudo é avaliar a ação de Baccharis retusa, que produz flavonóides, diterpenos, triterpenos e tricotecenos; Nectandra leucantha composta por alcaloides, fenilpropanóides, lignanos, neolignanas, nitro derivativos, ésteres benzílicos, pironas e flavonóides e Ocotea puberula, que contém alcaloides, taninos, esteroides e triterpenos. Será realizada avaliação da atividade in vitro e ex vivo em isolados de P. falciparum, dos compostos deidrodieugenol e deidrodieugenol B (N. leucanta); ácido ent-kaurenóico e 15b-senecioyloxy-e-kaurenoico (B. retusa) e dicentrina (O. puberula). A avaliação será realizada por meio de testes fenotípicos e da citometria de fluxo para avaliar a viabilidade dos parasitos em presença dos compostos.. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (1) / Doutorado: (1) . , Integrantes: Silvia Maria Fátima Di Santi - Coordenador / Mariana Aschar - Integrante / Larissa Alessandra Bafoni - Integrante / João Henrique Ghilardi Lago - Integrante.

• 2021 - Atual

  Genomic epidemiology and surveillance of malaria in gold mining areas in Brazil, Descrição: Gold mining activities lead to deforestation, an increase in Anopheles breeding sites and close contact between humans/vectors, raising malaria burden. Self-medication is frequent in these regions, as informal gold miners resist seeking assistance, leading to more infections and emergence of resistance to antimalarials. Our proposal aims to generate data-to-action and implement genomic surveillance of parasite drug and vector insecticide resistance in gold mining areas of Pará State, Brazil. By focusing on 65 mines that are foci for malaria transmission, we will implement molecular and genomic techniques with a web-based information system, to operationalize malaria surveillance and assist NMCP decision-making.. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (1) / Doutorado: (1) . , Integrantes: Silvia Maria Fátima Di Santi - Coordenador / Maria de Jesus Costa-Nascimento - Integrante / ASCHAR, MARIANA - Integrante / Paoola Vieira - Integrante / Susana Campino - Integrante / Taane Clark - Integrante / Ricardo Luiz Dantas Machado - Integrante / Martha Cecilia Suárez Mutis - Integrante / Claudio Romero Farias Marinho - Integrante / Joseli de Oliveira Ferreira - Integrante / Ronaldo César Borges Gryschek - Integrante / Ananias Escalante - Integrante / Daniel Ward - Integrante., Financiador(es): Bill and Melinda Gates Foundation - Auxílio financeiro.

• 2019 - 2022

  Avaliação dos protocolos moleculares LAMP Illumigene Malaria e Malachite Green para detecção de infecções assintomáticas e sua aplicabilidade em práticas de hemoterapia e de transplantes de órgãos ou tecidos, Descrição: A malária é uma doença infecciosa causada por Plasmodium transmitida por Anopheles, via congênita, transfusão sanguínea ou transplantes. Pode se manifestar como formas graves, mas também como infecções assintomáticas difíceis de diagnosticar devido à baixa densidade do parasito. O número de notificações aumentou nos últimos anos, com 216 milhões de casos no mundo em 2016 e 193.857 no Brasil em 2017, a maioria na Amazônia Legal. Na Região Extra Amazônica, o Estado de São Paulo foi o que apresentou maior número de notificações nos últimos anos. Este recrudescimento é preocupante e o diagnóstico rápido e preciso é um dos desafios para as estratégias de controle. O padrão ouro para o diagnóstico da malária é a gota espessa, que embora utilizada na rotina de diagnóstico, não se aplica à detecção de baixas parasitemias, sendo inadequada para atividades de vigilância em áreas com propostas de eliminação, em triagem em hemoterapia e em exames prévios para transplantes, em situações em que doadores ou receptores tenham possibilidade de albergar Plasmodium em parasitemias submicroscópicas. Protocolos moleculares disponíveis, como qPCR e nested PCR, embora sensíveis, não têm seu uso disseminado devido à complexidade de execução, exigência de equipamentos sofisticados e alto custo. Neste sentido, a busca por protocolos moleculares point-of-care torna-se fundamental para viabilizar o diagnóstico acurado, mesmo em locais com pouca infraestrutura e disponibilidade de recursos humanos. A técnica loop-mediated isothermal amplification (LAMP) apresenta boa aplicabilidade, por se tratar de protocolo sensível e de fácil execução, exigindo o mínimo de treinamento e infraestrutura, com resultados em curto período de tempo e reagentes estáveis para uso em campo, além de dispensar os passos de extração de DNA e realizar amplificação em 40 minutos. Ensaios colorimétricos têm sido propostos com base na plataforma LAMP, dispensando o uso de equipamentos, como o Malachite Green-LAMP, onde a amplificação de DNA é observada com base na coloração final, sendo verde azulada nos casos positivos e incolor nos negativos. Estas técnicas permitem seu uso em grande número de amostras, visto que são processadas em banho seco em temperatura constante. Neste estudo, a proposta é avaliar a aplicabilidade e reprodutibilidade destes protocolos em três diferentes coortes: candidatos a doadores de sangue em áreas endêmicas e não endêmicas para malária, doadores e receptores de órgãos ou tecidos em transplantes, analisando a viabilidade da implantação destas plataformas em serviços de saúde.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Silvia Maria Fátima Di Santi - Coordenador / Maria Carmen Arroyo Sanchez - Integrante / Levi, José E - Integrante / Clarisse M Machado - Integrante / MENDRONE, ALFREDO - Integrante / Maria de Lourdes Farinas - Integrante / Mariana Aschar - Integrante / Silvia Figueiredo Costa - Integrante / Afonso José P. Cortez - Integrante / Denys Eiti Fujimoto - Integrante.

• 2018 - 2021

  DETECÇÃO MOLECULAR DE PLASMODIUM EM ÁREAS DE MALÁRIA AUTÓCTONE LOCALIZADAS EM BIOMA DE MATA ATLÂNTICA DO ESTADO DE SÃO PAULO, Descrição: A malária ainda é desafiadora para a ciência e para os programas de controle, sendo uma das doenças tropicais mais importantes. É uma doença infecciosa febril, aguda e de evolução rápida, transmitida ao homem através da picada da fêmea do mosquito Anopheles infectada por Plasmodium, bem como através de transfusão sanguínea, transplante de órgãos, compartilhamento de seringas entre usuários de drogas injetáveis ou até de mãe para o feto durante o parto. A maioria dos casos no Brasil ocorre na Região Amazônica (Pará, Maranhão, Acre, Mato Grosso, Roraima, Amazonas, Rondônia, Amapá, Tocantins), com 117.453 notificações em 2016. Porém na Região Extra-Amazônica, considerada como área não endêmica, a doença tem impacto na vigilância epidemiológica devido aos casos importados e à possibilidade de ocorrência de surtos. Em 2016 foram notificados 489 casos, sendo que 82 foram classificados como autóctones. Nesta região a malária tem relevância pela ocorrência de casos autóctones com baixa parasitemia e sintomatologia pouco exuberante. O Estado de São Paulo historicamente apresenta transmissão de malária em regiões localizadas em Bioma de Mata Atlântica, com 10 casos de autoctonia detectados em 2016. Este número pode ser maior, visto que os casos índices foram diagnosticados pelo teste de referência para malária, a gota espessa, cuja sensibilidade varia muito em função da experiência do observador e da parasitemia sanguínea. Por sua alta sensibilidade, os testes moleculares têm se destacado frente às divergências no diagnóstico microscópico em casos de infecções mistas e infecções assintomáticas com baixas parasitemias. O objetivo deste estudo é a aplicação de protocolos de PCR (qPCR e nested PCR) em amostras de sangue de habitantes onde ocorreram focos de malária autóctone do Estado de São Paulo, em municípios da Região Metropolitana de São Paulo (Juquitiba e São Bernardo), Litoral Norte (Ubatuba, Ilha Bela e São Sebastião), Vale do Ribeira (Tapiraí) e São Paulo (Parelheiros). A utilização de protocolos moleculares na população habitante das áreas adjacentes aos casos permitirá a detecção de assintomáticos portando Plasmodium, servindo de fonte para transmissão de novos casos. Os resultados contribuirão para o aprimoramento das ações de controle em eventos de autoctonia.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Silvia Maria Fátima Di Santi - Coordenador / Maria de Lourdes Farinas - Integrante / Mariana Aschar - Integrante.

• 2013 - 2016

  Comportamento de Plasmodium falciparum frente aos esquemas terapêuticos de primeira linha para malária: avaliação da sensibilidade in vitro e do mecanismo de dormência das terapias combinadas com artemisinina., Descrição: Aproximadamente 3,3 bilhões de pessoas vivem sob o risco de contrair malária no mundo, com 219 milhões de casos e 660 mil óbitos em 2010. Em 2011 foram registrados 267 mil casos da doença no Brasil. Plasmodium falciparum requer tratamento rápido e eficaz, devido a sua capacidade de evoluir para casos graves e óbito. Os derivados da artemisinina caracterizam-se por alcançar rapidamente níveis plasmáticos altos e reduzem rapidamente o número de parasitos em estágio assexuado. A terapia combinada com artemisinina (ACT) baseia-se em associar um derivado da artemisinina com outra droga antimalárica de ação lenta e prolongada, incrementando assim a eficácia do tratamento e reduzindo a possibilidade de desenvolvimento de resistência. Os tratamentos de primeira linha utilizados no Brasil nas infecções por P. falciparum não complicadas são as combinações de arteméter-lumefantrina (Coartem) e artesunato-mefloquina (Farmanguinhos). O esquema terapêutico de segunda escolha é a combinação quinino-doxiciclina. Um parasito é considerado resistente quando é capaz de sobreviver e de multiplicar-se em sua fase sanguínea assexuada, apesar da administração e absorção adequadas de um regime quimioterapêutico. Atualmente, existem evidências da diminuição da eficácia ao tratamento com artemisinina e seus derivados em isolados de P. falciparum da Tailândia e Camboja. Polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs) em alguns genes demonstraram afetar a resposta do parasito aos diferentes antimaláricos. Um fenômeno que requer mais estudos é o mecanismo de dormência em P. falciparum, proposto como mecanismo de tolerância à artemisinina. Segundo este mecanismo, os parasitos são capazes de tolerar a ação da artemisinina ao bloquear a sua maturação temporariamente, à semelhança do que ocorre com algumas bactérias. A resistência do P. falciparum aos antimaláricos permanece como um desafio aos programas de controle. A adoção das ACTs como tratamento de primeira linha para P. falciparum não grave, torna imprescindível estudos de monitoramento que sejam sentinelas para detectar diminuição da sensibilidade deste parasito aos derivados de artemisinina e dos fármacos utilizados associadamente, como a mefloquina e a lumefantrina. Este estudo propõe a determinação in vitro do perfil fenotípico da resposta do P. falciparum ao artesunato e mefloquina, ACT que é utilizada na região extra-amazônica brasileira, além de propor a avaliação inédita da resposta à lumefantrina, utilizada em associação com artemeter em área endêmica brasileira. Também inédita é a avaliação do mecanismo de dormência de isolados de P. falciparum brasileiros às ACTs adotadas no país.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (1) / Mestrado acadêmico: (1) / Doutorado: (3) . , Integrantes: Silvia Maria Fátima Di Santi - Coordenador / Marcos Boulos - Integrante / Aluisio Augusto Cotrim Segurado - Integrante / Juliana Inoue - Integrante / Giselle Fernandes M. de Castro Lima - Integrante / Angelica D. Hristov - Integrante / Maria de Jesus Costa-Nascimento - Integrante / Rosa del Carmen Miluska Vargas Rodriguez - Integrante., Número de produções C, T & A: 1

• 2011 - 2016

  Plataforma para diagnóstico de malária aplicada em amostras de doadores de sangue de áreas endêmicas e não endêmicas brasileiras processadas em pool: determinação da frequência de positividade utilizando marcadores moleculares e sorológicos., Descrição: A malária transmitida por transfusão sanguínea permanece como uma das infecções mais relevantes para os serviços de hemoterapia, tanto em regiões endêmicas como não endêmicas, devido ao grande aumento do número de indivíduos que se deslocam globalmente. Dados sobre a frequência de malária transfusional mostram valores que variam de menos que 0,2 por milhão de unidades de sangue em países não endêmicos a 50 ou mais em áreas com transmissão ativa. Embora a incidência de malária por transfusão sanguínea não seja conhecida no Brasil, este evento pode contribuir para a disseminação da doença em situações em que a triagem clínico-epidemiológica nos bancos de sangue não seja efetuada de maneira rigorosa. As infecções assintomáticas, com parasitemias baixas e de difícil detecção pela hemoscopia convencional, representam um desafio para as estratégias de controle, tanto para a transmissão natural da doença, cujos programas se baseiam na detecção e tratamento de casos sintomáticos, como para os hemocentros, independentemente do nível de endemicidade da região. Para detectar este tipo de infecção é imprescindível aplicar metodologias mais sensíveis para a detecção de assintomáticos, com impacto na triagem mais segura de doadores de sangue. Considere-se ainda o escasso conhecimento sobre a malária em áreas sem transmissão ativa. Em áreas endêmicas e não endêmicas diferentes estratégias devem ser seguidas no controle da malária transfusional. Embora alguns bancos de sangue utilizem questionário para identificar risco de transmissão de malária, este procedimento pode permitir a coleta de sangue infectado, por falhas de informação pelo candidato à doação. Segundo o Regulamento Técnico de Procedimentos Hemoterápicos, os critérios de triagem em áreas endêmicas consideram antecedentes de malária e nível de endemicidade. Em áreas não endêmicas, obedecidos estes critérios de exclusão, o candidato poderá ser considerado apto se apresentar testes de detecção de Plasmodium ou de antígeno. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (2) . , Integrantes: Silvia Maria Fátima Di Santi - Coordenador / Juliana Inoue - Integrante / Giselle Fernandes M. de Castro Lima - Integrante / Angelica D. Hristov - Integrante / Maria de Jesus Costa-Nascimento - Integrante / José Eduardo Levi - Integrante / Marcelo Plaisant Geraldi - Integrante / Maria Carmen Arroyo Sanchez - Integrante / Silvano Wendel Neto - Integrante., Financiador(es): Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1

• 2011 - 2014

  Ocorrência de Plasmodium e suas consequências em gestantes residentes em áreas de baixa transmissão de malária no Estado de São Paulo., Descrição: A malária é a mais disseminada doença parasitária e ocorre em 109 países, com 85% das infecções no Continente Africano. Em 2008 ocorreram 243 milhões de casos e 863 mil óbitos no mundo. Os principais grupos de risco são crianças menores de cinco anos e gestantes. No Brasil a transmissão se dá principalmente na Amazônia Legal, onde ocorreram 99,81% dos 306.908 casos notificados em 2009. A transmissão de malária no Estado de São Paulo se concentra nas áreas cobertas por Mata Atlântica, onde ocorrem infecções assintomáticas. Entre 1980 e 2007, foram reportados 816 casos autóctones, sendo que 9,6% não apresentaram sintomas ou sinais de malária. Em Juquitiba foram registrados surtos, sendo 10 casos em 2005, 16 em 2006 e 13 em 2007, com detecção de casos assintomáticos de Plasmodium vivax e P. malariae. A cada ano 25 milhões de mulheres de países endêmicos engravidam, sendo a maioria de regiões da África com intensa transmissão de P. falciparum. A taxa de aborto em gestantes com a doença chega a 30% nos quatro primeiros meses. Nas gestações que prosseguem há imunossupressão materna, por adaptação imune para impedir a rejeição do feto, com progressão mais acentuada da doença. Com a imunodepressão materna o risco de adquirir malária aumenta. Plasmodium ocasiona resposta mediada por Th1, com aumento desta citocina e de citocinas pro - inflamatórias como IFN - γ e TNF - α. P. vivax é responsável pela maioria dos casos na Ásia e Américas, com relatos de morbidade e anemia em gestantes e de baixo peso em crianças, porém são necessários mais estudos para melhor definir os efeitos de P.vivax e P. malariae em gestantes e recém-nascidos. Apesar do caráter benigno destas duas espécies, sua detecção é fundamental, visto que a subnotificação aumenta o risco de transmissão vertical. Embora a malária por P. falciparum em gestantes tenha sido bastante investigada, faltam informações sobre a interação com outras espécies. Este estudo tem caráter inédito nesta região e pretende. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (2) . , Integrantes: Silvia Maria Fátima Di Santi - Coordenador / Marcos Boulos - Integrante / Juliana Inoue - Integrante / Giselle Fernandes M. de Castro Lima - Integrante / Angelica D. Hristov - Integrante / Maria de Jesus Costa-Nascimento - Integrante / Maria Irma Seixas Duarte - Integrante / Steve S. Witkin - Integrante / José Jarbas Bitencourt Ferreira - Integrante / Fabio M. Junqueira - Integrante / Iara Moreno Linhares - Integrante., Financiador(es): Superintendência de Controle de Endemias - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1

• 2010 - 2014

  Marcadores moleculares para análise do polimorfismo genético relacionado à resposta de Plasmodium falciparum aos antimaláricos., Descrição: A malária acarreta 247 milhões de casos anualmente e um milhão de óbitos. No Brasil, em 2008, foram registrados 306.347 casos. A pressão seletiva de drogas resulta em mutações, notadamente SNPs, que conferem resistência. A resistência à cloroquina está ligada ao gene pfcrt que codifica a proteína PfCRT, transportadora de drogas e metabólitos. A resposta do P. falciparum ao quinino está associada ao aumento do número de cópias do gene pfmdr1, assim como a mutações pontuais nos genes pfcrt e pfmrp, que codifica a proteína PfMRP, que atua como bomba molecular, expelindo drogas para fora do parasito, além do gene pfnhe-1 que codifica a proteína responsável pela troca Na+/H+. A diminuição da sensibilidade à mefloquina está relacionada com a amplificação de cópias do pfmdr1, que codifica a glicoproteína transmembrana (Pgh1) e associa-se a um valor maior de IC50 para quinino e cloroquina. Mutações no gene da DHFR-TS são relacionadas com resistência à pirimetamina. A diminuição da sensibilidade à artemisinina é relacionada a SNPs no gene pfATPase6, que codifica a proteína SERCA. O aumento no número de cópias do gene pfmdr1 também está relacionado com a diminuição da sensibilidade à artemisinina. Dados recentes associam novas mutações próximas de pfubp1, bem como uma mutação no cromossomo 13, à menor susceptibilidade in vitro à artemisinina. Em vista da multiresistência detectada no Brasil, baseada principalmente na análise fenotípica, o uso de diferentes marcadores moleculares para diversos antimaláricos permitirá mapear o perfil genético de P. falciparum com relação às mutações associadas à resistência.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (2) . , Integrantes: Silvia Maria Fátima Di Santi - Coordenador / Marcos Boulos - Integrante / Aluisio Augusto Cotrim Segurado - Integrante / Virgílio do Rosário - Integrante / Juliana Inoue - Integrante / Giselle Fernandes M. de Castro Lima - Integrante / Angelica D. Hristov - Integrante / Maria de Jesus Costa-Nascimento - Integrante / Pedro Victor Lemos Cravo - Integrante / Dinora Lopes - Integrante., Financiador(es): Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - Auxílio financeiro / Superintendência de Controle de Endemias - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1

• 2008 - 2011

  Análise comparativa da PCR em tempo real, nested PCR e teste imunocromatográfico em amostras de sangue processadas em pool, como plataforma de diagnóstico molecular e sorológico de malária em larga escala., Descrição: O diagnóstico da malária tem como teste de referência a gota espessa, porém é consenso que é preciso adotar alternativas em situações específicas, com técnicas mais sensíveis e que possam ser aplicadas no processamento de grande número de amostras, como estudos clínicos, epidemiológicos ou triagem de doadores em bancos de sangue. Com a finalidade de formar uma plataforma de diagnóstico para malária em amostras agrupadas em pools, propõe-se a análise comparativa da PCR em tempo real, a nested PCR e um teste rápido específico para detecção de anticorpos contra P.falciparum e P. vivax, com intuito de reduzir o número de ensaios, com custo relativamente baixo. São utilizadas amostras de sangue positivas para Plasmodium, de acordo com a prevalência das espécies no Brasil (P. vivax 75%, P. falciparum 22% e P. malariae 3%), com diagnóstico realizado pelo método padrão ouro. Adicionalmente, amostras de sangue negativas para Plasmodium selecionadas para controle negativo e confecção de pools, contendo amostras positivas e negativas. Tanto as amostras positivas como as negativas serão submetidas individualmente aos ensaios de PCR em tempo real, nested PCR e teste imunocromatográfico SD Bioline Pf/Pv para detecção de malária. Um teste de PCR convencional foi incluído a fim de testar a qualidade do DNA, mediante amplificação de uma sequência do gene humano da β-globina como controle interno. As amostras serão analisadas em pools pelos ensaios moleculares e sorológicos.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Especialização: (1) / Mestrado acadêmico: (1) . , Integrantes: Silvia Maria Fátima Di Santi - Coordenador / Aluisio Augusto Cotrim Segurado - Integrante / Juliana Inoue - Integrante / Giselle Fernandes M. de Castro Lima - Integrante / Angelica D. Hristov - Integrante / Maria de Jesus Costa-Nascimento - Integrante / José Eduardo Levi - Integrante / Marcelo Plaisant Geraldi - Integrante / Maria Carmen Arroyo Sanchez - Integrante., Financiador(es): Superintendência de Controle de Endemias - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 2

Prêmios