Priscila Keiko Matsumoto Martin

Pós-doutorado

Formação complementar

Idiomas

Áreas de atuação

Organização de eventos

Participação em eventos

Participação em bancas

Orientou

Produções bibliográficas

• POLETTO, EDINA ; SILVA, ANDREW OLIVEIRA ; WEINLICH, RICARDO ; Martin, Priscila Keiko Matsumoto ; TORRES, DAVI COE ; GIUGLIANI, ROBERTO ; BALDO, GUILHERME . Ex vivo gene therapy for lysosomal storage disorders: future perspectives. EXPERT OPINION ON BIOLOGICAL THERAPY , v. 23, p. 353-364, 2023.

• STILHANO, ROBERTA S. ; MADRIGAL, JUSTIN L. ; WONG, KEVIN ; WILLIAMS, PRISCILLA A. ; MARTIN, PRISCILA K.M. ; YAMAGUCHI, FABIO S.M. ; SAMOTO, VIVIAN Y. ; HAN, SANG W. ; SILVA, EDUARDO A. . Injectable alginate hydrogel for enhanced spatiotemporal control of lentivector delivery in murine skeletal muscle. Journal of Controlled Release , v. 237, p. 42-49, 2016.

• Stilhano, Roberta Sessa ; Martin, Priscila Keiko Matsumoto ; DE MELO, SUELY MAYMONE ; SAMOTO, VIVIAN YOCHIKO ; PERES, GIOVANI BRAVIN ; MICHELACCI, YARA MARIA CORREA DA SILVA ; DA SILVA, FLAVIA HELENA ; Pereira, Vanessa Gonçalves ; D'ALMEIDA, VANIA ; DA CRUZ, ADRIANA TAVEIRA ; JASIULIONIS, MIRIAM GALVONAS ; Han, Sang Won . IDUA gene based therapy using phiC31 system to treat MPSI mice. The Journal of Gene Medicine , v. 1, p. n/a-n/a, 2015.

• DE MELO, SUELY MAYMONE ; BITTENCOURT, SIMONE ; FERRAZOLI, ENÉAS GALDINI ; DA SILVA, CLIVANDIR SEVERINO ; DA CUNHA, FLAVIA FRANCO ; DA SILVA, FLAVIA HELENA ; Stilhano, Roberta Sessa ; DENAPOLI, PRISCILA MARTINS ANDRADE ; ZANETTI, BIANCA FERRARINI ; Martin, Priscila Keiko Matsumoto ; SILVA, LEONARDO MARTINS ; SANTOS, ADARA AUREA DOS ; BAPTISTA, LEANDRA SANTOS ; LONGO, BEATRIZ MONTEIRO ; Han, Sang Won . The Anti-Tumor Effects of Adipose Tissue Mesenchymal Stem Cell Transduced with HSV-Tk Gene on U-87-Driven Brain Tumor. Plos One , v. 10, p. e0128922, 2015.

• DA SILVA JUNIOR, NATAN DANIEL ; ROSEGUINI, BRUNO T. ; CHEHUEN, MARCEL ; FERNANDES, TIAGO ; MOTA, GLORIA F ; MARTIN, PRISCILA K.M ; HAN, SANG W. ; FORJAZ, CLAUDIA LUCIA DE MORAES ; WOLOSKER, NELSON ; OLIVEIRA, EDILAMAR MENEZES . Effects of oral N-acetylcysteine on walking capacity, leg reactive hyperemia, and inflammatory and angiogenic markers in patients with intermittent claudication. American Journal of Physiology. Heart and Circulatory Physiology , v. 1, p. ajpheart.00158.2015, 2015.

• Priscila Keiko Matsumoto Martin ; Stilhano, Roberta Sessa ; Samoto, Vívian Yochiko ; Christina Maeda Takiya ; PERES, G. B. ; Yara Maria Correa da Silva Michelacci ; da Silva, Flávia Helena ; Vanessa Gonçalves Pereira ; Vania D'Almeida ; Fabio Luiz Navarro Marques ; Andreia Hanada Otake ; Roger Chammas ; HAN, S. W. . Mesenchymal stem cells do not prevent antibody responses against human α-Liduronidase when used to treat mucopolysaccharidosis type I. Plos One , v. 9, p. e92420, 2014.

• GARCIA, KARINA O. ; ORNELLAS, FELIPE L. M. ; MARTIN, PRISCILA K. MATSUMOTO ; PATTI, CAMILLA L. ; MELLO, LUIZ E. ; FRUSSA-FILHO, ROBERTO ; HAN, SANG W. ; LONGO, BEATRIZ M. . Therapeutic effects of the transplantation of VEGF overexpressing bone marrow mesenchymal stem cells in the hippocampus of murine model of Alzheimerâ--s disease. Frontiers in Aging Neuroscience , v. 6, p. 30, 2014.

• FREITAS, ANDRÉ LUIZ PIRES DE ; SILVA, MARCELO DE OLIVEIRA E ; MATSUMOTO, P. K. ; MATSUMOTO, P. K. ; FERREIRA, LYDIA MASAKO . Experimental model of obtaining tissue adipose, mesenchymal stem cells isolation and distribution in surgery flaps in rats. ACTA CIRÚRGICA BRASILEIRA (ONLINE) , v. 29, p. 29-33, 2014.

• CUNHA, F. ; MARTINS, L. ; MATSUMOTO, P. K. ; MATSUMOTO, P. K. ; STILHANO, R. S. ; HAN, S. W. . A comparison of the reparative and angiogenic properties of mesenchymal stem cells derived from the bone marrow of BALB/c and C57/BL6 mice in a model of limb ischemia. Cell Transplantation , v. 4, p. 86, 2013.

• Pereira Lopes, F.R. ; Martin, P.K.M. ; Frattini, F. ; BIANCALANA, A. ; Almeida, F.M. ; Tomaz, M.A. ; MELO, P.A. ; BOROJEVIC, R. ; Han, S.W. ; Martinez, A.M.B. . Double gene therapy with granulocyte colony-stimulating factor and vascular endothelial growth factor acts synergistically to improve nerve regeneration and functional outcome after sciatic nerve injury in mice. Neuroscience , v. 230, p. 184-197, 2013.

• CUNHA, F. ; MARTINS, L. ; Martin, PKM ; STILHANO, R. S. ; PAREDES-GAMERO, E. ; HAN, S. W. . A comparison of treatments of peripheral arterial disease with MSCs (mesenchymal stem cells) and MSCs modified with GM-CSF. Cytotherapy , v. 15, p. 820, 2013.

• Yasumura, Eduardo Gallatti ; Stilhano, Roberta Sessa ; Samoto, Vívian Yochiko ; Matsumoto, Priscila Keiko ; de Carvalho, Leonardo Pinto ; Valero Lapchik, Valderez Bastos ; Han, Sang Won . Treatment of Mouse Limb Ischemia with an Integrative Hypoxia-Responsive Vector Expressing the Vascular Endothelial Growth Factor Gene. Plos One , v. 7, p. e33944, 2012.

• da Silva, Flávia Helena ; Pereira, Vanessa Gonçalves ; Yasumura, Eduardo G ; Tenório, Lígia Zacchi ; de Carvalho, Leonardo Pinto ; Lisboa, Bianca Cristina Garcia ; Matsumoto, Priscila Keiko ; Stilhano, Roberta Sessa ; Samoto, Vivian Y ; Calegare, Bruno Frederico Aguilar ; Brandão, Leticia de Campos ; D´Almeida, Vania ; Filippo, Thaís RM ; Porcionatto, Marimelia ; Toma, Leny ; Nader, Helena Bonciani ; Vastos, Valderez Bastos ; Camassola, Melissa ; Nardi, Nance Beyer ; Han, Sang Won . Treatment of adult MPSI mouse brains with IDUA-expressing mesenchymal stem cells decreases GAG deposition and improves exploratory behavior. Genetic vaccines and therapy , v. 10, p. 2, 2012.

• REIS, P. E. O. ; REIS, I. F. O. ; NEVES, D. Q. ; MATSUMOTO, P. K. ; HAN, S. W. ; BOROJEVIC, R. . Lower Limb Ischemia: current outlook for cell therapy and gene therapy. Revista Brasileira de Cardiologia , v. 25, p. 330-339, 2012.

• Pereira Lopes, F.R. ; Lisboa, B.C.G. ; Frattini, F. ; Almeida, F.M. ; Tomaz, M.A. ; MATSUMOTO, P. K. ; Langone, F. ; Lora, S. ; Melo, P. A. ; Borojevic, R. ; Han, S.W. ; Martinez, A.M.B. . Enhancement of sciatic-nerve regeneration after VEGF gene therapy. Neuropathology and Applied Neurobiology (Print) , p. no-no, 2011.

• Priscila Keiko Matsumoto Martin ; STILHANO, R. S. . Terapia Gênica. In: Cruz, Fábio Cardoso Girardi, Adriana Castello Costa Pereira, Gustavo José da Silva Santos, Paulo Caleb Junior de Lima. (Org.). Farmacologia. 1ed.: EDITORA ATHENEU LTDA., 2020, v. 1, p. 1-1148.

• Priscila Keiko Matsumoto Martin ; de Moraes, J.Z. ; HAN, S. W. . Terapia Celular. In: Alexsandro Macedo Silva; Luciane Maria Ribeiro Neto. (Org.). Biologia Molecular Metodos e Interpretação. 1ed.: Roca, 2015, v. 1, p. 209-234.

• Martins, Leonardo ; Martin, Priscila Keiko Matsumoto ; Han, Sang Won . Angiogenic Properties of Mesenchymal Stem Cells in a Mouse Model of Limb Ischemia. Methods in Molecular Biology. 1ed.: Springer New York, 2014, v. , p. 147-169.

• MATSUMOTO, P. K. ; MATSUMOTO, P. K. ; STILHANO, R. S. ; Han, S.W. . Células-tronco pluripotentes induzida. In: Sang Won Han; Cristiano Freitas de Souza; Antonio Carlos de Camargo Carvalho. (Org.). Nova perspectiva terapêutica em cardiologia. 1ed.: Atheneu, 2011, v. 1, p. 113-126.

• Priscila Keiko Matsumoto Martin ; ALBUQUERQUE, D. M. ; LANARO, C. ; KURITA, R. ; NAKAMURA, Y. ; COSTA, F. F. . A Single -195 C < G HBG1 Promoter Mediated By CRISPR/Cas9 Genome Editing Induces Fetal Hemoglobin Synthesis in Hudep-2. In: 61th american society of hematology, 2018, san diego. blood, 2018. v. 132. p. 3481.

• STILHANO, ROBERTA S. ; Martins, Leonardo ; MATSUMOTO, P. K. ; MATSUMOTO, P. K. ; HAN, S. W. . Hypertension Increases Fibrosis After Skeletal Muscle Injury in Hypertensive Spontaneously Rats.. In: 17th Annual Meeting of the American Society of Gene & Cell Therapy, 2014, Washington. molecular therapy, 2014. v. 22.

• Priscila Keiko Matsumoto Martin ; IGOUCHEVA, O. ; ALEXEEV, V. ; HAN, S. W. . Macrophages Transplantation in RDEB Mouse for Expression of Collagen VII Using the Scavenger Promoter and Sleeping Beauty System. In: American Society of gene and cell therapy 17th annual meeting, 2014, washington. molecular therapy, 2014. v. 1.

• MATSUMOTO, P. K. ; MATSUMOTO, P. K. ; STILHANO, R. S. ; da SILVA, F. H. ; SAMOTO, VIVIAN Y. ; PERES, G. B. ; HAN, S. W. . Mesenchymal Stem Cells Do Not Prevent Alloantibody Response Against IDUA Used To Treat MPSI. In: 16th annual meeting of american society of gene and cell therapy, 2013, salt lake city. Molecular Therapy, 2013. v. 21.

• Priscila Keiko Matsumoto Martin ; STILHANO, ROBERTA S. ; da SILVA, F. H. ; Vanessa Gonçalves Pereira ; PERES, G. B. ; Vania D'Almeida ; HAN, S. W. . INTRAPERITONEAL INJECTION EFFECT OF MESENCHYMAL STEM CELLS MODIFIED WITH IDUA TO TREAT MUCOPOLYSACCHARIDOSIS TYPE I IN MPSI MOUSE. In: 10th International Congress on Cell Biology and the XVI Meeting of the Brazilian Society for Cell Biology, 2012. abstract book, 2012.

• Stilhano, Roberta Sessa ; MATSUMOTO, P. K. ; MATSUMOTO, P. K. ; da SILVA, F. H. ; Vanessa Gonçalves Pereira ; Vania D'Almeida ; HAN, S. W. . LONG TERM HUMAN ALPHA-L-IDURONIDASE GENE EXPRESSION BY PHIC31 SYSTEM. In: XV meeting of the Brazilian society for cell biology, 2010, São Paulo. abstract books, 2010.

• MATSUMOTO, P. K. ; MATSUMOTO, P. K. ; STILHANO, ROBERTA S. ; da SILVA, F. H. ; Vanessa Gonçalves Pereira ; HAN, S. W. . IN VITRO ANALYSIS OF HUMAN a-L-IDURONIDASE GENE EXPRESSION USING SLEEPING BEAUTY SYSTEM AND MESENCHYMAL STEM CELLS. In: XV meeting of the brazilian society for cell biology, 2010, São Paulo. abstract book, 2010.

• STILHANO, ROBERTA S. ; MATSUMOTO, P. K. ; MATSUMOTO, P. K. ; HAN, S. W. . Estudo in vitro de expressão do gene α-L-iduronidase humana utilizando o sistema phiC31.. In: XVI Congresso de Iniciação Científica da UNIFESP, 2008, são paulo. Programas academicos anais, 2008. p. 64.

• MATSUMOTO, P. K. ; MATSUMOTO, P. K. ; Stilhano, Roberta Sessa ; da SILVA, F. H. ; Vanessa Gonçalves Pereira ; Vania D'Almeida ; HAN, S. W. . Estudo in vitro de expressão do gene a-L-iduronidase humana utilizando o sistema Sleeping Beauty. In: XVI Congresso de Iniciação Científica da UNIFESP, 2008, São Paulo. programas academicos anais pibic, 2008. p. 65.

• Stilhano, Roberta Sessa ; MATSUMOTO, P. K. ; MATSUMOTO, P. K. ; da SILVA, F. H. ; Vanessa Gonçalves Pereira ; Vania D'Almeida ; HAN, S. W. . ESTUDO IN VITRO DE EXPRESSÃO DO GENE α-L-IDURONIDASE HUMANA UTILIZANDO O SISTEMA PHIC31. In: XXIII Reunião anual fesbe, 2008, aguas de lindoia. regulação da transcrição e tradução, 2008. p. s3.

• Priscila Keiko Matsumoto Martin . New strategy for sickle cell anemia treatment: CRISPR/Cas9 for the production of the brazylian type hereditary persistence of fetal hemoglobin. 2018. (Apresentação de Trabalho/Conferência ou palestra).

• Priscila Keiko Matsumoto Martin ; IGOUCHEVA, O. ; ALEXEEV, V. ; Han, Sang Won . Macrophages transplantation in RDEB mouse for expression of collagen VII using the Scavenger promoter and Sleeping Beauty System. 2014. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• Priscila Keiko Matsumoto Martin ; IGOUCHEVA, O. ; ALEXEEV, V. ; Stilhano, Roberta Sessa ; UITTO, J. ; HAN, S. W. . Macrophages transplantation in RDEB mouse for expression of collagen VII using the Scavenger promoter and Sleeping Beauty System. 2014. (Apresentação de Trabalho/Conferência ou palestra).

• Martin, P.K.M. . Disciplina de Biologia Estrutural e Funcional de Pós-graduação sobre o tema de Terapia Genica. 2013. (Apresentação de Trabalho/Comunicação).

• Priscila Keiko Matsumoto Martin . IV Curso introdutorio de liga de genetica clinica. 2013. (Apresentação de Trabalho/Conferência ou palestra).

• MATSUMOTO, P. K. ; MATSUMOTO, P. K. ; Stilhano, Roberta Sessa ; da SILVA, F. H. ; SAMOTO, VIVIAN Y. ; PERES, G. B. ; HAN, S. W. . Mesenchymal Stem Cells Do Not Prevent Alloantibody Response Against IDUA Used To Treat MPSI. 2013. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• MATSUMOTO, P. K. ; MATSUMOTO, P. K. ; STILHANO, R. S. ; da Silva, Flávia Helena ; Samoto, Vivian Y ; PERES, G. B. ; Han, S.W. . Intraperitoneal injection effect of modified mesenchymal stem cells after gene therapy of mucopolysaccharidosis type I. 2012. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• MATSUMOTO, P. K. ; STILHANO, R. S. ; da SILVA, F. H. ; Pereira,V.G. ; D Almeida,V. ; HAN, S. W. . IN VITRO ANALYSIS OF HUMAN α-L-IDURONIDASE GENE EXPRESSION USING SLEEPING BEAUTY SYSTEM AND MESENCHYMAL STEM CELL. 2010. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• MATSUMOTO, P. K. ; MATSUMOTO, P. K. ; STILHANO, R. S. ; da SILVA, F. H. ; Pereira,V.G. ; D Almeida,V. ; Han, S.W. . Terapia genica e celular para mucopolissacaridose tipo I utilizando celulas-tronco mesenquimais e Sleeping Beauty. 2010. (Apresentação de Trabalho/Simpósio).

• MATSUMOTO, P. K. ; STILHANO, R. S. ; da SILVA, F. H. ; Pereira,V.G. ; D Almeida,V. ; HAN, S. W. . Estudo in vitro e in vivo de expressão do gene alpha-L-iduronidase humana utilizando o sistema Sleeping Beauty. 2009. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• MATSUMOTO, P. K. ; STILHANO, R. S. ; da SILVA, F. H. ; Pereira,V.G. ; D Almeida,V. ; HAN, S. W. . ESTUDO IN VITRO DE EXPRESSÃO DO GEN A-L-IDURONIDASE HUMANA UTILIZANDO O SISTEMA SLEEPING BEAUTY. 2008. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• MATSUMOTO, P. K. ; STILHANO, R. S. ; da SILVA, F. H. ; Pereira,V.G. ; D´Almeida,V. ; HAN, S. W. . Estudo in vitro de expressão do gene a-L-iduronidase humana utilizando o sistema Sleeping Beauty. 2008. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• STILHANO, R. S. ; MATSUMOTO, P. K. ; HAN, S. W. . ENGENHARIA DE VETORES MINICIRCULARES PLASMIDIAIS E ANÁLISE DA TRANSFECÇÃO IN VITRO E IN VIVO. 2006. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• MATSUMOTO, P. K. ; Matsumoto, P.K. ; Apostila CUJA- capitulo ingles 2010 (Apostila de ingles).

• MATSUMOTO, P. K. ; membros cuja . Apostila CUJA- capitulo ingles 2009 (APOSTILA DE INGLÊS).

• MATSUMOTO, P. K. . Apostila CUJA- capitulo ingles 2008 (APOSTILA DE INGLÊS).

Outras produções

Projetos de pesquisa

• 2021 - Atual

  Terapia Gênica para Epidermólise Bolhosa Distrófica Recessiva: indução de exon skipping do gene COL7A1 através da edição gênica por Base-Editing, Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) . , Integrantes: Priscila Keiko Matsumoto Martin - Integrante / Roberta Sessa Stilhano - Integrante / Ricardo Weinlich - Coordenador / karina griesi - Integrante / davi coe torres - Integrante.

• 2021 - Atual

  Exoma 400 - perfil genetico da EB no Brasil, Descrição: Estabelecer um perfil genetico da população com epidermolise bolhosa no Brasil atraves do sequenciamento genetico. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Priscila Keiko Matsumoto Martin - Coordenador / vanessa kyomi arashiro ota - Integrante / luiza mariath - Integrante., Financiador(es): illumina - Auxílio financeiro.

• 2018 - Atual

  Tratamento Inovador para anemia falciforme- Uma doença negligenciada e de alta relevância social, Descrição: Terapia genica ex vivo utilizando a ferramenta CRISPR/Cas9 para correção da mutação no gene HBB em celulas CD34+ para produção de hemoglobina. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Priscila Keiko Matsumoto Martin - Coordenador / luiz vicente rizzo - Integrante / Ricardo Weinlich - Integrante / andrea sertie - Integrante / karina tozato maio - Integrante / karina griesi - Integrante / mariana morato marques - Integrante / mariana de lira benicio - Integrante / davi coe torres - Integrante / lucas assis pereira - Integrante / barbara ferri moraschi - Integrante / natalia torres - Integrante.

• 2017 - Atual

  Edição genômica com CRISPR/Cas9 com produção da persistência hereditária da hemoglobina fetal tipo brasileira como estratégia de tratamento da anemia falciforme, Descrição: A anemia falciforme (AF) é uma alteração grave, crônica e sem dúvida representa um problema de saúde pública no Brasil. A AF é causada por uma mutação de ponto no códon 6 do gene da β globina, levando a uma substituição do ácido glutâmico por valina e consequente produção de uma hemoglobina estruturalmente anormal, a hemoglobina S. Embora a causa da doença seja conhecida há mais de cinquenta anos, as opções terapêuticas ainda são bastante limitadas. A única droga aprovada para tratamento é a hidroxiuréia, e a única terapia curativa é o transplante de medula-óssea. O transplante ainda é limitado a grandes centros de saúde e apenas a alguns pacientes, que possuem doadores compatíveis. Assim, faz-se necessário o desenvolvimento de tratamentos que possam melhorar o prognóstico da doença. Níveis elevados de HbF no sangue estão associados com uma melhor evolução clínica em pacientes com AF. Em alguns indivíduos, a expressão do gene da globina γ persiste na fase adulta em níveis elevados, o que é denominado de persistência hereditária da hemoglobina fetal (PHHF). Nesse projeto propomos uma forma de terapia genica utilizando o Sistema CRISPR/Cas9 para aumento de HbF através da inserção da mutação -195C>G na região promotora do gene HBG1.. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Priscila Keiko Matsumoto Martin - Integrante / Marcus Alexandre Firenzi Corat - Integrante / Fernando Ferreira Costa - Coordenador., Financiador(es): Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - Bolsa / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - Auxílio financeiro.

• 2012 - 2016

  Terapia genica e celular para Epidermolise Bolhosa Distrofica Recessiva, Descrição: A EBDR é uma doença monogênica muito agressiva e sem tratamento eficaz até o momento. Como os pacientes EBDR sofrem exclusivamente da deficiência do colágeno VII, a solução lógica seria fornecer esta proteína continuamente na pele/epitélio durante toda a vida deles; mas como esta solução pode se tornar realidade? A nossa proposta neste projeto é utilizar as células-tronco hematopoiéticas da medula óssea modificadas para expressar o gene COL7A1 sob o controle de promotores de macrófagos. Assim, espera-se que a expressão de colágeno VII ocorra especificamente na pele e nos epitélios, que sofrem de inflamação crônica devido à formação de bolhas e atraem macrófagos a este local, durante toda a vida do animal e quando inflamação estiver ativa. O uso de promotores específicos de macrófagos como o promotor Scavenger é mais viável para a doença que necessita de colágeno VII apenas nos locais onde há separação da derme com a epiderme. Estas regiões sofrem constantes processos inflamatórios, que possibilitam a migração de macrófagos para o local. Para que este trabalho seja mais fácil de levar para fase clínica no futuro, os vetores serão desenhados na base de vetores de plasmídeo com o sistema de transposon Sleeping Beauty. Dessa forma, os diversos problemas imunológicos provocados pelo uso das partículas virais como vetores serão solucionados. Devido a ausência do modelo animal de epidermólise bolhosa no nosso país, busca-se a possibilidade de desenvolver parte deste projeto no Instituto Thomas Jefferson, Estados Unidos, onde este modelo terapêutico está bem consolidado. A segunda parte deste projeto consiste no desenvolvimento de enxertos de pele in vitro utilizando fibroblastos de pacientes modificados com o gene COL7A1 sob controle do promotor CAGGS constitutivo. Algumas regiões da pele de pacientes com EBDR estão muito afetadas e necessitam de um método alternativo mais imediato devido a severidade da doença. Muitos trabalhos mostraram que o transplante de pele é um método alternativo utilizando os vetores virais, mas nenhum ainda validou o uso do transposon Sleeping Beauty. Dessa forma, buscamos uma terapia eficaz para o tratamento de EBDR em duas vias, e esperamos que a lógica desta terapia seja aplicada também em outras doenças monogênicas.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (0) / Especialização: (0) / Mestrado acadêmico: (0) / Mestrado profissional: (0) / Doutorado: (1) . , Integrantes: Priscila Keiko Matsumoto Martin - Integrante / SAng Won Han - Coordenador / Olga Igoucheva - Integrante / Vitali Alexeev - Integrante / Jouni Uitto - Integrante / SAMOTO, VIVIAN YOCHIKO - Integrante / STILHANO, ROBERTA S. - Integrante.

• 2011 - 2015

  TERAPIA GÊNICA PARA REDUÇÃO DE FIBROSE EM MODELO DE RATOS ESPONTANEAMENTE HIPERTENSOS, Descrição: Descrição: A fibrose é uma das principais sequelas adquiridas após a lesão muscular, principalmente nas lesões mais severas, na qual a cicatrização ocorre de forma lenta. O processo fibrótico impede a contração muscular adequada e pode levar a contraturas musculares e a dor crônica. Além da perda funcional, o tecido cicatrizado tende a sofrer novas lesões devido à alteração da natureza tecidual. Sabe-se que o processo fibrótico é a principal causa de limitação de regeneração do músculo e é agravado pela hipertensão. Dessa forma, os ratos SHR são um bom modelo de estudo para relacionar a lesão de músculo esquelético e a hipertensão. A busca de fatores que retardem a fibrose é de extrema relevância e o receptor AT1 tem sido o principal alvo de estudo porque está intimamente relacionado ao processo fibrótico, e o uso de bloqueadores desse receptor tem mostrado benefícios na regeneração tecidual. No entanto, há necessidade de entender melhor este mecanismo no músculo esquelético e buscar novos recursos terapêuticos para aplicação in loco ou sistêmica. Recentemente, nosso grupo e outros demonstraram que o GM-CSF foi capaz de promover aumento da massa e força muscular, além de reduzir drasticamente a fibrose. Entretanto, alguns trabalhos mostraram uma ação pró-fibrótica dessa citocina, e que sua superexpressão leva a um aumento de TGF-β1. Já o G-CSF possui propriedades que retardam a fibrose e diminuem a expressão de TGF-β1 e do receptor AT1. Não se sabe a relação entre essas citocinas e o receptor AT1, mas a descoberta do mecanismo de interação entre esses fatores é essencial para a busca de uma terapia eficaz. Na base destas informações, o principal objetivo deste projeto é estudar efeito da hipertensão e das citocinas na fibrose, e elaborar procedimentos de terapia gênica para redução de fibrose no músculo esquelético lesado de ratos SHR... , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Priscila Keiko Matsumoto Martin - Integrante / HAN, SANG W. - Coordenador / Martins, Leonardo - Integrante / STILHANO, ROBERTA S. - Integrante.

• 2009 - 2011

  TERAPIA GÊNICA DE MUCOPOLISSACARIDOSE TIPO I COM O SISTEMA Sleeping Beauty e células-tronco mesenquimais em modelo murino, Descrição: A MPSI é uma doença de acúmulo lisossomal sistêmico de caráter autossômico recessivo, que leva a uma série de alterações metabólicas e compromete o desenvolvimento dos portadores, requerendo fornecimento constante da IDUA para aliviar a manifestação da doença. Vários estudos de terapia gênica em modelos animais foram realizados utilizando, principalmente, vetores virais, no entanto, não há um procedimento terapêutico validado até o momento. Para que a terapia gênica se torne realidade para o tratamento de MPSI, há três condições fundamentais a serem incorporadas no tratamento: expressão prolongada de IDUA, redução de imunogenicidade contra IDUA e aumento de biossegurança com vetores e células modificadas geneticamente. Como objetivo deste trabalho, buscamos responder a seguinte questão: As células-tronco mesenquimais (CTM) modificadas com o gene IDUA através do Sistema Sleeping Beauty podem fornecer a enzima suficiente para beneficio dos camundongos KO-IDUA longamente sem alertar o sistema imune? Esta pergunta se baseia na propriedade imunossupressora das CTM associado ao vetor não-viral e integrativo Sleeping Beauty, que poderão satisfazer as três condições citadas. Inicialmente, vários vetores com diferentes promotores foram construídos e testados em CTM utilizando nucleofecção, eletroporação e Fugene para transfecção. Além disso, as transposases SB11 e SB100X foram avaliadas com objetivo de obter maior nível de transfecção, transposição, expressão e duração gênica. Em todas as situações a SB100X levou a uma maior expressão de GFP e IDUA por mais tempo. A nucleofecção nas MSC-KO permitiu uma expressão gênica de 80%, mais eficiente em comparação à eletroporação e ao Fugene. O plasmidio pT2-CAGGS-IDUA, que controla a expressão da IDUA pelo promotor CAGGS, com pCMV-SB100X teve atividade de IDUA nas MSC-KO 100 vezes maior que o normal, e permaneceu elevado por 30 dias, enquanto que o vetor com o promotor CMV sofreu queda na expressão, indicando silenciamento. Para facilitar a injeção de CTM modificadas com IDUA, duas vias foram avaliadas: intravenosa e intraperitoneal. A injeção intravenosa levou alta mortalidade de animais no inicio do experimento, provavelmente, por embolia. Por outro lado, a injeção via intraperitoneal não levou à nenhuma morte e o procedimento foi bem mais fácil e reproduzível. Através do uso de CTM marcadas com radioisótopo 111I, localizamos a presença de CTM em quase todos os órgãos, principalmente os localizados próximo ao peritônio, como o baço. Para terapia, os camundongos KO-IDUA adultos receberam CTM expressando IDUA via intraperitoneal com 3 injeções. A atividade de IDUA foi detectada no plasma de 5 animais no primeiro dia após a segunda injeção, com queda ao longo dos dias. Foi detectado anticorpos anti-IDUA nestes animais, o que justifica a queda da expressão gênica. Mesmo com a expressão da IDUA não sustentada, os animais tratados tiveram redução de dermatan sulfato no baço e heparan sulfato no fígado, e consequentemente uma melhora organizacional do fígado e redução na área dos hepatócitos. Estes resultados indicam que a administração de CTM via intraperitoneal é útil para células grandes como as CTM. Sua propriedade imunossupressora não foi eficiente para reduzir imunogenicidade contra IDUA expressa permanentemente via Sleeping Beauty, mas a atividade de IDUA inicial foi suficiente para reduzir GAG no baço e no fígado.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Priscila Keiko Matsumoto Martin - Integrante / SAng Won Han - Coordenador / da Silva, Flávia Helena - Integrante / Yara Maria Correa da Silva Michelacci - Integrante / Vania D'Almeida - Integrante / SAMOTO, VIVIAN YOCHIKO - Integrante / STILHANO, ROBERTA S. - Integrante.

• 2006 - 2008

  Estudo in vitro de expressão do gene IDUA humano usando Sleeping Beauty e células-tronco mesenquimais, Descrição: O Sleeping Beauty (SB) é um sistema de transposição não-viral que expressa uma transposase capaz de integrar genes em seqüências específicas do genoma de células de mamíferos permanentemente. A necessidade de expressão gênica permanente obtida por esse sistema de transposição parece ser ideal para tratamento de doenças genéticas, como mucopolissadaridoses (MPS). A MPS tipo I é uma das mais freqüentes doenças de acúmulo lisossomal, e se caracteriza por mutações no gene que codifica a hidrolase lisossomal α-L-iduronidase (IDUA). A terapia gênica com o sistema SB poderá trazer soluções alternativas ou melhores que a terapia de reposição enzimática (ERT) e transplante de medula-óssea. Neste projeto dois novos procedimentos foram elaborados e estudados quanto ao tempo e nível de expressão gênica em modelo animal: terapia gênica in vivo e in vitro com uso de células tronco de medula óssea de animais nocaute para o gene IDUA (MSC-KO). Os vetores de expressão constitutiva de IDUA, uP-IDUA e pT2-CMVi-IDUA foram construídos, contendo ambos o promotor CMV com intron 1 e o último as seqüências IRs. As linhagens de células MSC-KO e NIH3T3 estudadas não tiveram expressão do gene presente no vetor pT2-CMVi-IDUA na presença ou ausência da transposase SB. No entanto a expressão gênica foi observada em HEK293 e HeLa, porém na presença da transposase SB não houve permanência da atividade de IDUA ao longo do tempo. O vetor de expressão pT2-IDUA, contendo o promotor CMV controlando a expressão de IDUA, promoveu atividade de IDUA foi permanente por 44 dias na presença da transposase SB11. Verificou-se que as sequencias IR/DR apresentam uma atividade reforçadora no plasmidio pT2-IDUA através da construção e análise da atividade dos plasmidios pVAX-IDUA, pT2-IDUA-ΔIRdir e pT2-IDUA-ΔIResq. Animais nocaute para ao gene IDUA eletroporados com os plasmidios pCMV-SB11 e pT2-IDUA apresentaram um aumento da atividade de IDUA de até 1,75 no sangue total, durante 60 dias com declínio após esse período.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Priscila Keiko Matsumoto Martin - Integrante / Sang Won Han - Coordenador / Roberta Sessa Stilhano - Integrante.

Prêmios