Processo para a produção da proteina do interferon beta-cis humano recombinante e proteína de interferon beta-cis humano recombinante

  • Número do pedido da patente:
  • PI 9710828-6 A2
  • Número original:
  • PI 9606270-3 (Data:18/12/1996);
  • Data do depósito:
  • 18/12/1997
  • Data da publicação:
  • 26/06/2001
Inventores:
  • Classificação:
  • A61K 38/21
    Prepara??es medicinais contendo pept?deos; / Pept?deos tendo mais de 20 amino?cidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Seus derivados; / de animais; de humanos; / Citocinas; Linfocinas; Interferons; / Interferons;
    ;
    C12N 15/70
    Muta??o ou engenharia gen?tica; DNA ou RNA concernentes ? engenharia gen?tica, vetores, p. ex. plasm?deos ou seu isolamento, preparação ou purifica??o; Uso de seus hospedeiros; / Tecnologia do DNA recombinante; / Introdu??o de material gen?tico ex?geno usando vetores; Vetores; Utiliza??o de hospedeiros para os mesmos; Regula??o da express?o; / Vetores ou sistemas de express?o especialmente adaptados ? E.coli;
    ;
    C07K 14/565
    Pept?deos tendo mais de 20 amino?cidos; Gastrinas; Somatoestatinas; Melanotropinas; Derivados dos mesmos; / de animais; de seres humanos; / Citocinas; Linfocinas; Interferons; / Interferons (IFN); / beta-IFN;
    ;
    C12N 5/08
    C?lulas n?o diferenciadas de animais ou plantas , por ex., linhagem de c?lulas; Tecidos; Sua cultura ou manuten??o; Seus meios de cultura; / C?lulas ou tecidos humanos ;
    ;
    C12N 15/22
    Muta??o ou engenharia gen?tica; DNA ou RNA concernentes ? engenharia gen?tica, vetores, p. ex. plasm?deos ou seu isolamento, prepara??o ou purifica??o; Uso de seus hospedeiros; / Tecnologia do DNA recombinante; / Fragmentos de DNA ou RNA; Suas formas modificadas; / Genes que codificam prote?nas animais; / Interferons; Linfocinas; Citocinas; / Interferons; / Betainterferons;
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Patente de invenção para o . "PROCESSO PARA PRODUÇÃO DA PROTEÍNA DO INTERFERON BETA- CIS HUMANO RECOMBINANTE E PROTEÍNA DE INTERFERON BETA-CIS HUMANO RECOMBINANTE". . A presente invenção diz respeito a proteína de interferon beta-cis humano e do processo de produção da proteina beta-cis humano recombinante produzida através de técnicas de engenharia genética, para ser empregada em uso clínico humano ou veterinário ou ainda em pesquisa. O DNA contendo o gene para a proteína interferon beta-cis humano foi obtido realizando-se as seguintes etapas: (1) Cultivo primário de células amnióticas humanas ,(2) Infecção com o vírus Sendai, (3)Obtenção de mRNA, (4) Lise das células,(5) Fracionamento de RNA, (6) Dissolução de RNA, (7) Extração de RNA, (8) Precipitação de RNA, (9) Sintese de primeira fita de cDNA, (10) Amplificação do DNA, (11) Fracionamento do DNA, (12) Purificação do DNA, (13) Digestão do DNA, (14) Clonagem, (15) Ligação do DNA ao vetor, 16) Transformação das bactérias competentes, (17) Seleção dos clones positivos, (18) Seqüenciamento dos clones, (19) Produção da proteína, (20) Indução da bactéria,(21) Lise da bactéria,(22) Purificação da proteína. Sendo que a proteína de interferon beta-cis humano recombinante apresenta na sua estrutura a seguinte seqüência de aminoácidos: Met-Ser-Tyr-Asn-Leu-Leu-Gly-Phe-Leu-Arg-Ser-Ser-Asn-Phe-Gln-Cys-Gln-Lys-Leu-Leu-Trp-Gln-Leu-Asn-Gly-Arg-Leu-Glu-Tyr-Asp-Leu-Lys-Asp-Arg-Met-Asn-Phe-Asp-Ile-Pro-Glu-Glu-Ile-Lys-Gln-Leu-Gln-Gln-Phe-Gln-Lys-Glu-Asp-Ala-Ala-Leu-Thr-Ile-. Cys. -Glu-Met-Leu-Gln-Asn-Ile-Phe-Ala-Ile-Phe-Arg-Gln-Asp-Ser-Ser-Ser-Thr-Gly-Trp-Asn-Glu-Thr-Ile-Val-Glu-Asn-Leu-Leu-Ala-Asn-Val-Tyr-His-Gln-Ile-Asn-His-Leu-Lys-Thr-Val-Leu-Glu-Glu-Lys-Leu-Glu-Lys-Glu-Asp-Phe-Thr-Arg-Gly-Lys-Leu-Met-Ser-Ser-Leu-His-Leu-Lys-Arg-Tyr-Tyr-Gly-Arg-Ile-Leu-His-Tyr-Leu-Iys-Ala-Lys-Glu-Tyr-Ser-His-Cys-Ala-Trp-Thr-Ile-Val-Arg-Val-Glu-Ile-Leu-Arg-Asn-Phe-Tyr-Phe-Ile-Asn-Arg-Leu-Thr-Gly-Tyr-Leu-Arg-Asn

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