Biossensor eletroquímico à base da enzima acetilcolinesterase contendo a macroalga cladaphropsis membranácea para detecção de inseticidas organofosforados

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  • Número do pedido da patente:
  • BR 10 2013 023225 4 A2
  • Data do depósito:
  • 02/09/2013
  • Data da publicação:
  • 03/11/2015
Inventores:
  • Classificação:
  • G01N 27/26
    Investiga??o ou an?lise de materiais pelo uso de meios el?tricos, eletroqu?micos, ou magn?ticos; / pela investiga??o de vari?veis eletroqu?micas; pelo uso de eletr?lise ou eletroforese;
    ;
    C12Q 1/46
    Processos de medi??o ou ensaio envolvendo enzimas ou micro-organismos; Composições para esse fim; Processos de preparação de tais composições; / envolvendo hidrolase; / envolvendo esterase; / envolvendo colinesterase;
    ;

BIOSSENSOR ELETROQUÍMICO À BASE DA ENZIMA ACETILCOLINESTERASE CONTENDO A MACROALGA Cladaphropsis niembranãcea PARA DETECÇÃO DE INSETICIDAS ORGANOFOSFORADOS A presente invenção constitui-se em um biossensor amperormétrico.constituído de sensor do tipo serigrafado impresso em suporte de PVC com uma pasta de grafite modificada, contendo uma enzima imobilizada e a macroalga Cladaphropsis membranácea. O biossensor é de fácil construção, e elevadas precisão e sensibilidade na detecção, em Laboratório ou in loca, de inseticidas organofosforados. A enzima pode ser obtida de qualquer fonte (comercial, extraída de camundongos ou mesmo geneticamente modificadas). O modo de ação da enzima se dá pela hidrólise da acetiltiocolina (substrato), com geração de corrente elétrica, que é monitorada pelo acoplamento de um potenciostato ao biossensor. A corrente inicial encontra-se na ordem de nanoamperes (nA). O procedimento de detecção se dá pela reação entre a enzima acetilcolinesterase e o seu substrato, antes e após inibição da enzima mediante incubação desta em uma solução contendo o inseticida, ou mesmo através do contato do biossensor com uma amostra de água ou alimento supostamente contaminada com o inibidor. A inibição da enzima pode ser calculada em termos percentuais, pela redução a corrente gerada durante a reação enzimática, após inibição. A inibição é proporcional à concentração do agente do nervo presente, e pode ser efetuada em amostras líquidas (água, sangue, urina), como também pastosa (alimentos, vegetais, etc.), onde o biossensor pode ser mergulhado