Helena Bacha Lopes

Pós-doutorado

Formação complementar

Idiomas

Áreas de atuação

Organização de eventos

Participação em eventos

Participação em bancas

Orientou

Produções bibliográficas

• DE ARAÚJO FILHO, NILTON PIRES ; VALE, DANIEL SANTIAGO ; SOUZA, ALANN THAFFARELL PORTILHO ; BORBA, ALEXANDRE MEIRELES ; FREITAS, GILEADE PEREIRA ; LOPES, HELENA BACHA . Internal fixation of short bilateral sagittal split osteotomy of the mandibular ramus: A mechanical evaluation. EUROPEAN JOURNAL OF ORAL SCIENCES , v. 133, p. 1, 2025.

• SOUZA, ALANN THAFFARELL PORTILHO ; FREITAS, GILEADE PEREIRA ; LOPES, HELENA BACHA ; WEFFORT, DENISE ; ADOLPHO, LETICIA FAUSTINO ; GOMES, MARIA PAULA OLIVEIRA ; OLIVEIRA, FABIOLA SINGARETTI ; ALMEIDA, ADRIANA LUISA GONÇALVES ; BELOTI, MARCIO MATEUS ; ROSA, ADALBERTO LUIZ . Diabetes Mellitus Impairs the Bone Regeneration Capacity of Mesenchymal Stromal Cell-Based Therapy. ARCHIVES OF MEDICAL RESEARCH , v. 56, p. 103234, 2025.

• SOUZA, ALANN THAFFARELL PORTILHO ; FREITAS, GILEADE PEREIRA ; LOPES, H. B. ; WEFFORT, DENISE ; ADOLPHO, LETICIA FAUSTINO ; GOMES, M. P. O. ; OLIVEIRA, FABIOLA SINGARETTI ; ALMEIDA, ADRIANA LUISA GONÇALVES ; BELOTI, MARCIO MATEUS ; ROSA, ADALBERTO LUIZ . Mesenchymal stem cell-based therapy for osteoporotic bones: Effects of the interaction between cells from healthy and osteoporotic rats on osteoblast differentiation and bone repair. LIFE SCIENCES , v. 340, p. 122463, 2024.

• SOUZA, ALANN THAFFARELL PORTILHO ; FREITAS, GILEADE PEREIRA ; LOPES, H. B. ; WEFFORT, DENISE ; ADOLPHO, LETICIA FAUSTINO ; GOMES, M. P. O. ; OLIVEIRA, FABIOLA SINGARETTI ; ALMEIDA, ADRIANA LUISA GONÇALVES ; BELOTI, MARCIO MATEUS ; ROSA, ADALBERTO LUIZ . Efficacy of mesenchymal stem cell-based therapy on the bone repair of hypertensive rats. ORAL DISEASES , v. 00, p. 1-11, 2024.

• COSTA, MONIQUE THAIS SILVA DA ; FREITAS, GILEADE PEREIRA ; PERAZZO, MATHEUS FRANÇA ; BORBA, ALEXANDRE MEIRELES ; LOPES, HELENA BACHA . Facial rejuvenation: a bibliometric analysis. CONCILIUM (ENGLISH LANGUAGE EDITION) , v. 24, p. 49-71, 2024.

• LABRE, GABRIEL BARBOSA ; SILVA, GABRIELLY KRISTINY SOUSA E ; JARDIM, ALEXANDRE FAUSTO DA VEIGA ; ZAMPIERI, THABATA FREDERICO IZELLI ; LOPES, HELENA BACHA . Reabsorção radicular causada por erupção tardia de dente permanente: relato de caso. CUADERNOS DE EDUCACIÓN Y DESARROLLO , v. 16, p. e6092, 2024.

• COSTA, MONIQUE THAIS SILVA DA ; ZAMPIERI, THABATA FREDERICO IZELLI ; VOLPATO, LUIZ EVARISTO RICCI ; MOREIRA, ANA LETÍCIA DAHER ROSA ; FREITAS, GILEADE PEREIRA ; BORBA, ALEXANDRE MEIRELES ; LOPES, HELENA BACHA . Preenchimento labial com ácido hialuronico em pacientes com fissura labial - relato de casos. CUADERNOS DE EDUCACIÓN Y DESARROLLO , v. 16, p. e6155, 2024.

• GUIMARAES, A. A. ; LIMA, G. M. D. O. ; LOPES, H. B. . IMPLICAÇÕES DA DIABETES MELLITUS NA IMPLANTODONTIA: UMA REVISÃO NARRATIVA. Brazilian Journal of Surgery and Clinical Research , v. 48, p. 50-58, 2024.

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• ADOLPHO, LETICIA FAUSTINO ; RIBEIRO, LARISSA MAYRA SILVA ; FREITAS, GILEADE PEREIRA ; LOPES, HELENA BACHA ; GOMES, MARIA PAULA OLIVEIRA ; FERRAZ, EMANUELA PRADO ; GIMENES, ROSSANO ; BELOTI, MARCIO MATEUS ; ROSA, ADALBERTO LUIZ . Mesenchymal Stem Cells Combined with a P(VDF-TrFE)/BaTiO3 Scaffold and Photobiomodulation Therapy Enhance Bone Repair in Rat Calvarial Defects. Journal Of Functional Biomaterials , v. 14, p. 306, 2023.

• ADOLPHO, LETICIA FAUSTINO ; LOPES, HELENA BACHA ; FREITAS, GILEADE PEREIRA ; WEFFORT, DENISE ; CAMPOS TOTOLI, GABRIELA GUARALDO ; LOYOLA BARBOSA, ANA CAROLINA ; FREIRE ASSIS, RAHYZA INACIO ; SILVERIO RUIZ, KARINA GONZALES ; ANDIA, DENISE CARLETO ; ROSA, ADALBERTO LUIZ ; BELOTI, MARCIO MATEUS . Human periodontal ligament stem cells with distinct osteogenic potential induce bone formation in rat calvaria defects. Regenerative Medicine , v. 1, p. x, 2022.

• NOGUEIRA, LUCAS FABRÍCIO BAHIA ; CRUZ, MARCOS ANTÔNIO EUFRÁSIO ; TOVANI, CAMILA BUSSOLA ; LOPES, HELENA BACHA ; BELOTI, MÁRCIO MATEUS ; CIANCAGLINI, PIETRO ; BOTTINI, MASSIMO ; RAMOS, ANA PAULA . Curcumin-loaded carrageenan nanoparticles: fabrication, characterization, and assessment of the effects on osteoblasts mineralization. COLLOIDS AND SURFACES B-BIOINTERFACES , v. x, p. 112622-x, 2022.

• MOMESSO, GUSTAVO ANTONIO CORREA ; POLO, TARIK OCON BRAGA ; DA SILVA, WILLIAM PHILLIP PEREIRA ; BARBOSA, STÉFANY ; FREITAS, GILEADE P. ; LOPES, HELENA BACHA ; ROSA, ADALBERTO LUIZ ; CORDEIRO, JAIRO MATOZINHO ; TORO, LUAN FELIPE ; CHIBA, FERNANDO YAMAMOTO ; MATSUSHITA, DORIS HISSAKO ; LOUZADA, MARIO JEFFERSON QUIRINO ; DA CRUZ, NILSON CRISTINO ; BARÃO, VALENTIM A.R. ; FAVERANI, LEONARDO P. . Miniplates coated by plasma electrolytic oxidation improve bone healing of simulated femoral fractures on low bone mineral density rats. Materials Science & Engineering C-Materials for Biological Applications , v. 120, p. 111775, 2021.

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• LOPES, HB ; SOUZA, A. T. P. ; DE OLIVEIRA, F. S. ; WEFFORT, D. ; FREITAS, G. P. ; FERNANDES, R. R. ; ROSA, A. L. ; BELOTI, M. M. . A proteína Agrin regula a diferenciação osteoblástica através da modulação das vias Wnt e BMP. 2020. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• LOPES, H. B. . Palestra/Disciplina - Cirurgias Experimentais. 2019. (Apresentação de Trabalho/Outra).

• LOPES, H. B. ; FREITAS, G. P. ; DE OLIVEIRA, PAULO T. ; ELIAS, C. N. ; TYE, C. ; LIAN, J. B. ; STEIN, J. ; STEIN, G. ; ROSA, AL ; BELOTI, MM . Titanium with nanotopography induces osteoblast differentiation by activating an integrin beta 3/Wnt/BMP circui. 2018. (Apresentação de Trabalho/Seminário).

• LOPES, HB ; Freitas G.P. ; TYE, C. ; ELIAS, C. N. ; LIAN, J. B. ; STEIN, J. ; ROSA, A. L. ; BELOTI, MM . USE OF CRISPR-CAS9 TO INVESTIGATE THE ROLE OF INTEGRIN BETA 3 ON OSTEOBLAST DIFFERENTIATION INDUCED BY TITANIUM WITH NANOTOPOGRAPHY. 2018. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• LOPES, H. B. . Palestra/Disciplina - Cirurgia Experimentais. 2018. (Apresentação de Trabalho/Outra).

• LOPES, H. B. ; FANTACINI, D. M. C. ; FREITAS, G. P. ; PICANÇO-CASTRO, V. ; COVAS, D. T. ; ELIAS, C. N. ; DE OLIVEIRA, PT ; ROSA, A. L. ; BELOTI, M. M. . Participation of ITGAV on osteoblast induction by titanium with nanotopography. 2017. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• LOPES, H. B. ; FERRAZ, EMANUELA P. ; OLIVEIRA, F. S. ; CROVACE, M. C. ; PEITL FILHO, O. ; DE OLIVEIRA, PT ; BELOTI, M. M. ; ROSA, A. L. . Análise Diferencial em Larga Escala do Perfil de Expressão Gênica de Osteoblastos. 2016. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• LOPES, H. B. ; FERRAZ, EP ; ALMEIDA, A. L. ; ABUNA, R. P. F. ; HASSAN, MOHAMMAD ; ROSA, A. L. ; BELOTI, M. M. . Participation of microRNA‐ 34a/RANKL in the osteogenic potential of the Poly(vinylidene‐ trifluorethylene)/barium titanate membrane. 2016. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• LOPES, H. B. ; FREITAS, G. P. ; FLORIO, PEDRO ; DE OLIVEIRA, PT ; ROSA, A. L. ; BELOTI, M. M. . Regulation of genes involved in the integrin signalling pathway induced by titanium with nanotopography. 2016. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• LOPES, H. B. . Técnicas de Exodontia de Terceiros Molares Inclusos. 2016. (Apresentação de Trabalho/Conferência ou palestra).

• LOPES, H. B. ; ELIAS, C. N. ; DE OLIVEIRA, PT ; ROSA, A. L. ; BELOTI, M. M. . Effect of titanium surface topography on integrin signaling pathway and osteoblast genotype expression.. 2016. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• LOPES, H. B. ; FERRAZ, EMANUELA P. ; HASSAN, M. Q ; ROSA, A. L. ; BELOTI, M. M. . Large-scale Analysis of MicroRNA Expression in Newly Formed Bone in Contact with Poly(vinylidene-trifluoroethylene)/barium Titanate Composite. 2015. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• LOPES, H. B. ; SANTOS, T. S. ; OLIVEIRA, F. S. ; FREITAS, G. P. ; ALMEIDA, A. L. ; GIMENES, R. ; ROSA, A. L. ; BELOTI, M. M. . Gene expression analysis of bone tissue grown on P(VDF-TrFE)/BT membrane implanted in rat calvarial defects.. 2013. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• LOPES, H. B. ; ABUNA, R. P. F. ; OLIVEIRA, F. S. ; ROSA, A. L. ; BELOTI, M. M. . Avaliação do Potencial Osteogênico de Células-Tronco Mesenquimais Derivadas de Medula Óssea e Tecido Adiposo. 2012. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• LOPES, H. B. ; MENDONCA., J. C. G. ; Freitas G.P. ; BOING, F. . TRATAMENTO DA ANQUILOSE DA ARTICULAÇÃO TÊMPORO-MANDIBULAR: ESTUDO RETROSPECTIVO. 2010. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• LOPES, H. B. ; Pedrazzi, V . Avaliação do teor de gel fluoretado perdido por aplicação tópica. 2007. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• LOPES, H. B. ; Pedrazzi, V . COMPARASION OF THE MICROBIOTA OF PERIODONTAL AND IMPLANT-RELATED SITES USING THE CHECKERBOARD DNA-DNA HYBRIDIZATION METHOD. 2006. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• LOPES, H. B. . Abordagem Odontológica em pacientes portadores de Mieloma Multiplo 2008 (Monografia).

Outras produções

Projetos de pesquisa

• 2025 - Atual

  Estratégias de engenharia tecidual associada a terapia de fotobiomodulação para o reparo do defeitos ósseos críticos, Projeto certificado pelo(a) coordenador(a) Gileade Pereira Freitas em 22/04/2025., Descrição: Os defeitos ósseos na região bucomaxilofacial representam um desafio significativo em odontologia, afetando a funcionalidade, a estética e a qualidade de vida dos pacientes. Tradicionalmente, esses defeitos podem ser tratados com enxertos ósseos autógenos, alógenos ou xenógenos, sendo que cada um apresenta vantagens e desvantagens. Nesse sentido, a área de engenharia tecidual tem se tornado promissora, combinando princípios da biologia, química, engenharia e ciência dos materiais para desenvolver biomateriais que atuem como substitutos biológicos, restaurando, mantendo ou melhorando a função de diferentes tecidos e órgãos. Com os avanços na compreensão dos mecanismos de reparo ósseo e o desenvolvimento de biomateriais com diferentes conformações - como membranas (2 dimensões, 2D) ou scaffolfds (3 dimensões, 3D) - novas perspectivas para o tratamento de defeitos ósseos têm surgido. Adicionalmente, a aplicação da terapia de fotobiomodulação (TFBM) como coadjuvante no tratamento de defeitos ósseos tem sido considerada como benéfica em diversos estudos, melhorando o reparo ósseo em comparação aos grupos que não receberam a TFBM. Nesse contexto, o presente projeto é composto por três subprojetos, cujos objetivos são: (1) Investigar a utilização da membrana Ora-aid associado com a TFBM para regenerar o tecido ósseo; (2) Investigar a utilização de grânulos de Biosilicato associado com a TFBM para regenerar o tecido ósseo; (3) Investigar a utilização de scaffolds de PLA-TCP-SiO2 associados com a TFBM para regenerar o tecido ósseo. Para o desenvolvimento dos subprojetos, ratos machos, da linhagem Wistar, serão utilizados para criação de defeito ósseo crítico na calvária. Esses defeitos serão tratados com a membrana de Ora-aid, grânulos de Biosilicato ou scaffolds de PLA-TCP-SiO2, associados a terapia de fotobiomodulação. Ao final de 4 semanas, a avaliação da formação óssea será realizada através de análise microtomográfica, histológica e imunohistoquímica.. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) / Doutorado: (2) . , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Integrante / Gileade Pereira Freitas - Coordenador / Virgilio Moreira Roriz - Integrante / LAIZ MOREIRA DE PAULA - Integrante / Natália de Queiroz Melo - Integrante / Higor Venâncio de Melo - Integrante / Diego Antônio Costa ARANTES - Integrante / ANA VITÓRIA LOBO DE SOUZA - Integrante / Thaisângela Rodrigues Lopes e Silva Gomes - Integrante / Rodrigo Rocha Andrade - Integrante.

• 2024 - Atual

  AVALIAÇÃO DO POTENCIAL DA TANSHINONA EM INIBIR A PERDA ÓSSEA INDUZIDA POR INFLAMAÇÃO: ESTUDO EM MODELO DE CALVÁRIA DE CAMUNDONGO, Projeto certificado pelo(a) coordenador(a) Gileade Pereira Freitas em 29/04/2025., Descrição: Introdução. A estrutura óssea consiste em um componente complexo, heterogêneo e estruturado, composto por hidroxapatita, e a sua composição celular apresentam-se células precursoras ao tratar-se da modulação e densidade óssea, como as osteogênicas, osteoblastos e osteoclastos. A perda óssea seja local ou sistêmica envolve uma influência direta de uma inflamação e metabolismo ósseo complexo, e o conhecimento dos mecanismos e vias de sinalização indicam a possibilidade de proceder com o bloqueio e tratamento imunomodelador de doenças ósseas induzidas por inflamação como, periodontais e peri-implantares. Objetivo. Avaliar o potencial da tanshinona (T06) na inibição da reabsorção óssea causada por um indutor de reações inflamatórias (Pam2CSK4) em um modelo de calvária de camundongo. Metodologia: Tratase de um estudo laboratorial in vivo e duplo-cego. O estudo será realizado no Biotério do Instituto de Patologia Tropical e Saúde Pública (IPSTP) da Universidade Federal de Goiás (UFG). O delineamento amostral será realizado pela amostragem de 21 camundongos. A avaliação serávalidada pelos pesquisadores e apresentados em três grupos: Grupo Sham (controle): injeção de solução salina (50 g/ 0,05mg). Grupo Pam2CSK4: injeção de Pam2CSK4 (50 g/0,05mg), sem o inibidor T06. Grupo Pam2CSK4+T06: injeção de Pam2CSK4 (50 g/ 0,05mg) com o inibidor T06 (1200 g/1,2mg). Os dados serão coletados após aprovação do projeto pelo Comitê de Ética no Uso de Animais. As análises laboratoriais serão a MicroCT e Histológica.. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) . , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Integrante / Gileade pereira freitas - Coordenador / Natália de Queiroz Melo - Integrante / Pedro Paulo Chaves de Souza - Integrante.

• 2024 - Atual

  ASSOCIAÇÃO DE SCAFFOLDS DE PLA-TCP-SIO2 E TERAPIA DE FOTOBIOMODULAÇÃO NO REPARO DE DEFEITO ÓSSEOS CRÍTICOS NA CALVÁRIA DE RATOS, Projeto certificado pelo(a) coordenador(a) Gileade Pereira Freitas em 22/04/2025., Descrição: O tecido ósseo geralmente possui excelente capacidade regenerativa, entretanto, quando se trata de defeitos ósseos oriundos de traumas, infecções, ressecção de tumores, anomalias esqueléticas, defeitos congênitos, a reparação total pode ser prejudicada, a depender de sua extensão e, portanto, é exigido o tratamento do defeito para a reabilitação do paciente. A engenharia de tecidos é uma alternativa inovadora para o tratamento de defeitos ósseos, que vem sendo bastante estudada e que geralmente se baseia na utilização de estruturas fabricada por biomateriais em diferentes apresentações, como membranas ou scaffolds. As técnicas para fabricação de scaffolds estão sendo aprimoradas ao longo dos últimos anos. O método de impressão tridimensional (3D), é uma tecnologia que permite um maior refinamento e controle da fabricação dos scaffolds, permitindo de forma versátil a personalização da geometria das estruturas, do tamanho e permeabilidade dos poros e a da propriedade de bioatividade das estruturas. Apesar de inúmeros compósitos já terem sido estudados, ainda é necessário a investigação de materiais mais adequados para a fabricação de scaffolds que permitam a completa regeneração óssea de defeitos críticos, com a formação de tecido ósseo resistente e similar ao tecido sadio e maduro. Atrelado a esse desafio, a associação da engenharia de tecidos com a terapia de fotobiomodulação (TFBM) pode favorecer ainda mais o sucesso dos tratamentos para regeneração óssea, que através de luz não ionizantes estimulam a atividade osteoblástica e como consequência, promovem o aumento no número de osteócitos, a deposição de matriz óssea e beneficiando a aceleração do reparo ósseo. Portanto, o objetivo desse estudo é avaliar in vivo a resposta tecidual de scaffolds 3D de ácido poliláctico combinado com #946;-trifosfato de cálcio e silício (PLA-TCP-SiO2) associados a TFBM na formação de tecido ósseo em defeitos ósseos críticos na calvária de ratos.. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Doutorado: (1) . , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Integrante / Gileade Pereira Freitas - Coordenador / Virgilio Moreira Roriz - Integrante / LAIZ MOREIRA DE PAULA - Integrante / Natália de Queiroz Melo - Integrante / Higor Venâncio de Melo - Integrante.

• 2024 - Atual

  EFEITO DO ORA-AID ASSOCIADO À TERAPIA DE FOTOBIOMODULAÇÃO PARA REGENERAÇÃO DE DEFEITOS ÓSSEOS CRÍTICOS, Projeto certificado pelo(a) coordenador(a) Gileade Pereira Freitas em 22/04/2025., Descrição: Os defeitos ósseos buco-maxilo-faciais representam um desafio muito importante e significativo em odontologia, afetando a funcionalidade, a estética e a qualidade de vida dos pacientes. Tradicionalmente, esses defeitos são tratados com enxertos ósseos autógenos, alógenos e xenógenos, sendo que cada um apresenta vantagens e desvantagens. Nesse sentido, a área de engenharia tecidual tem se tornado promissora combinando princípios da biologia, química, engenharia e ciência dos materiais para desenvolver biomateriais que atuem como substitutos biológicos restaurando, mantendo ou melhorando a função de tecidos e órgãos. Pensando nessa potencialidade dos biomateriais, surgiu no mercado o biomaterial denominado Ora-Aid. De acordo com o fabricante trata-se de um biomaterial utilizado principalmente na odontologia para auxiliar na cicatrização de lesões orais e no tratamento de feridas na mucosa bucal. No entanto, não foram encontrados estudos que relacionem o Ora-Aid com o processo de regeneração de defeitos ósseos e há pouca evidência disponível sobre o material como um todo. Baseado no exposto acima, o objetivo deste trabalho é investigar a utilização do biomaterial Ora-aid associado com a terapia de fotobiomodulação como uma técnica de regeneração dos defeitos ósseos no campo da odontologia, avaliando sua eficácia e sua aplicabilidade. Para isso, ratos machos, da linhagem wistar, pesando entre 150-250g, serão utilizados para criação de defeito ósseo crítico na calvária. Esses defeitos serão tradados com biomaterial Ora-aid associado a terapia de fotobiomodulação. A avaliação da formação óssea será realizada através de análise microtomográfica e histológica.. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) . , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Integrante / Gileade Pereira Freitas - Coordenador / Virgilio Moreira Roriz - Integrante / LAIZ MOREIRA DE PAULA - Integrante / Natália de Queiroz Melo - Integrante / Higor Venâncio de Melo - Integrante.

• 2022 - Atual

  AVALIAÇÃO DA INFLUÊNCIA DA SUPERFÍCIE MICROTEXTURIZADA DE TITÂNIO GRAU 2, 4 E 5 SOBRE O POTENCIAL OSTEOGÊNICO DE CÉLULAS TRONCO MESENQUIMAIS DERIVADAS DE MODELOS DE DIABETES MELLITUS TIPO 2, Projeto certificado pelo(a) coordenador(a) Gileade Pereira Freitas em 22/04/2025., Descrição: Os implantes dentários são utilizados a décadas para reabilitação oral de pacientes, restabelecendo a mastigação e estética. Dentre os diferentes materiais para confecção desses implantes, está o titânio (Ti), que pode ser utilizado de maneira comercialmente puro (Ticp) ou com diversas variações de ligas. A maioria das marcas comercialmente disponíveis utilizam o Ticp grau 4 no processo de fabricação de seus implantes dentários, com a justificativa que o grau 4 fornece boa resistência mecânica e biocompatibilidade. No entanto, algumas marcas também utilizam o Ticp grau 2 no processo de fabricação, com a justificativa que o grau 2 apresenta resistência mecânica semelhante ao aço inoxidável e boa ductibilidade. Adicionalmente, algumas empresas têm focado na fabricação de implantes dentários produzidos a partir de uma liga de titânio-alumínio-vanádio (TiAl6V4), conhecido como Ti grau 5, com a justificativa que o grau 5 possui propriedades mecânicas superiores, resistência a corrosão e ótima biocompatibilidade. O processo da osseointegração é um fenômeno de suma importância para que os implantes dentários desempenhem suas funções durante ao longo da vida do paciente, processo esse que envolve reabsorção, formação e mineralização óssea. Quando ocorre algum fator que altere o balanceamento do catabolismo e anabolismo, ocorre uma perda da qualidade do tecido ósseo resultando no desenvolvimento de uma condição patológica, comprometendo a taxa de sucesso dos implantes osseointegra#769;veis. Estudos recentes, tanto in vivo utilizando modelos animais e quanto estudos envolvendo pacientes, têm mostrado o efeito negativo da doença diabetes mellitus tipo 2 (DM2) no metabolismo ósseo. No entanto, poucos estudos in vitro têm sidos realizados com o objetivo de se investigar o potencial osteogênico de células derivadas de indivíduos diabéticos induzido por diferentes composições e pureza do Ti. Neste contexto, a avaliação da influência da superfície microtexturizada de titânio grau 2, 4 e 5 sobre o potencial osteogênico de células-tronco mesenquimais derivadas de modelo de DM tipo 2 (CTMs-DM2) se faz necessária. Para isso, CTMs-DM2 foram cultivadas sobre discos com superfícies microtexturizadas de Ticp grau 2, Ticp grau 4 e Ti grau 5, para avaliar: (1) proliferação celular, (2) atividade de fosfatase alcalina in situ e (3) mineralização da matriz extracelular.. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Doutorado: (1) . , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Integrante / Gileade Pereira Freitas - Coordenador / FABIANO DE AZEVEDO RIBEIRO - Integrante.

• 2021 - 2024

  Participação de agrin na diferenciação osteoblástica e na regeneração do tecido ósseo induzida por células-tronco mesenquimais em defeitos criados em calvárias de camundongos, Projeto certificado pelo(a) coordenador(a) Márcio Mateus Beloti em 20/10/2021., Descrição: A terapia celular é uma das estratégias da medicina regenerativa que se mostra promissora para o tratamento de defeitos ósseos extensos utilizando, principalmente, células-tronco mesenquimais (MSCs, abreviação do Inglês, mesenchymal stem cells) e o estudo de moléculas que atuam nessas células para favorecer a regeneração óssea é relevante nesse contexto. Dentre essas moléculas, a proteína de matriz extracelular agrin, envolvida em vários processos biológicos, foi detectada em condrócitos e demonstrada sua participação no desenvolvimento do sistema esquelético. No entanto, até o momento, há pouca informação na literatura acerca dos efeitos de agrin na diferenciação osteoblástica de MSCs e na formação óssea por elas induzida, assim como das vias de sinalização celular envolvidas nesses efeitos. Portanto, os objetivos desse estudo são investigar: (1) in vitro o efeito da sobre-expressão e do silenciamento de agrin por CRISPR/Cas9 sobre a diferenciação osteoblástica de MSCs, (2) in vitro a participação das vias de sinalização de BMPs, Wnt, Notch e Hippo-Yap/Taz no efeito de agrin sobre a diferenciação osteoblástica de MSCs e (3) in vivo o efeito de MSCs com sobre-expressão e silenciamento de agrin por CRISPR/Cas9 sobre a regeneração do tecido ósseo em defeitos criados em calvárias de camundongos. Os resultados desse estudo poderão gerar dados importantes acerca da função de agrin no tecido ósseo e, possivelmente, para o desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas em situações clínicas que envolvem a regeneração óssea.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Integrante / Márcio Mateus Beloti - Coordenador / Maria Paula Oliveira Gomes - Integrante.

• 2021 - 2024

  Avaliação mecânica da resistência à flexão de 3 tipos de fixação utilizadas na técnica de osteotomia sagital bilateral minimamente invasiva dos ramos mandibulares, Descrição: Dentre as possíveis técnicas de correção cirúrgica das discrepâncias mandibulares, temos a técnica da osteomia sagital do ramo mandibular (OSRM). Após as primeiras descrições de osteotomias mandibulares realizadas por Hullihen em 1849 e Blair em 1907, houve diversos aprimoramentos dessa técnica. Todavia, fatores como alterações sensoriais e fraturas indevidas, podem levar a recusa pelo tratamento cirúrgico por diversos pacientes. Portanto, minimizar estas condições é um grande desafio a ser superado pelos cirurgiões. Na tentativa de superar esse desafio, concomitante à expertise de décadas realizando correções mandibulares através da OSRM, conhecimentos anatômicos apurados e desenvolvimento de materiais de osteossíntese que conferiam maior estabilidade funcional, técnicas menos invasivas e osteotomias mais curtas passaram a ser utilizadas. Após a osteotomia ser executada, as fixações das partes ósseas podem ser feitas com alguns dispositivos de fixação como por exemplo, miniplacas e parafusos. O objetivo deste estudo é avaliar a resistência mecânica à flexão de 3 tipos de fixação utilizadas na técnica de OSRM minimamente invasiva. Tal estudo se justifica: 1) Baixo número de estudos publicados na literatura comparando as diferentes placas do sistema 2.0 utilizadas na técnica de fixação híbrida para estabilização da OSRM minimamente invasiva; 2) Uso frequente da técnica da fixação híbrida em cirurgias ortognáticas. Para isso, serão utilizadas replicas de mandíbulas humanas dentadas confeccionadas de poliuretano rígido. Após a simulação de um avanço mandíbulas de 8 mm, com giro anti-horário da mandíbula de 6 graus em relação ao plano oclusal, as OSRM minimamente invasiva serão fixadas com placas e parafusos do sistema 2.0 mm, em ambos os lados: grupo I (duas placas com 4 parafusos monocorticais), grupo II (sistema híbrido uma placa 4 parafusos monocortical e 1 parafuso bicortical) e grupo III (somente 3 parafusos bicorticais). As mandíbulas serão submetidas a carga na região do primeiro molar inferior direito. Esse estudo poderá contribuir na decisão da melhor maneira de fixação de dos cotos ósseos quando utilizada a técnica de OSRM minimamente invasiva.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Coordenador / Gileade Pereira Freitas - Integrante / Alexandre Borba - Integrante / DANIEL SANTIAGO VALE - Integrante / Nilton de Araújo Filho - Integrante.

• 2021 - 2024

  Avaliação do nível de satisfação com a harmonia facial de indivíduos com fissura labiopalatal previamente tradada, Descrição: As fissuras labiopalatinas e labial são frequentes anomalias congênitas orofaciais. Essas malformações acometem o terço médio da face, sendo ocasionadas pela não fusão dos ossos maxilares, durante a sexta e a decima semana de vida intrauterina. O reparo primário dessa anomalia é a cirúrgia, sendo o tratamento realizado durante o primeiro ano de vida. Alguns elementos são difíceis de alcançar ou restaurar nas cirurgias de reparo da fenda labial como a obtenção de uma boa cicatriz cutânea, manutenção do arco do cupido, assimetria labial, e obtenção da altura labial adequada sem sacrificar o comprimento do lábio horizontalmente. As cicatrizes presentes após as cirurgias acabam se tornando umas das complicações pós-operatórias mais comuns, a hipertrofia da cicatriz, que afeta negativamente a estética facial, a função e a saúde mental do paciente. Embora os esforços para melhorar a estética dos pacientes com fissura labial no mundo em desenvolvimento tenham crescido tremendamente, há uma escassez de dados sobre os resultados estéticos após os reparos de fenda labial neste cenário. Será feito um estudo no serviço de fissuras do Hospital Geral de Cuiabá, que irá analisar 300 pacientes, aplicando um questionário, para avaliar o impacto das cicatrizes e sequelas das cirurgias de fissuras na harmonia facial. Os pacientes selecionados para esse estudo devem ter finalizados as cirurgias reabilitadoras primárias (labioplastia, palatoplastia e alveoloplastia com enxerto ósseo). A literatura sobre esse assunto ainda é escassa e essa pesquisa ajudará contribuir com o tema.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) . , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Coordenador / Gileade Pereira Freitas - Integrante / Monique Thais Silva da Costa - Integrante / Alexandre Borba - Integrante.

• 2021 - 2024

  Avaliação Biomecânica de Sistemas de Fixação Interna Rígida em Osteotomias Sagitais Obliquas Anteriores Bilateral de Ramo Mandibular, Projeto certificado pelo(a) coordenador(a) Gileade Pereira Freitas em 29/03/2022., Descrição: A osteotomia sagital bilateral dos ramos mandibulares se consagrou ao longo dos anos por possibilitar a correção de diferentes deformidades dento-esqueléticas da mandíbula, e sobretudo por sua versatilidade e previsibilidade. Após as primeiras descrições de osteotomias mandibulares realizadas por Hullihen em 1849 e Blair em 1907, houve diversos aprimoramentos da técnica. Todavia, fatores como alterações sensoriais e fraturas indevidas, podem levar a recusa pelo tratamento cirúrgico por diversos pacientes. Portanto, minimizar estas condições é um grande desafio a ser superado pelos cirurgiões. Na tentativa de superar esse desafio, concomitante à expertise de décadas realizando correções mandibulares através da osteotomia sagital, conhecimentos anatômicos apurados e desenvolvimento de materiais de osteossíntese que conferiam maior estabilidade funcional, técnicas menos invasivas e osteotomias mais curtas passaram a ser utilizadas. Embora diversos trabalhos tenham sido descritos, o uso da melhor e mais confiável maneira de fixar os cotos osteotomizados ainda gera muita discussão no meio científico, e dentro do conceito de realizar procedimentos cada vez menos invasivos, poder utilizar uma fixação que seja o mais sucinta possível e ao mesmo tempo confiável, poderia proporcionar procedimentos mais rápidos, com menor morbidade, e custos reduzidos. Considerando o acima exposto, o objetivo deste estudo será avaliar biomecânicamente sistemas de fixação interna rígida em osteotomias sagitais bilateral de ramo mandibular minimamente invasiva. Para isso, serão utilizadas replicas de mandíbulas humanas dentadas confeccionadas de poliuretano rígido. Após a simulação de um avanço mandíbulas de 8 mm, com giro anti-horário da mandíbula de 6 graus em relação ao plano oclusal, as osteotomias sagitais bilateral de ramo mandibular minimamente invasiva serão fixadas com placas e parafusos do sistema 2.0 mm, em ambos os lados: grupo I (duas placas com 4 parafusos monocorticais), grupo II (sistema híbrido uma placa 4 parafusos monocortical e 1 parafuso bicortical) e grupo III (somente 3 parafusos bicorticais). As mandíbulas serão submetidas a carga na região dos incisivos centrais. Esse estudo poderá contribuir na decisão da melhor maneira de fixação de dos cotos ósseos quando utilizada a técnica de osteotomia sagital bilateral de ramo mandibular minimamente invasiva.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Integrante / Gileade Pereira Freitas - Coordenador / Alexandre Borba - Integrante / DANIEL SANTIAGO VALE - Integrante / Nilton de Araújo Filho - Integrante.

• 2021 - 2023

  Análise da expressão de agrin durante a diferenciação osteoblástica e adipocítica de células-tronco mesenquimais derivadas de tecido adiposo, Projeto certificado pelo(a) coordenador(a) Márcio Mateus Beloti em 20/10/2021., Descrição: A proteína da matriz extracelular agrin atua na regulação de sinapses neuromusculares, sinalização em sinapse imunológica e regeneração do tecido cardíaco. Além disso, tem papel relevante no desenvolvimento esquelético, mas é ainda pouca estudada na área da biologia óssea. Com vistas à utilização de agrin como alvo terapêutico para a formação e reparo do tecido ósseo, nosso grupo de pesquisa identificou sua expressão em osteoblastos e a correlação positiva entre seu nível de expressão e o estágio de diferenciação osteoblástica. Como não há na literatura dados sobre a expressão de agrin em células-tronco mesenquimais (CTMs) derivadas do tecido adiposo e considerando que o equilíbrio entre diferenciação osteoblástica e adipocítica de CTMs é relevante para a homeostase do tecido ósseo, o objetivo desse projeto é avaliar a expressão gênica e proteica de agrin durante os processos de diferenciação osteoblástica e adipocítica de CTMs derivadas de tecido adiposo de camundongos. Para isso, CTMs da região inguinal de camundongos serão cultivadas em condições osteogênicas e adipogênicas. A expressão gênica de agrin e seus receptores, e de marcadores osteoblásticos e adipocíticos será avaliada por PCR em tempo real aos 3, 5, 7, 10 e 14 dias e a expressão proteica de agrin será detectada por imunolocalização aos 3, 5 e 7 dias. Adicionalmente, para a diferenciação osteoblástica, será avaliada a atividade in situ de fosfatase alcalina por Fast red, aos 10 e 14 dias, e formação de matriz extracelular mineralizada, por coloração com vermelho de alizarina, aos 21 dias. Para a diferenciação adipocítica, será avaliada a formação de acúmulo lipídico por marcação com óleo vermelho O, aos 21 dias. Os dados numéricos serão submetidos ao teste estatístico apropriado. Os resultados desse estudo poderão contribuir para o estabelecimento de estratégias para futuras investigações acerca da regulação da expressão de agrin com finalidade terapêutica em procedimentos que visem a regeneração do tecido ósseo.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (1) / Doutorado: (1) . , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Integrante / Márcio Mateus Beloti - Coordenador / Letícia Adolpho - Integrante / Luana da Silva Pereira - Integrante.

• 2021 - 2023

  AVALIAÇÃO DO POTENCIAL OSTEOGÊNICO INDUZIDO POR SUPERFÍCIE DE TITÂNIO MICROTEXTURIZADA PRODUZIDA POR SINTERIZAÇÃO DIRETA DE METAL POR LASER, Projeto certificado pelo(a) coordenador(a) Gileade Pereira Freitas em 29/03/2022., Descrição: Diversas tecnologias têm sido usadas na produção de implantes dentários, sendo o processo de usinagem o mais comumente utilizado. No entanto, a pesquisa na indústria biomédica vem atuando continuamente na busca da melhoria no processo de fabricação desses implantes, resultados em novas macrogeometrias e texturizações de superfícies. Nesse contexto, o processo de fabricação de implantes dentários através de manufatura aditiva (AM, sigla do inglês, additive manufacturing), uma técnica já bem estabelecida na indústria aeroespacial, pode ser empregada na odontologia de maneira inovadora. Neste caso, a confecção de implantes dentários pode ocorrer por uma via específica de AM, denominada de sinterização direta de metal por laser (DMLS, sigla do inglês, direct metal laser sintering). Até o presente momento, os dados da literatura são promissores e apontam a tecnologia por DMLS para fabricação de implantes como um alvo relevante na área de implantodontia. No entanto, existem poucos estudos avaliando o potencial osteogênico induzido por superfície de titânio microtexturizada produzida por DMLS. Neste contexto, nós elaboramos a hipótese de que superfície de titânio microtexturizada produzida por DMLS pode exercer função importante na diferenciação osteoblástica. Para testar essa hipótese, células-tronco mesenquimais derivadas de medula óssea de ratos serão cultivadas sobre discos de Ti com duas superfícies diferentes, (1) superfície lisa (controle) e (2) superfície microtexturizada produzida por DMLS para avaliar: (1) atividade proliferativa, (2) atividade de fosfatase alcalina e (3) mineralização da matriz extracelular. Os resultados desse estudo podem confirmar o potencial osteogênico induzido por superfície de titânio microtexturizada produzida por sinterização direta de metal por laser e, consequentemente, contribuir para o desenvolvimento de topografias de superfície que favoreçam os eventos relacionados ao processo de osseointegração.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) . , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Integrante / Gileade Pereira Freitas - Coordenador / Alexandre Borba - Integrante / Thiago Rios - Integrante.

• 2020 - 2024

  Efeito do meio condicionado por células-tronco mesenquimais com superexpressão de proteína óssea morfogenética 9 na diferenciação osteoblástica e na regeneração óssea, Descrição: A terapia celular utilizando células-tronco mesenquimais (CTMs) derivadas de medula óssea tem sido alvo de investigações científicas nos campos da Odontologia e Medicina por ser uma alternativa promissora para tratamento de defeitos ósseos. As proteínas ósseas morfogenéticas (BMPs) são citocinas pertencentes à família do fator de crescimento transformante beta (TGF-beta) e estão envolvidas em diversos processos biológicos, incluindo a diferenciação osteoblástica e a osteogênese. Dentre as diversas BMPs identificadas, a BMP-9 é considerada uma das mais osteogênicas. Dados preliminares do nosso grupo de pesquisa mostram que CTMs de medula óssea de camundongos, geneticamente editadas para superexpressar BMP-9 (CTMsBMP-9), injetadas em defeitos de calvária de ratos aumentam a formação óssea comparadas a CTMs não modificadas. Esses resultados podem ser explicados, ao menos em parte, pelo fato de que as CTMsBMP-9 secretam moléculas bioativas que estimulam as células presentes na região de interesse e que são secretadas para o meio de cultura quando essas células são cultivadas. Nesse contexto, os objetivos do presente projeto são: (1) caracterizar os meios condicionado por CTMsBMP-9 quanto à presença de citocinas, fatores de crescimento e proteases, (2) avaliar o efeito do meio condicionado por CTMsBMP-9 sobre a migração e proliferação celulares, e a diferenciação osteoblástica de CTMs derivadas de medula óssea de camundongos e (3) avaliar o efeito do meio condicionado por CTMsBMP-9 sobre a regeneração óssea em defeitos criados em calvária de camundongos. Os dados quantitativos serão submetidos ao teste de aderência à curva normal para determinar o teste estatístico adequado a ser aplicado e o nível de significância será de 5. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Integrante / Gileade Pereira Freitas - Integrante / BELOTI, MM - Coordenador / Robson Diego Calixto - Integrante.

• 2019 - 2022

  Estudo do potencial angiogênico e para regenerar o tecido ósseo de BM-MSCs e AT-MSCs associadas a VEGF-A e BMP-9, Descrição: O osso é um tecido com grande capacidade de regeneração, mas em algumas situações a extensão da injúria impede o reparo do tecido. Nesse cenário, a terapia celular utilizando células-tronco mesenquimais (do Inglês, mesenchymal stem cells - MSCs) tem atraído a atenção de diversos grupos de pesquisa por ser uma alternativa promissora em relação aos tratamentos existentes. No entanto, diversos aspectos moleculares, celulares e teciduais, ainda não abordados na literatura, necessitam ser investigados para tornar essa terapia um tratamento efetivo para a regeneração de defeitos ósseos em pacientes saudáveis ou acometidos por doenças sistêmicas que afetam o processo de reparo ósseo, como a osteoporose, a diabetes mellitus e a hipertensão. Nesse contexto, o presente projeto é composto por três subprojetos, cujos objetivos são: (1) investigar o potencial de MSCs derivadas de medula óssea (do Inglês, bone marrow - BM-MSCs) e de tecido adiposo (do Inglês, adipose tissue - AT-MSCs), tratadas com fator de crescimento do endotélio vascular A (do Inglês, vascular endothelial growth fator A - VEGF-A) e/ou proteína óssea morfogenética 9 (do Inglês, bone morphogenetic protein 9 - BMP-9) para regenerar o tecido ósseo; (2) investigar o potencial dessas MSCs modificadas geneticamente para sobre-expressar VEGF-A e/ou BMP-9 para regenerar o tecido ósseo e (3) avaliar a influência de BM-MSCs obtidas de ratos saudáveis sobre a diferenciação osteoblástica de BM-MSCs obtidas de ratos osteoporóticos, diabéticos e hipertensos. Para o desenvolvimento dos subprojetos 1 e 2, BM-MSCs e AT-MSCs serão tratadas com VEGF-A e/ou BMP-9 ou modificadas geneticamente utilizando agrupados de curtas repetições palindrômicas regularmente interespaçadas (CRISPR-Cas9) para sobre-expressar VEGF-A e/ou BMP-9. Essas células serão caracterizadas in vitro quanto ao potencial angiogênico e osteogênico e à expressão gênica e proteica em larga escala. Para a regeneração do tecido ósseo, as BM-MSCs e AT-MSCs associadas ao VEGF-A e/ou BMP-9 ou modificadas para sobre-expressar VEGF-A e/ou BMP-9 serão injetadas diretamente em defeitos criados em calvárias de ratos. Inicialmente, o tempo de permanência das células nos defeitos ósseos será avaliado por luminescência, utilizando a injeção de células transfectadas com luciferase. Por até 4 semanas após a injeção de células, a progressão da formação de vasos sanguíneos e de tecido ósseo será avaliada por microtomografia computadorizada (micro-CT) in vivo. Ao final de 4 semanas, os animais serão eutanasiados e as amostras serão avaliadas por análise histológica. No subprojeto 3, será avaliada a influência de BM-MSCs obtidas de ratos saudáveis sobre a diferenciação osteoblástica de BM-MSCs obtidas de ratos osteoporóticos, diabéticos e hipertensos utilizando um modelo de co-cultura indireta. Trata-se de estudo in vitro, cujos resultados, poderão gerar desdobramentos durante o desenvolvimento do presente projeto, com vistas à aplicação das terapias abordadas nos subprojetos 1 e 2 para a investigação da regeneração óssea nos modelos de patologias abordados no subprojeto 3.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Integrante / Adalberto Luiz Rosa - Coordenador / Márcio Mateus Beloti - Integrante.

• 2019 - 2022

  Efeito de adipócitos sobre a diferenciação osteoblástica de células-tronco mesenquimais crescidas sobre titânio com nanotopografia, Projeto certificado pelo(a) coordenador(a) Márcio Mateus Beloti em 17/10/2021., Descrição: O titânio (Ti) é amplamente utilizado em cirurgias buco-maxilo-faciais e ortopédicas e uma parcela considerável dos pacientes que necessitam de implantes tem idade avançada e/ou podem apresentar doenças metabólicas, como por exemplo a osteoporose, que comprometem a capacidade de reparo e regeneração do tecido ósseo. Frequentemente, essas limitações de reparo são acompanhadas de aumento da quantidade de tecido adiposo na medula óssea. A relação inversa entre as massas de tecido ósseo e adiposo pode estar relacionada com a maior diferenciação osteoblástica em detrimento da diferenciação adipocítica de células-tronco mesenquimais (MSCs, do Inglês: mesenchymal stem cells) presentes na medula óssea e vice-versa. Considerando a coexistência de osteoblastos e adipócitos no microambiente da medula óssea/tecido ósseo, é possível que o efeito negativo de adipócitos sobre osteoblastos tenha impacto sobre a osseointegração de implantes de Ti. O tratamento da superfície de Ti com ácido sulfúrico e peróxido de hidrogênio gera uma nanotopografia com alto potencial osteogênico, o qual se deve à sua capacidade de modular algumas vias de sinalização celular. Além disso, osteoblastos crescidos sobre Ti com nanotopografia são mais resistentes ao efeito inibitório de osteoclastos do que aqueles crescidos sobre Ti usinado (controle). Até o momento, o efeito de adipócitos sobre a interação entre osteoblastos e a nanotopografia ainda não foi investigado e também não há na literatura estudos que abordem este tema. Neste contexto, elaboramos a hipótese de que o Ti com nanotopografia é capaz de modular a interação entre adipócitos e osteoblastos, minimizando os efeitos negativos de adipócitos sobre osteoblastos. Para testar nossa hipótese, estabelecemos três objetivos: (1) avaliar o efeito de adipócitos, diferenciados a partir de MSCs de tecido adiposo, sobre osteoblastos, diferenciados a partir de MSCs de medula óssea, crescidos na superfície de Ti com nanotopografia, comparada à superfície de Ti controle, em modelo de co-cultura indireta, (2) avaliar o efeito do meio condicionado por adipócitos, diferenciados a partir de MSCs de tecido adiposo, sobre osteoblastos, diferenciados a partir de MSCs de medula óssea, crescidos na superfície de Ti com nanotopografia, comparada à superfície de Ti controle e (3) avaliar o efeito de exossomos derivados de adipócitos, diferenciados a partir de MSCs de tecido adiposo, sobre osteoblastos, diferenciados a partir de MSCs de medula óssea, crescidos na superfície de Ti com nanotopografia, comparada à superfície de Ti controle. Os resultados gerados por este estudo poderão contribuir para o entendimento de mecanismos celulares que regulam a osseointegração de implantes de Ti com alto potencial osteogênico no tecido ósseo afetado por doenças metabólicas que comprometem sua capacidade de reparo. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Integrante / Adalberto Luiz Rosa - Integrante / Márcio Mateus Beloti - Coordenador / Joao Lisboa de Sousa Filho - Integrante.

• 2019 - 2021

  Efeito de células-tronco mesenquimais do ligamento periodontal com alto e baixo potencial osteogênico no reparo ósseo, Projeto certificado pelo(a) coordenador(a) Márcio Mateus Beloti em 17/10/2021., Descrição: A terapia com células-tronco é uma das estratégias utilizadas em medicina regenerativa e que pode ser aplicada na regeneração óssea. Células-tronco mesenquimais (CTMs) podem ser isoladas de diversos tecidos do organismo, como medula óssea, tecido adiposo, cordão umbilical, músculo e ligamento periodontal. Nosso grupo de pesquisa tem avaliado estratégias para promover a regeneração óssea em modelo de defeitos criados em calvária de ratos e em estudo recente, demonstramos que a injeção local de células se mostrou mais efetiva comparado ao uso de biomaterial isolado ou em combinação com a terapia celular. Apesar da eficácia das CTMs da medula óssea, sua obtenção se dá por um procedimento invasivo, levando à busca por novas fontes de células. Considerando que a coleta do ligamento periodontal de dentes extraídos é um procedimento simples, este tecido pode ser uma fonte de CTMs, por se tratar de um tecido rico em células, dentre as quais, estão presentes as CTMs. Estudos in vitro e in vivo demonstraram que essas células têm capacidade de diferenciação osteoblástica e de formar matriz óssea. Além disso, foi observado que CTMs de ligamento periodontal podem apresentar diferentes potenciais osteogênicos, sendo que as com alto potencial exibem expressão precoce de Runx2. Nesse contexto, o objetivo deste estudo é avaliar a capacidade de CTMs do ligamento periodontal com alto e baixo potencial osteogênico, além de ambas as populações de células misturadas, para reparar o tecido ósseo, após injeção local em defeitos criados em calvária de ratos. As células serão obtidas do ligamento periodontal de terceiros molares inclusos extraídos, caracterizadas in vitro quanto à capacidade de proliferação e diferenciação osteoblástica e classificadas como CTMs com alto ou baixo potencial osteogênico. Em seguida, defeitos unilaterais, com 5 mm de diâmetro, serão criados em calvária de ratos da linhagem Wistar e duas semanas após a criação dos defeitos, células com alto e baixo potencial osteogênico e uma mistura dessas células (1:1) serão injetadas diretamente no defeito ósseo (5x106 células/defeito). Quatro semanas após a injeção, serão avaliadas: a formação óssea por análise histológica e microtomografia e a expressão gênica de Runx2, fosfatase alcalina, sialoproteína óssea, osteocalcina, osteoprotegerina, Rankl e Rank, por PCR em tempo real. Os dados quantitativos serão submetidos ao teste de aderência à curva normal para determinar o teste estatístico adequado e nível de significância será de 5%.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Integrante / Adalberto Luiz Rosa - Integrante / Márcio Mateus Beloti - Coordenador / Gileade Pereira Freitas - Integrante / Letícia Adolpho - Integrante., Financiador(es): Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - Bolsa.

• 2019 - 2020

  Influência do extrato de casca de jabuticaba patenteado (PJE) nos processos de diferenciação osteoblástica e adipocítica de células-tronco mesenquimais derivadas de medula óssea e de tecido adiposo, Projeto certificado pelo(a) coordenador(a) Márcio Mateus Beloti em 17/10/2021., Descrição: Uma variedade de produtos naturais tem sido estudada com fins terapêuticos, como a prevenção de danos metabólicos. As frutas podem ser uma fonte importante de vários compostos bioativos concentrados principalmente em sua casca. Dentre elas, a casca de jabuticaba tem sido indicada como um produto promissor no tratamento da obesidade. Uma vez que o aumento da adipogênese na medula óssea está correlacionado com a diminuição da densidade mineral óssea, influenciada diretamente pela diferenciação osteoblástica e adipocítica de células-tronco mesenquimais (do Inglês, mesenchymal stem cells - MSCs), o extrato de casca de jabuticaba patenteado (do Inglês, patented jaboticaba peel extract - PJE) poderia atuar nessas células como um fator de crescimento prevenindo o efeito negativo que a adiposidade medular gera sobre o tecido ósseo, inclusive no processo de reparo de fraturas. Nesse contexto, o objetivo do presente projeto é avaliar o efeito do PJE na diferenciação osteoblástica e adipocítica de MSCs derivadas da medula óssea (do Inglês, bone marrow-derived mesenchymal stem cells - BM-MSCs) e do tecido adiposo (do Inglês, adipose tissue-derived MSCs - AT-MSCs). Para isso, as células serão cultivadas em meio de crescimento na presença de diferentes concentrações de PJE (0,25 µg/mL, 2,5 µg/mL, 25 µg/mL e 250 µg/mL) e veículo (Controle-água destilada), e será selecionada a maior concentração de PJE que não afete a proliferação das células. Em seguida, BM-MSCs e AT-MSCs serão cultivadas em meio osteogênico ou meio adipogênico, na presença ou ausência de PJE na concentração previamente determinada e serão avaliados (1) os parâmetros osteoblásticos: atividade de fosfatase alcalina (ALP) in situ, formação de matriz extracelular mineralizada e expressão gênica do fator de transcrição relacionado ao runt 2 (Runx2), Alp, sialoproteína óssea (Bsp) e osteocalcina (Oc) por PCR em tempo real; e (2) os parâmetros adipocíticos: formação de acúmulo lipídico e expressão gênica do receptor ativado por proliferadores de peroxissoma gama (Pparγ), proteína adipocítica 2 (aP2) e resistina (Retn). Os dados serão submetidos ao teste de aderência à curva normal para determinar o teste estatístico adequado. Considerando a inter-relação entre osso e gordura, e que tais interações podem prejudicar o metabolismo ósseo, os resultados desse estudo podem contribuir para o desenvolvimento de novas estratégias envolvendo MSCs e PJE que favoreçam os eventos relacionados a situações clínicas importantes como o processo de reparo ósseo em fraturas. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Integrante / Adalberto Luiz Rosa - Integrante / Márcio Mateus Beloti - Coordenador / Gileade Pereira Freitas - Integrante / Alann Thaffarell Portilho de Souza - Integrante / Sofia Garibaldi Otavio - Integrante., Financiador(es): Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - Bolsa.

• 2018 - 2022

  Terapia Celular: Potencial de Células-Tronco Mesenquimais, VEGF-A e BMP-9 para Regenerar Tecido Ósseo, Descrição: O osso é um tecido com grande capacidade de regeneração, mas em algumas situações a extensão da injúria impede o reparo do tecido. Nesse cenário, a terapia celular utilizando células-tronco mesenquimais (do Inglês, mesenchymal stem cells - MSCs) tem atraído a atenção de diversos grupos de pesquisa por ser uma alternativa promissora em relação aos tratamentos existentes. No entanto, diversos aspectos moleculares, celulares e teciduais, ainda não abordados na literatura, necessitam ser investigados para tornar essa terapia um tratamento efetivo para a regeneração de defeitos ósseos em pacientes saudáveis ou acometidos por doenças sistêmicas que afetam o processo de reparo ósseo, como a osteoporose, a diabetes mellitus e a hipertensão. Nesse contexto, o presente projeto é composto por três subprojetos, cujos objetivos são: (1) investigar o potencial de MSCs derivadas de medula óssea (do Inglês, bone marrow - BM-MSCs) e de tecido adiposo (do Inglês, adipose tissue - AT-MSCs), tratadas com fator de crescimento do endotélio vascular A (do Inglês, vascular endothelial growth fator A - VEGF-A) e/ou proteína óssea morfogenética 9 (do Inglês, bone morphogenetic protein 9 - BMP-9) para regenerar o tecido ósseo; (2) investigar o potencial dessas MSCs modificadas geneticamente para sobre-expressar VEGF-A e/ou BMP-9 para regenerar o tecido ósseo e (3) avaliar a influência de BM-MSCs obtidas de ratos saudáveis sobre o potencial osteogênico de BM-MSCs obtidas de ratos osteoporóticos, diabéticos e hipertensos. Para o desenvolvimento dos subprojetos 1 e 2, BM-MSCs e AT-MSCs serão tratadas com VEGF-A e/ou BMP-9 ou modificadas geneticamente utilizando agrupados de curtas repetições palindrômicas regularmente interespaçadas (CRISPR-Cas9) para sobre-expressar VEGF-A e/ou BMP-9. Essas células serão caracterizadas in vitro quanto ao potencial angiogênico e osteogênico e à expressão gênica e proteica em larga escala. Para a regeneração do tecido ósseo, as BM-MSCs e AT-MSCs associadas ao VEGF-A e/ou BMP-9 ou modificadas para sobre-expressar VEGF-A e/ou BMP-9 serão injetadas diretamente em defeitos criados em calvárias de ratos. Inicialmente, o tempo de permanência das células nos defeitos ósseos será avaliado por luminescência, utilizando a injeção de células transfectadas com luciferase. Por até 4 semanas após a injeção de células, a progressão da formação de vasos sanguíneos e de tecido ósseo será avaliada por microtomografia computadorizada (micro-CT) in vivo. Ao final de 4 semanas, os animais serão eutanasiados e as amostras serão avaliadas por análise histológica. No subprojeto 3, será avaliada a influência de BM-MSCs obtidas de ratos saudáveis sobre a diferenciação osteoblástica de BM-MSCs obtidas de ratos osteoporóticos, diabéticos e hipertensos utilizando um modelo de co-cultura indireta. Trata-se de estudo in vitro, cujos resultados, poderão gerar desdobramentos durante o desenvolvimento do presente projeto, com vistas à aplicação das terapias abordadas nos subprojetos 1 e 2 para a investigação da regeneração óssea nos modelos de patologias abordados no subprojeto 3. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) / Doutorado: (1) . , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Integrante / Fabíola Singaretti de Oliveira - Integrante / Adalberto Luiz Rosa - Coordenador / Gileade Pereira Freitas - Integrante / Adriana L.G. de Almeida - Integrante / DE OLIVEIRA, PT - Integrante / BELOTI, MM - Integrante / Alann Taffarell Porfirio de Souza - Integrante / Janet Stein - Integrante / Jane B Lian - Integrante / Gabriela Guaraldo Campos Tótoli - Integrante / Gary Stein - Integrante / Geraldo Aleixo da Silva Passos - Integrante / José Cesar Rosa - Integrante / Karina Fittipaldi Bombonato Prado - Integrante.

• 2018 - 2022

  Terapia celular: avaliação do efeito de células-tronco mesenquimais para regenerar tecido ósseo de ratos com osteoporose, diabetes mellitus ou hipertensão arterial, Descrição: O osso é um tecido que ao ser lesionado apresenta grande capacidade de regeneração, que pode ser comprometida por algumas doenças sistêmicas como a osteoporose, diabetes mellitus e hipertensão arterial. Uma alternativa promissora para tratar os danos causados ao reparo do tecido ósseo devido à essas doenças pode ser o uso da terapia celular com células-tronco mesenquimais (do Inglês, mesenchymal stem cells - MSCs). No entanto, diversos aspectos, necessitam ser investigados para avaliar a eficácia dessa terapia para a regeneração de defeitos ósseos por essas doenças. Nesse contexto, os objetivos do presente projeto são: 1) avaliar in vitro a influência de MSCs de ratos saudáveis (SD-MSCs) sobre a diferenciação osteoblástica de MSCs de ratos osteoporóticos (ORX-MSCs), diabéticos (DM-MSCs) ou hipertensos (HA-MSCs), através de co-cultura indireta, 2) avaliar in vitro a influência de ORX-MSCs, DM-MSCs ou HA-MSCs sobre a diferenciação osteoblástica de SD-MSCs, através de co-cultura indireta, 3) investigar a participação das vias de sinalização das proteínas ósseas morfogenéticas (BMPs), Wnt e Integrinas (ITGs) nas interações entre SD-MSCs e ORX-MSCs, DM-MSCs ou HA-MSCs, crescidas em condições osteogênicas, em modelo de co-cultura indireta, por meio do silenciamento (shRNA) de genes destas vias, previamente selecionados e 4) avaliar in vivo o efeito de injeções locais de MSCs de ratos saudáveis para regenerar o tecido ósseo de ratos com osteoporose, diabetes mellitus ou hipertensão arterial. As MSCs utilizadas serão isoladas a partir da medula óssea e serão avaliadas: proliferação celular, atividade de fosfatase alcalina (ALP), formação de matriz extracelular mineralizada e expressão gênica de b-catenina e dos marcadores osteoblásticos fator de transcrição relacionado ao runt 2 (RUNX2), osterix, ALP, sialoproteína óssea e osteocalcina. Além disso, serão criados defeitos nas calvárias dos ratos e após 2 semanas serão injetadas MSCs ou veículo (PBS-Controle). Decorridas 4 semanas da injeção, a formação de tecido ósseo será avaliada por microtomografia computadorizada e análise histológica. Os dados serão submetidos ao teste de aderência à curva normal para determinar a análise estatística adequada. Os resultados desse estudo poderão contribuir para determinar as características de células candidatas ao uso em terapia celular nos pacientes com osteoporose, diabetes mellitus ou hipertensão arterial. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Integrante / Adalberto Luiz Rosa - Coordenador / Márcio Mateus Beloti - Integrante / Gileade Pereira Freitas - Integrante / Alann Taffarell Porfirio de Souza - Integrante., Financiador(es): Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - Bolsa.

• 2018 - 2022

  Participação das vias de sinalização Hedgehog e Notch na diferenciação osteoblástica induzida por superfície de titânio com nanotopografia, Projeto certificado pelo(a) coordenador(a) Márcio Mateus Beloti em 17/10/2021., Descrição: A osteogênese é um evento biológico caracterizado por etapas altamente dependentes de vias de sinalização celular, incluindo as vias Hedgehog e Notch que atuam na diferenciação osteoblástica. Dessa forma, a modulação dessas vias de sinalização através do uso de drogas agonistas e antagonistas pode gerar dados relevantes para terapias relacionadas ao tecido ósseo na odontologia, como o uso de implantes de titânio (Ti) osseointegráveis. Sabe-se que superfícies de Ti com nanotopografia favorecem a diferenciação osteoblástica e a mineralização da matriz extracelular; no entanto, os mecanismos celulares envolvidos nesses efeitos não são completamente entendidos. Nesse contexto, nós elaboramos a hipótese de que as vias Hedgehog e Notch estão envolvidas com o potencial osteogênico de superfícies de Ti nanoestruturadas. Assim, o objetivo deste projeto é investigar a participação das vias de sinalização Hedgehog e Notch na diferenciação osteoblástica induzida por superfície de Ti com nanotopografia (Ti-Nano), comparada à superfície de Ti-Usinada. Células osteoblásticas derivadas da calvária de ratos serão cultivadas sobre poliestireno na presença de três concentrações de fármacos agonistas e antagonistas das vias Hedgehog e Notch, purmorfamina e ciclopamina, bexaroteno e DAPT, respetivamente, e do veículo. As concentrações de cada fármaco com efeito mais pronunciado sobre as células serão selecionadas com base nas seguintes avaliações: (1) expressão gênica de marcadores ósseos, por PCR em tempo real, (2) atividade de fosfatase alcalina (ALP) e (3) formação de matriz extracelular mineralizada. Em seguida, células osteoblásticas serão cultivadas sobre discos de Ti-Nano e Ti-Usinado e serão avaliadas: (1) expressão gênica de marcadores ósseos e componentes envolvidos nas vias Hedgehog e Notch, por PCR em tempo real, (2) expressão de proteínas envolvidas nas vias de sinalização Hedgehog e Notch, e marcadores ósseos por Western blot, (3) atividade ALP e (4) formação de matriz extracelular mineralizada. Por fim, células osteoblásticas serão cultivadas sobre as duas superfícies de Ti na presença dos agonistas e antagonistas, nas concentrações previamente selecionadas, para investigarmos o efeito da ativação e inibição das vias de sinalização Hedgehog e Notch no potencial osteogênico do Ti-Nano comparado ao Ti-Usinado, avaliando os mesmos parâmetros celulares mencionados acima. Os resultados desse estudo poderão contribuir para o entendimento dos mecanismos celulares envolvidos na interação entre tecido ósseo e implantes de Ti nanoestruturados e consequentemente para o desenvolvimento de novas estratégias combinando vias de sinalização e topografias de superfície que favoreçam os eventos relacionados ao processo de osseointegração.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Integrante / Adalberto Luiz Rosa - Integrante / Márcio Mateus Beloti - Coordenador / Paola Gomes Souza - Integrante., Financiador(es): Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - Bolsa.

• 2017 - 2021

  Uso do CRISPR-Cas9 na investigação do papel das integrinas na diferenciação osteoblástica de células-tronco mesenquimais induzidas por superfícies de titânio, Descrição: Interações entre células e titânio (Ti) são cruciais para a osseointegração de implantes dentários. As integrinas medeiam a adesão de células às proteínas da matriz extracelular e alguns dos seus membros estão envolvidos no processo de diferenciação osteoblástica. Os resultados do projeto intitulado " Papel das integrinas na diferenciação osteoblástica de células-tronco mesenquimais induzidas por titânio com micro e nanotopografia" têm mostrado que o Ti com nanotopografia (Ti-Nano) e o Ti com microtopografia (Ti-Micro) modulam a expressão de vários genes envolvidos na via de sinalização das integrinas comparado ao Ti usinado (Ti-Usinado), com efeito mais pronunciado sobre o Ti-Nano. As integrinas beta 3, alfa 10 e alfa V estão entre as reguladas pelo Ti-Nano. Então, o objetivo desse estudo é investigar, através do silenciamento gênico por agrupados de curtas repetições palindrômicas regularmente interespaçadas / associados à nuclease 9 (clustered regularly interspaced short palindromic repeats / associated nuclease 9) (CRISPR-Cas9), o papel dessas integrinas na diferenciação osteoblástica induzida pelas superfícies de Ti. Para isso, células-tronco mesenquimais de ratos serão transduzidas com CRISPR-Cas9 e a eficiência de silenciamento será avaliada por PCR em tempo real e Western blot. As células transduzidas serão cultivadas sobre os discos de Ti com as três diferentes superfícies, Ti-Nano, Ti-Micro e Ti-Usinado e os seguintes parâmetros serão avaliados: (1) expressão gênica da integrina beta 3, integrina alfa 10 e integrina alfa V e dos marcadores osteoblásticos RUNX2, osterix, sialoproteína óssea e fosfatase alcalina (ALP), por PCR em tempo real aos 3 dias, (2) expressão proteica da integrina beta 3, integrina alfa 10 e integrina alfa V e RUNX2, por Western blot aos 3 dias, e (3) atividade de ALP, por Fast Red aos 10 dias. Os dados quantitativos serão obtidos em triplicata (n=3) e analisados pelo teste ANOVA One-Way com nível de significância de 5.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Doutorado: (2) . , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Integrante / Adalberto Luiz Rosa - Integrante / Gileade Pereira Freitas - Integrante / BELOTI, MM - Coordenador / Janet Stein - Integrante.

• 2017 - 2018

  Terapia gênica para regeneração óssea usando o sistema CRISPR-Cas9, Descrição: É de interesse nas áreas de cirurgia buco-maxilo-facial e ortopedia o tratamento de não-união de fraturas. Entre vários tratamentos disponíveis, a terapia celular tem surgido como uma promissora abordagem, mas de acordo com os nossos resultados, ainda não é suficiente para alcançar a regeneração óssea. Assim, propomos o uso da terapia gênica para atender e melhorar essa necessidade ainda não atendida. Para tanto, selecionamos genes envolvidos na promoção ou inibição da osteogênese. Entre os genes envolvidos na promoção óssea, nós selecionamos a proteína óssea morfogenética 9 (BMP-9) que inicia a formação de cartilagem e dos ossos. Entre os genes envolvidos na inibição da formação óssea, nós selecionamos a proteína 1 associada ao ligamento periodontal (PLAP-1) que atua como um fator inibitório para a diferenciação e formação óssea. Portanto, o objetivo deste projeto BEPE é analisar in vitro, o comportamento de células-tronco mesenquimais derivadas de medula óssea de camundongo (mBM-MSCs) sobre-expressando o gene BMP-9 e reprimindo o gene PLAP-1 através da técnica CRISPR-Cas9. A partir desses dados, poderemos propor terapias alternativas para o reparo de defeitos ósseos e situações de não-união de fraturas.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Integrante / Adalberto Luiz Rosa - Coordenador / Márcio Mateus Beloti - Integrante / Gileade Pereira Freitas - Integrante / Jane B Lian - Integrante.

• 2016 - 2020

  Papel das Vias de Sinalização de Wnt no Potencial Osteogênico de Superfície de Titânio com Nanotopografia, Descrição: A superfície de titânio (Ti) com nanotopografia, obtida por condicionamento com solução de H2SO4/H2O2, tem grande potencial osteogênico por modular vias de sinalização envolvidas na diferenciação osteoblástica, como por exemplo as vias de integrinas e proteínas ósseas morfogenéticas (BMPs). Considerando a participação importante de vias de Wingless-Type mouse mammary tumor vírus [MMTV] Integration Site (Wnt) no processo de osteogênese, nós elaboramos a hipótese de que essas vias estão, ao menos em parte, envolvidas no potencial osteogênico da superfície de Ti com nanotopografia. Para testar essa hipótese, células osteoblásticas da linhagem MC3T3-E1 serão cultivadas sobre discos de Ti com nanotopografia e usinados (controle) e será avaliada a expressão gênica, por PCR em tempo real, de marcadores das vias de Wnt canônica e não-canônica Wnt/Ca2+. A partir dos resultados de expressão gênica, serão selecionados um gene-alvo da via de sinalização de Wnt canônica e um da via não-canônica regulados de forma mais intensa pela superfície de Ti com nanotopografia para a aquisição de agrupados de curtas repetições palindrômicas regularmente interespaçadas (CRISPR-Cas9/gRNA) que serão utilizados para o silenciamento dos dois genes-alvos de interesse. A eficácia do silenciamento dos CRISPR-Cas9/gRNA será avaliada por PCR em tempo real e Western blot para determinar a expressão gênica e proteica, respectivamente, dos dois genes-alvos. Em seguida, células da linhagem MC3T3-E1 serão transduzidas com os CRISPR-Cas9/gRNA relacionados às vias de Wnt canônica e não-canônica Wnt/Ca2+ previamente selecionados, na concentração pré-determinada. As transduções serão feitas da seguinte forma: (1) CRISPR-Cas9/gRNA para a via de Wnt canônica, (2) CRISPR-Cas9/gRNA para a via não-canônica Wnt/Ca2+, (3) CRISPR-Cas9/gRNA para as vias de Wnt canônica e não-canônica Wnt/Ca2+ ou (4) controle (CRISPR-Cas9 sem gRNA). As células transduzidas, e consequentemente com as vias de Wnt canônica e/ou não-canônica silenciadas, serão cultivadas sobre as superfícies de Ti com nanotopografia e controle para a avaliação de: (1) expressão de genes relacionados às vias de sinalização de Wnt canônica e não-canônica e dos marcadores osteoblásticos RUNX2, osterix (OSX), fosfatase alcalina (ALP) e osteocalcina (OC), por PCR em tempo real, (2) expressão proteica de RUNX2, por Western blot, e (3) atividade de ALP. Os dados quantitativos serão obtidos em quintuplicata (n=5) e submetidos ao teste de aderência à curva normal e homegeneidade de variâncias. Caso seja detectada normalidade dos dados, será aplicado o teste-t ou ANOVA (para comparação de 2 grupos e comparações múltiplas, respectivamente) ou se não, o teste Mann Whitney ou Kruskal-Wallis serão aplicados. O nível de significância adotado será de 5. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Integrante / Adalberto Luiz Rosa - Integrante / Gileade Pereira Freitas - Integrante / DE OLIVEIRA, F. S. - Integrante / BELOTI, MM - Coordenador / ABUNA, RODRIGO P. F. - Integrante.

• 2016 - 2018

  Avaliação do potencial de células osteoblásticas de diferentes origens embrionárias na regeneração do tecido ósseo, Descrição: Apesar do grande potencial de regeneração do tecido ósseo, em algumas situações a extensão da lesão impede que o tecido se repare completamente. Como uma alternativa promissora em relação aos tratamentos existentes, a terapia celular tem atraído a atenção de diversos grupos de pesquisa. A utilização de diversos tipos celulares tem sido investigada, incluindo a aplicação de osteoblastos. No entanto, embora a literatura mostre que tecidos ósseos originários da crista neural e do mesoderma possuam potencial osteogênico e capacidade regenerativa diferentes, o uso de osteoblastos dessas origens embrionárias distintas ainda não foi avaliado. Sendo assim, o objetivo desse estudo é avaliar o potencial osteogênico e regenerativo de células osteoblásticas derivadas da crista neural e do mesoderma. Para isso, osteoblastos do osso frontal, originários da crista neural, e do osso parietal, originários do mesoderma, serão obtidos de ratos recém-nascidos e comparados: 1) in vitro em cultura de células para avaliar seu potencial osteogênico; e 2) in vivo para comparar seu potencial em regenerar defeitos ósseos. O potencial osteogênico será avaliado em osteoblastos cultivados por até 17 dias para avaliação da proliferação, atividade de fosfatase alcalina (ALP), formação de nódulos de matriz mineralizada, expressão dos genes marcadores do tecido ósseo Runx2, ALP, osteocalcina e sialoproteína óssea e expressão das proteínas Runx2, ALP e osteopontina. Para a regeneração do tecido ósseo, as células serão injetadas diretamente em defeitos criados em calvárias de ratos duas semanas antes da injeção para mimetizar defeito ósseo não reparado. Quatro semanas após a injeção, os animais serão eutanasiados e o tecido ósseo neoformado será avaliado por microtomografia computadorizada e análise histológica. Os dados serão submetidos ao teste de aderência à curva normal para determinar o teste estatístico adequado. Os resultados desse estudo poderão estabelecer novos parâmetros com relação às características de células candidatas ao uso em terapia celular, visto que, até o momento, não há na literatura estudos avaliando o efeito de osteoblastos de diferentes origens embrionárias. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Integrante / Adalberto Luiz Rosa - Coordenador / Gileade Pereira Freitas - Integrante / BELOTI, MM - Integrante / Alann Taffarell Porfirio de Souza - Integrante.

• 2016 - 2018

  Participação de quinases de adesão focal na diferenciação osteoblástica de células-tronco mesenquimais induzida por superfícies de titânio com micro e nanotopografia, Descrição: As integrinas são proteínas transmembrana constituídas por duas subunidades (± e ²) e tem como função primária a adesão celular e alguns de seus membros estão envolvidos no processo de diferenciação osteoblástica. As integrinas são capazes de sinalizar em ambas as direções da membrana celular, ativando várias proteínas tirosina quinases e duas vias de sinalização que envolvem as FAK (focal adhesion kinases, quinases de adesão focal). Trabalhos mostram que as FAK fazem parte dos mecanismos de transdução do sinal que promovem a maturação dos osteoblastos em células já comprometidas com o fenótipo osteogênico. Além disso, as FAK participam dos estágios iniciais de diferenciação de células-tronco mesenquimais (CTMs) humanas em osteoblastos. Sendo assim, o desenvolvimento de biomateriais que possam modular a interação entre integrinas e matriz extracelular via FAK, representa uma estratégia importante para terapias com implantes osseointegráveis. Considerando a relevância dessas quinases na sinalização de integrinas, o objetivo do presente estudo é investigar o papel das FAK na diferenciação osteoblástica de CTMs induzida por nanotopografia de superfície de titânio (Ti) comparada a uma superfície de Ti com microtopografia comercialmente disponível em implantes dentários osseointegráveis e à superfície usinada não tratada (controle). Para isso, utilizaremos o composto PF-573228, um inibidor específico das FAK e após a seleção da concentração ideal desse composto, as células serão cultivadas sobre as três superfícies avaliadas, com ou sem o PF-573228, e serão avaliados os seguintes parâmetros: (1) expressão gênica das FAK e dos marcadores osteoblásticos, Runx2, osterix, fosfatase alcalina, osteocalcina, osteopontina e sialoproteína óssea por PCR em tempo real, aos 3, 7 e 10 dias, (2) a atividade da fosfatase alcalina, aos 10 dias e (3) a formação de matriz extracelular mineralizada por coloração com vermelho de alizarina, aos 21 dias.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Integrante / BELOTI, MM - Coordenador.

• 2015 - 2018

  Validação de Genes de Referência para Real-Time PCR em Culturas de Células Osteoblásticas, Descrição: Para o monitoramento da expressão de genes envolvidos no processo de diferenciação dos osteoblastos, a técnica de Real-time PCR é um dos métodos de escolha devido a sua reprodutibilidade e relativa facilidade de execução. De grande importância é a normalização dos resultados observados em relação a genes de referência para minimizar possíveis diferenças devido a variações da técnica. Esses genes de referência devem apresentar expressão constante ao longo dos diferentes períodos de cultura e são utilizados para a normalização da expressão dos genes de interesse. Diante disso, o objetivo deste projeto é avaliar a expressão de 32 genes de referência em diferentes modelos de cultura de células osteoblásticas utilizando culturas primárias e linhagem imortalizada. As primárias serão obtidas de células-tronco mesenquimais (CTMs) derivadas de medula óssea humana e de ratos e de calvária de ratos recém-nascidos. A linhagem celular usada será a MC3T3-E1. Serão realizadas duas repetições para cada tipo celular avaliado sendo que os experimentos relativos à expressão de genes relacionados a diferenciação de osteoblastos serão realizados em triplicata. Os dados obtidos serão submetidos aos testes de análise de variância (ANOVA) ou Kruskall-Wallis, quando apropriado. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Integrante / Adalberto Luiz Rosa - Coordenador / Gileade Pereira Freitas - Integrante / BELOTI, MM - Integrante / Alann Taffarell Porfirio de Souza - Integrante / ABUNA, RODRIGO P. F. - Integrante.

• 2014 - 2018

  Terapia Celular: Avaliação do Potencial de Injeções Locais de Células-Tronco Mesenquimais Derivadas de Medula Óssea e de Tecido Adiposo na Regeneração do Tecido Ósseo, Descrição: O osso é um tecido com grande capacidade de regeneração, porém em algumas situações a extensão da injúria impede o reparo do tecido. Nesse cenário, a terapia celular tem atraído a atenção de diversos grupos de pesquisa por ser uma alternativa promissora em relação aos tratamentos existentes. No entanto, muitos aspectos experimentais necessitam ser melhor investigados para tornar a terapia celular um tratamento efetivo para a regeneração de defeitos do tecido ósseo. Sendo assim, o objetivo do estudo será avaliar o potencial de células-tronco mesenquimais (CTMs), derivadas de medula óssea e de tecido adiposo, bem como de osteoblastos diferenciados a partir dessas CTMs, para regenerar o tecido ósseo quando injetadas (injeções repetidas) diretamente em defeitos criados em calvárias de ratos. Para isso, CTMs serão obtidas de medula óssea e de tecido adiposo inguinal de ratos, expandidas in vitro e mantidas com características de CTMs ou diferenciadas em osteoblastos. A diferenciação osteoblástica será confirmada por avaliação da expressão gênica de Runx2, fosfatase alcalina e osteocalcina por PCR em tempo real. Para os experimentos in vivo, células dos quatro grupos, (1) CTMs derivadas de medula óssea, (2) CTMs derivadas de tecido adiposo, (3) osteoblastos diferenciados a partir de CTMs de medula óssea e (4) osteoblastos diferenciados a partir de CTMs de tecido adiposo, serão transfectadas com plasmídeos expressando o gene pGL3 Luciferase Reporter Vector. Dessa forma, será possível avaliar o tempo de permanência dessas células após injeção direta em defeitos ósseos criados em calvária de ratos para determinar a quantidade de injeções necessárias e o intervalo entre elas para se atingir a regeneração completa dos defeitos. Oito semanas após a criação dos defeitos, intervalo de tempo no qual as injeções de células serão realizadas, o tecido ósseo neoformado será avaliado por microtomografia computadorizada, análise histológica e análise do módulo de elasticidade e da dureza. Os dados serão submetidos ao teste não-paramétrico, para dados independentes e para mais de dois grupos, de Kruskall-Wallis, seguido de teste de comparações múltiplas, quando necessário. Os resultados desse estudo poderão estabelecer novos parâmetros com relação à injeção de células para regenerar tecido ósseo, visto que, até o momento, não há na literatura estudos avaliando o efeito de injeções repetidas. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Integrante / Adalberto Luiz Rosa - Coordenador / Gileade Pereira Freitas - Integrante / Adriana L.G. de Almeida - Integrante / BELOTI, MM - Integrante / Alann Taffarell Porfirio de Souza - Integrante.

• 2014 - 2018

  Participação de integrinas na diferenciação osteoblástica de células-tronco mesenquimais induzida por superfícies de titânio com micro e nanotopografia, Descrição: As integrinas constituem uma família de receptores de membrana que tem como função primária a adesão de células a proteínas da matriz extracelular e alguns de seus membros estão envolvidos nos processos de diferenciação osteoblástica e formação óssea, eventos diretamente relacionados à osseointegração de implantes de titânio (Ti). Sabe-se que superfícies de Ti com micro e nanotopografia favorecem a mineralização da matriz extracelular; no entanto, os mecanismos celulares envolvidos não são completamente entendidos. Neste contexto, nós elaboramos a hipótese de que as integrinas podem exercer função importante na diferenciação osteoblástica induzida por superfícies de Ti micro e nanoestruturadas. Para testar essa hipótese, células-tronco mesenquimais (CTMs) derivadas de medula óssea de ratos serão cultivadas sobre discos de Ti com três superfícies diferentes, (1) com nanotopografia, (2) com microtopografia e (3) usinada (sem tratamento - controle) para avaliar: (1) a presença de adesões focais por imunolocalização de vinculina, (2) a expressão gênica de componentes envolvidos na via de sinalização das integrinas por PCR (polymerase chain reaction) array , (3) a expressão gênica de marcadores ósseos por PCR em tempo real, (4) a expressão de proteínas envolvidas na via de sinalização das integrinas e de marcadores ósseos por Western blot e (5) o efeito do silenciamento, utilizando siRNA, de genes envolvidos na via de sinalização das integrinas sobre a diferenciação osteoblástica induzida por diferentes superfícies de Ti por PCR em tempo real e Western blot. Os resultados desse estudo podem contribuir para o entendimento dos mecanismos intracelulares envolvidos na interação entre tecido ósseo e implantes de Ti e, consequentemente, para o desenvolvimento de novas estratégias envolvendo integrinas e topografias de superfície que favoreçam os eventos relacionados ao processo de osseointegração. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Doutorado: (2) . , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Integrante / Adalberto Luiz Rosa - Integrante / Gileade Pereira Freitas - Integrante / BELOTI, MM - Coordenador.

• 2014 - 2018

  Efeito de Injeções Locais de Células-Tronco Mesenquimais ou Osteoblastos na Regeneração do Tecido Ósseo, Descrição: O osso é um tecido com grande capacidade de regeneração, mas em algumas situações a extensão da injúria impede o reparo do tecido. Nesse cenário, a terapia celular tem atraído a atenção de diversos grupos de pesquisa por ser uma alternativa promissora em relação aos tratamentos existentes. No entanto, muitos aspectos experimentais necessitam ser melhor investigados para tornar essa terapia um tratamento efetivo para a regeneração de defeitos do tecido ósseo. Sendo assim, o objetivo desse estudo será avaliar o potencial de células-tronco mesenquimais (CTMs) derivadas de medula óssea (CTMs-MO) e de tecido adiposo (CTMs-TA), bem como de osteoblastos diferenciados a partir dessas CTMs para regenerar o tecido ósseo quando injetadas (injeções repetidas) diretamente em defeitos criados em calvárias de ratos. Para isso, CTMs serão obtidas de medula óssea e de tecido adiposo inguinal de ratos, expandidas in vitro e mantidas com características de CTMs ou diferenciadas em osteoblastos. As CTMs serão caracterizadas por imunofenotipagem por citometria de fluxo para os marcadores CD29, CD31, CD34, CD45, CD90 e CD106. A diferenciação osteoblástica será confirmada por avaliação da expressão gênica de Runx2, fosfatase alcalina e osteocalcina por PCR em tempo real. Para os experimentos in vivo, inicialmente o tempo de permanência das células dos quatro grupos, (1) CTMs-MO, (2) CTMs-TA, (3) osteoblastos diferenciados a partir de CTMs-MO e (4) osteoblastos diferenciados a partir de CTMs-TA, nos defeitos ósseos será avaliado por bioluminescência utilizando a injeção de células que expressam luciferase. Dessa forma, será possível determinar a quantidade de injeções necessárias e o intervalo entre elas. Duas semanas após a criação dos defeitos ósseos será realizada a primeira injeção de células e ao final de oito semanas, o tecido ósseo neoformado será avaliado por microtomografia computadorizada, análise histológica e análise do módulo de elasticidade e da dureza. Os dados serão submetidos ao teste de aderência à curva normal para determinar o teste estatístico adequado. Os resultados desse estudo poderão estabelecer novos parâmetros com relação à injeção de células para regenerar tecido ósseo, visto que, até o momento, não há na literatura estudos avaliando o efeito de injeções repetidas.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Integrante / Adalberto Luiz Rosa - Coordenador / Gileade Pereira Freitas - Integrante.

• 2013 - 2014

  Análise da expressão em larga escala de microRNAs nas amostras de RNA obtidas do tecido ósseo formado em contato com as membranas de PVDF e PTFE, Descrição: Diversas pesquisas recentes mostram que a osteogênese pode ser regulada por mecanismos pós-transcrição como a expressão temporária de microRNAs (miRs). A interação dos miRs com seu RNA mensageiro (RNAm) alvo, altera a estabilidade do RNAm e inibe o processo de tradução e, consequentemente, a expressão proteica. MicroRNAs estão envolvidos em quase todos os processos biológicos, incluindo desenvolvimento embrionário, crescimento, diferenciação e morte celular e controle metabólico, além de regularem a diferenciação osteoblástica in vitro e a formação óssea in vivo, indicando o papel relevante de miRs no tecido ósseo. A literatura é ainda incipiente e não se investigou a possível relação entre características de biomateriais e expressão de miRs em tecido ósseo. Neste contexto, a análise e a comparação da expressão de miRs nas amostras de RNA obtidas do tecido ósseo formado em contato com as membranas de PVDF e PTFE pode contribuir para o entendimento dos mecanismos intracelulares envolvidos na interação entre tecido ósseo e biomateriais e, consequentemente, com o desenvolvimento de novas estratégias que favoreçam os eventos relacionados ao processo de reparo ósseo. O presente estudo se insere no contexto do projeto intitulado "Efeito da Membrana de Poli(Vinilideno-Trifluoretileno)/Titanato de Bário sobre a Formação Óssea em Defeitos Criados em Calvárias de Ratos" que conta com financiamento FAPESP nas modalidades auxílio à pesquisa (2011/10658-8) e bolsa de mestrado (2011/13623-0). , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) . , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Integrante / Mohammad Hassan - Integrante / BELOTI, MM - Coordenador.

• 2012 - 2014

  Efeito da membrana de poli(vinilideno-trifluoretileno)/titanato de bário sobre a formação óssea em defeitos criados em calvárias de ratos, Descrição: O estabelecimento dos princípios biológicos da engenharia de tecidos tem contribuído para o desenvolvimento de membranas a serem aplicadas neste tipo de terapia que, em odontologia, tem sido empregada em situações clínicas diversas como tratamentos com implantes dentários, aumento de rebordo alveolar e reparo de defeitos ósseos de origem traumática e patológica. Nosso grupo de pesquisa realizou experimentos in vitro comparando a membrana obtida pela associação do polímero de poli(vinilideno-trifluoretileno) e da cerâmica de titanato de bário (P(VDF-TrFE)/BT) à membrana de politetrafluoretileno (PTFE). Os resultados mostraram que a maioria dos parâmetros avaliados, todos envolvidos em regeneração tecidual, exibe valores favoráveis à membrana de P(VDF-TrFE)/BT para as diferentes linhagens celulares estudadas (osteoblastos, fibroblastos e queratinócitos). Neste contexto, o objetivo do presente projeto é avaliar in vivo a resposta do tecido ósseo à membrana de P(VDF-TrFE)/BT e compará-la à membrana de PTFE (controle) . Para isso, serão criados defeitos ósseos (5 mm de diâmetro) em calvária de ratos Wistar machos (peso 200-250 g), distribuídos em três grupos com relação à utilização ou não de membranas nos defeitos ósseos: (1) membrana de P(VDF-TrFE)/BT; (2) membrana de PTFE; (3) nenhum tipo de membrana. Ao final de 4 e 8 semanas os animais serão sacrificados e serão realizados os seguintes ensaios: (1) análise tomográfica (micro-CT) dos defeitos previamente criados; (2) análises histológica e histomorfometria com base em cortes histológicos não-descalcificados; (3) PCR em tempo real para detecção de RNAm para os marcadores ósseos, runt-related transcription fator 2 (RUNX2), fosfatase alcalina (ALP), sialoproteína óssea (BSP), osteocalcina (OC), osteoprotegerina (OPG), receptor activator of nuclear factor-kappa B ligand (RANKL) e receptor activator of nuclear factor-kappa B ligand (RANK). Estes marcadores ósseos serão também detectados em amostras de tecido ósseo retiradas da calvária no momento da cirurgia para a colocação das membranas com o objetivo de comparar o osso neoformado sobre as membranas com o tecido ósseo previamente existente. O número de amostras para cada grupo em cada tempo experimental será 5 (n=5) com exceção do grupo que não receberá membrana (n=3). Os testes estatísticos para analisar os resultados numéricos serão selecionados de acordo com a distribuição das amostras. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) . , Integrantes: Helena Bacha Lopes - Integrante / BELOTI, MM - Coordenador.

Prêmios