Carlos Felipe Estevez Castro

Formação complementar

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Organização de eventos

Participação em eventos

Produções bibliográficas

• ESTEVEZ-CASTRO, CARLOS F. ; RODRIGUES, MURILLO F. ; BABARIT, ANTINÉA ; FERREIRA, FLÁVIA V. ; DE ANDRADE, ELISA G. ; MAROIS, ERIC ; COGNI, RODRIGO ; AGUIAR, ERIC R. G. R. ; MARQUES, JOÃO T. ; OLMO, ROENICK P. . Neofunctionalization driven by positive selection led to the retention of the loqs2 gene encoding an Aedes specific dsRNA binding protein. BMC BIOLOGY , v. 22, p. 1-14, 2024.

• DOS SANTOS, NAILMA S A ; ESTEVEZ-CASTRO, CARLOS F. ; MACEDO, JUAN P. ; CHAME, DANIELA F. ; CASTRO-GOMES, THIAGO ; SANTOS-CARDOSO, MARIANA ; BURLE-CALDAS, GABRIELA A. ; COVINGTON, COURTNEY N. ; STEEL, PATRICK G. ; SMITH, TERRY K. ; DENNY, PAUL W. ; TEIXEIRA, SANTUZA M. R. . Disruption of the inositol phosphorylceramide synthase gene affects Trypanosoma cruzi differentiation and infection capacity. PLoS Neglected Tropical Diseases , v. 17, p. e0011646, 2023.

• ESTÉVEZ CASTRO, CARLOS FELIPE ; SERMENT-GUERRERO, JORGE HUMBERTO ; FUENTES, JORGE LUIS . Influence of uvrA, recJ and recN gene mutations on nucleoid reorganization in UV-treated Escherichia coli cells. FEMS Microbiology Letters , v. 365, p. 1-8, 2018.

• BABARIT, A. ; ESTÉVEZ-CASTRO, C. F. ; OLMO, R. P. ; MARQUES, J. T. . The origin and function of Loqs2, a mosquito specific dsRNA binding protein. 2022. (Apresentação de Trabalho/Conferência ou palestra).

• ESTÉVEZ-CASTRO, C. F. ; CHAME, D. F. ; FERNANDES, H. ; GRECO, R. ; CARDOSO, M. S. ; DENNY, P. ; TEIXEIRA, S. M. R. . Trypanosoma cruzi Inositol Phosphorylceramide Synthase as a potential drug target for Chagas disease. 2019. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• ESTÉVEZ-CASTRO, C. F. ; CHAME, D. F. ; GRECO, R. ; FERNANDES, H. ; CARDOSO, M. S. ; DENNY, P. ; TEIXEIRA, S. M. R. . Trypanosoma cruzi Inositol Phosphorylceramide Synthase as a potential drug target for Chagas disease. 2019. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• ESTÉVEZ-CASTRO, C. F. ; GRECO, R. ; TAVARES, T. ; CARDOSO, M. S. ; DENNY, P. ; TEIXEIRA, S. M. R. . Trypanosoma cruzi Inositol Phosphorylceramide Synthase as a potential drug target for Chagas disease.. 2018. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• ESTÉVEZ-CASTRO, C. F. ; GUERRERO, J. H. S. ; LORENZO, J. L. F. . Influence of the uvrA, recJ and recN mutations in the cellular division in UV-treated Escherichia coli cells.. 2016. (Apresentação de Trabalho/Conferência ou palestra).

• ESTÉVEZ-CASTRO, C. F. ; LORENZO, J. L. F. . Establecimiento de una tinción fluorescente para el estudio de las fases del nucleoide bacteriano en Escherichia coli. 2015. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

Projetos de pesquisa

• 2020 - Atual

  Caracterização de loqs2, um gene específico do Aedes que codifica uma proteína antiviral de ligação ao dsRNA em mosquitos, Descrição: Os mosquitos Aedes aegypti e Aedes albopictus são os principais vetores de vários vírus, incluindo dengue e Zika. Curiosamente, esses mosquitos parecem ser mais permissivos a infecções por arbovírus do que outras espécies intimamente relacionadas. Os mecanismos por trás dessa singularidade permanecem amplamente desconhecidos, mas sugerem que os mosquitos do gênero Aedes têm adaptações únicas. Recentemente, o nosso grupo reportou a identificação de uma proteína de ligação ao RNA de fita dupla (dsRBP) específica do Aedes, denominada Loqs2, que está envolvida no controle da infecção pelos vírus da dengue e do zika em Ae. aegypti. Além disso, também foi demonstrado que mosquitos transgênicos expressando Loqs2 no intestino médio são mais resistentes à infecção pelo vírus da dengue e da zika, sugerindo que , loqs2 pode ser um alvo promissor para o controle genético das doenças arbovirais. No entanto, há uma falta de conhecimento básico sobre esta proteína. Dessa forma, o objetivo deste trabalho é caraterizar loqs2 usando duas abordagens diferentes. Na primeira parte, pretende-se desvendar a origem e evolução de loqs2 por meio de diferentes análises de bioinformática. A segunda parte visa caracterizar o seu papel durante a infecção viral quando expresso ectopicamente no intestino médio. Para isso será realizado o interactoma de RNA e de proteina de Loqs2 durante a infecção por zika, mediante o uso de imunoprecipitação de RNA com ligações cruzadas mediadas por formaldeído, seguida de sequenciamento profundo (fRIP-seq) e co-imunoprecipitação, seguida de espectrometria de massa (Co-IP/ MS). A primeira parte do trabalho foi concluida e compilada na forma de publicação e está em revisão na BMC Biology. Em resumo, foi descrita a origem genômica mais provável de loqs2 e que ela ocorreu antes da radiação do subgenero Aedes Stegomyia. Além disso, os dados também indicam que loqs2 está evoluindo sob seleção positiva por meio de neofuncionalização. Para a segunda parte, já foi realizada a padronização dos protocolos de fRIP e Co-IP usando o intestino médio do mosquito. O experimento de fRIP já foi realizado e o de Co-IP está em andamento. Acredita-se que essas estratégias complementares vão revelar informações fundamentais sobre o papel do loqs2 durante a infecção viral, esclarecendo as vias em que está envolvido e os cofatores e tipos de RNA com os quais interage.. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Doutorado: (1) . , Integrantes: Carlos Felipe Estévez Castro - Integrante / João Trindade Marques - Coordenador / Roenick Proveti Olmo - Integrante., Número de produções C, T & A: 1

• 2018 - 2020

  Trypanosoma cruzi Inositol Phosphorylceramide Synthase as a Potential Drug Target for Chagas Disease, Descrição: Sphingolipids (SLs) are an essential part of all eukaryotic cellular membranes. Inositol phosphorylceramide (IPC) is an SL present in numerous protozoa but absent in mammals. InTrypanosoma cruzi, this complex SL is synthesized by the IPC synthase, an integral membrane protein expressed in all parasite forms. Thus, IPC synthase constitutes an ideal target for the development of new chemotherapy for Chagas disease, an illness caused byT. cruziinfection, which still lacks effective treatment. In this study, we aimed to validate theT. cruziIPC synthase (TcIPCS) as a potential therapeutic target for Chagas disease, through the generation and characterization of genetically modified parasites. We also evaluated potential anti-TcIPCS compounds to verify the tractability of the enzyme for drug screening. Using the CRISPR-Cas9 technology, we generatedTcIPCSnull mutants, disproving an assumption about the essentiality of this gene inT. cruzi. Nevertheless, phenotypic characterizations ofTcIPCSnull mutants demonstrated the importance of TcIPCS for the fitness of this parasite. TcIPCS deletion affected epimastigote proliferation and metacyclogenesis. Moreover, Knock-out (KO) parasites showed decreasedin vitroinfection capacities, intracellular amastigote replication and trypomastigote release from host-cells.Interestingly, the supernatant of cells infected with the mutants showed the predominance of extracellular amastigotes (EA), most likely as a result of metabolic changes that trigger differentiation of the released trypomastigotes into EA forms. Also aimed at characterizing the TcIPCS role inT. cruzi, we generated transfected cell lines overexpressingTcIPCSusing the pROCK-Hygro expression vector. TcIPCS overexpressors showed early and enhanced metacyclogenesis in vitro. Although several attempts to obtain the full-length protein expressed in E. coli were unsuccessful, we were able to express and purify a recombinant antigenic C-terminal fraction of the protein that will be used to immunize mice. Finally, we tested recently identified specific inhibitors of theL. majorIPCS, against wild typeT. cruziandTcIPCSnull mutants using a resazurin cell viability assay. The results of dose-response assays with four selected compounds showed no significant activity against epimastigotes. In conclusion, althoughTcIPCSwas proven to be non-essential for the viability ofT. cruzi, the phenotypic characterization of both knockout parasites and overexpressors suggests that this enzyme is still an attractive target for drug development.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) . , Integrantes: Carlos Felipe Estévez Castro - Integrante / Paul Denny - Integrante / Santuza Maria Ribeiro Teixeira - Coordenador., Número de produções C, T & A: 3

• 2014 - 2016

  Influence of the uvrA, recJ and recN mutations in the cellular division in UV-treated Escherichia coli cells, Descrição: When Escherichia coli is exposed to ultraviolet radiation, its DNA replication and cellular division stop. Restoration of these processes involves important modifications in the organization and compaction of the E. coli chromosome, which are dependent of the action of RecN protein. Recently our group showed that isogenic strains of E. coli uvrA and recJ are highly sensitive to UVB rays. In the following project the importance of RecN, UvrA and RecJ proteins in the cell division restoration after UVB irradiation was evaluated. Moreover, the potential modulatory effect of different terpene and flavonoids molecules -that inhibit the SOS response- in the nucleoid organizational processes after UVB irradiation was evaluated. In order to do this, we used strains with mutations in the questioned genes and studied their post-irradiation nucleoid kinetics, using an established fluorescent staining technique. Then, in simple treatments and in co-treatments with UVB rays, we evaluated the influence of the different compounds mentioned on the frequencies of the bacterial nucleoid morphotypes. In the post-irradiation kinetics of the wild genotype, the compacted nucleoid morphotype increased between the initial 15-30 minutes; then, this morphotype and the bilobed decreased until the 60 minutes mark, while the extended morphotype increases. Finally, after 60 minutes, the bilobed morphotype increased and the extended morphotype decreased. These dynamics were affected in the uvrA and recJ strains; they delayed the compaction to 45 and 60 minutes, respectively. Then the extended morphotype increased, a pattern that was observed closely related to the cellular filamentation process. On the other hand, the recN strain did not show increases in the compacted morphotype during its post-irradiation kinetics. In the second part of our study, we observed frequency differences in the bacterial nucleoid morphotypes of the different treatments with respect to the controls. In conclusion, the results showed that after UVB radiation, E. coli cell division restore is characterized by a nucleoid re-organization with three main sequential steps: compaction, de-compaction and chromosome segregation coupled with cytokinesis. These dynamics were modified in the absence of the uvrA, recJ and recN functions, demonstrating the importance of uvrA and recJ in the restoration of the cellular division, and the importance of recN in the compaction of the nucleoid. Finally, it was proven that the natural compounds we evaluated modulate the compaction and de-compaction processes of the bacterial nucleoid, especially those repair processes that occur during the extended phase of the nucleoid and the nucleoid division processes.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (1) . , Integrantes: Carlos Felipe Estévez Castro - Integrante / Jorge Luis Fuentes Lorenzo - Coordenador / Jorge humberto Serment Guerrero - Integrante., Número de produções C, T & A: 3

Prêmios