Ricardo Titze de Almeida

Pós-doutorado

Formação complementar

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Organização de eventos

Participação em eventos

Participação em bancas

Orientou

Produções bibliográficas

• Titze-de-Almeida, Ricardo ; ARAÚJO LACERDA, PEDRO HENRIQUE ; OLIVEIRA, EDSON PEREIRA DE ; OLIVEIRA, MARIAH EDUARDA FERREIRA DE ; VIANNA, YNGRID SALLABERRY SILVA ; COSTA, AMANDA MACHADO ; PEREIRA DOS SANTOS, ELOÍSA ; GUÉRARD, LOUISE MARIE COELHO ; FERREIRA, MATHEUS AUGUSTO DE MIRANDA ; RODRIGUES DOS SANTOS, ISABEL CRISTINA ; GONÇALVES, JÉSSICA DANIELE DA SILVA ; GINANI FERREIRA, GABRIEL ; SOUZA TITZE-DE-ALMEIDA, SIMONEIDE ; BRANDÃO, PEDRO RENATO DE PAULA ; ERI SHIMIZU, HELENA ; SILVA, ANDREZZA PAULA BRITO ; DELGADO-RODRIGUES, RAIMUNDO NONATO . Sleep and memory complaints in long COVID: an insight into clustered psychological phenotypes. PeerJ , v. 12, p. e16669, 2024.

• CHAER, LUIS EDUARDO RAMOS ; DE MENDONÇA, JAKELINE MARTINS ; DEL NEGRO, MARIA CRISTINA ; Titze-de-Almeida, Ricardo ; NOGUEIRA, NÍCOLAS PHILIPPE BALDUINO ; PROVETTI, PRISCILA MARA ; DE PAULA BRANDÃO, PEDRO RENATO ; DE CARVALHO BISPO, DIÓGENES DIEGO ; FERREIRA, GABRIELA BILLAFAN ; FABER, INGRID ; CAVALCANTE, TAINA BARRETO ; ADONI, TARSO ; MAZZEU, JULIANA F. ; VON GLEHN, FELIPE . Differential diagnosis between multiple sclerosis and leukodystrophies - A scoping review. JOURNAL OF THE NEUROLOGICAL SCIENCES , v. 459, p. 122969, 2024.

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• BRANDÃO, PEDRO RENATO ; PEREIRA, DANILO ASSIS ; GRIPPE, TALYTA CORTEZ ; BISPO, DIÓGENES DIEGO DE CARVALHO ; MALUF, FERNANDO BISINOTO ; Titze-de-Almeida, Ricardo ; DE ALMEIDA E CASTRO, BRENDA MACEDO ; MUNHOZ, RENATO PUPPI ; TAVARES, MARIA CLOTILDE HENRIQUES ; CARDOSO, FRANCISCO . Mapping brain morphology to cognitive deficits: a study on PD-CRS scores in Parkinson?s disease with mild cognitive impairment. Frontiers in Neuroanatomy , v. 18, p. 1362165, 2024.

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• Titze-de-Almeida, Ricardo ; DA CUNHA, THAYLISE RAMALHO ; DOS SANTOS SILVA, LETÍCIA DIAS ; FERREIRA, CLARISSE SANTOS ; SILVA, CAROLINE PENA ; RIBEIRO, ADRIANA PINHEIRO ; DE CASTRO MOREIRA SANTOS JÚNIOR, AGENOR ; DE PAULA BRANDÃO, PEDRO RENATO ; SILVA, ANDREZZA PAULA BRITO ; DA ROCHA, MÁRCIA CRISTINA OLIVEIRA ; XAVIER, MARY-ANN ELVINA ; TITZE-DE-ALMEIDA, SIMONEIDE SOUZA ; SHIMIZU, HELENA ERI ; DELGADO-RODRIGUES, RAIMUNDO NONATO . Persistent, new-onset symptoms and mental health complaints in Long COVID in a Brazilian cohort of non-hospitalized patients. BMC INFECTIOUS DISEASES , v. 22, p. 133, 2022.

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• PEREIRA, L. DE Q. ; KLUPPEL, L. M. ; FERREIRA, N. R. ; SILVA, S. S. ; PARDO, L. ; STUHMER, W. ; DEL-BEL, E. A. ; TITZE-DE-ALMEIDA, R. . Silencing the expression of the alpha isoform of the neuronal nitric oxide synthase enzyme (nNOS) in neuroblastoma cells by synthetic double-stranded siRNA (n.851). In: American Society of Gene & Cell Therapy - ASGT 14TH ANNUAL MEETING MAY 18-21, 2011, SEATTLE, WA. Molecular Therapy, 2011. v. 19. p. S326 (Supl.1).

• RESENDE, F. F. B. ; DEL-BEL, E. A. ; PARDO, L. ; STUHMER, W. ; TITZE-DE-ALMEIDA, R. . RNA interference effects on neuronal nitric oxide synthase enzyme (nNOS) from glioma cells in culture (n.850). In: American Society of Gene & Cell Therapy - ASGT 14TH ANNUAL MEETING, MAY 18-21, 2011, SEATTLE, WA. Molecular Therapy, 2011. v. 19. p. S325 (Supl.1).

• CUNHA, L. C. ; FARIA, A. P. P. ; GONZAGA, B. C. ; DEL-BEL, E. A. ; PARDO, L. ; STUHMER, W. ; TITZE-DE-ALMEIDA, R. . Silencing the human EagI potassium channel in glioma cells by using short interfering RNA (n.570). In: American Society of Gene & Cell Therapy - ASGT 14TH ANNUAL MEETING, , MAY 18-21, 2011, SEATTLE, WA. Molecular Therapy, 2011. v. 19. p. S218 (Supl.1).

• ROSA, Adriana Helena ; XAVIER, Diego Batista ; SENA, Hilana dos Santos ; TEIXEIRA, Danilo Simonini ; Tomaz, C ; TITZE-DE-ALMEIDA, R. . Prevalência de espécies de enterococos e de genes de resistência à vancomicina em primatas não-humanos no Distrito Federal.. In: XXIV Congresso Brasileiro de Microbiologia, 2007, Brasília. XXIV Congresso Brasileiro de Microbiologia, 2007.

• SENA, Hilana dos Santos ; ROSA, Adriana Helena ; XAVIER, Diego Batista ; TITZE-DE-ALMEIDA, R. . Estudo da colonização intestinal por enterococos resistentes à vancomicina (VRE) em suínos do Distrito Federal.. In: XXIV Congresso Brasileiro de Microbiologia, 2007, Brasília. XXIV Congresso Brasileiro de Microbiologia, 2007.

• CESAR, M F G ; GREUEL, Alexandra ; XAVIER, Diego Batista ; PALUDO, Giane Regina ; TITZE-DE-ALMEIDA, R. . Diagnóstico molecular de Ehrlichia canis por PCR em etapa única em cães do Distrito Federal com suspeita clínica de erliquiose.. In: XXIV Congresso Brasileiro de Microbiologia, 2007, Brasília. XXIV Congresso Brasileiro de Microbiologia, 2007.

• SANTOS, L R S ; Amaral, A. ; RIBEIRO, R ; FELIPE, M. S. S. ; MORAIS, P. C. ; TEDESCO, A. C. ; BORIN, M F ; SIMEONE, L A ; TITZE-DE-ALMEIDA, R. . Ensaio preliminar para detecção e quantificação do antifúngico anfotericina B por CLAE para estudos de farmacocinética em modelo animal de Pbmicose.. In: XXIV Congresso Brasileiro de Microbiologia, 2007, Brasília. XXIV Congresso Brasileiro de Microbiologia, 2007.

• GREUEL, A. ; XAVIER, D. ; COELHO, Maria Madalena S ; TITZE-DE-ALMEIDA, R. ; PALUDO, Giane Regina . High agreement between the 16S rRNA PCR results and the hematological signs of ehrlichiosis in dogs from Brasilia, Brazil.. In: XVII ECVIM - CA, 2007, Budapeste. XVII ECVIM - CA, 2007.

• GREUEL, Alexandra ; XAVIER, Diego Batista ; COELHO, Maria Madalena S ; TITZE-DE-ALMEIDA, R. ; PALUDO, Giane Regina . Diagnóstico molecular de ehrlichiose em cães. In: XII Congresso de Iniciação Científica da UnB, 3. Congresso de Iniciação Científica do DF, Brasília 12 a 15 de setembro de 2006., 2006, Brasília. XII Congresso de Iniciação Científica da UnB, 2006.

• SANTIAGO, K.A.S. ; D'AZEVEDO, P.A.D. ; FURTADO, G. ; XAVIER, Diego Batista ; TITZE-DE-ALMEIDA, R. ; PIGNATARI, A.C.C. . Diagnóstico rápido de enterococos resistentes à vancomicina (ERV) em swabs de pacientes hospitalizados. In: 40. Congresso Brasileiro de Patologia Clínica e Medicina Laboratorial, 2006, Curitiba. 40. Congresso Brasileiro de Patologia Clínica e Medicina Laboratorial, 2006.

• XAVIER, Diego Batista ; MARQUES, F. ; BERNAL, Francisco Ernesto Moreno ; DAZEVEDO, P. ; PIGNATARI, A.C.C. ; TITZE-DE-ALMEIDA, R. . Diferenças de variabilidade genética entre isolados de Enterococcus gallinarum e E. casseliflavus obtidos de frangos destinados ao consumo humano. In: III SINREBAM. Simpósio de Resistência Bacteriana aos Antimicrobianos, 2006, Rio de Janeiro. III SINREBAN. Simpósio de Resistência Bacteriana aos Antimicrobianos, 2006.

• XAVIER, Diego Batista ; BERNAL, Francisco Ernesto Moreno ; TITZE-DE-ALMEIDA, R. . Isolamento seletivo e PCR multiplex para identifição de espécies de enterococos e genes de resistência em amostras de frango caipira. In: XXXII CONBRAVET - Congresso Brasileiro de Medicina Veterinária, 2005, Uberlândia - MG. XXXII CONBRAVET - Congresso Brasileiro de Medicina Veterinária, 2005.

• GREUEL, Alexandra ; XAVIER, Diego Batista ; COELHO, Maria Madalena S ; STEIN, Michele Russo ; TITZE-DE-ALMEIDA, R. ; PALUDO, Giane Regina . Relato de identificação molecular de Ehrlichia canis em cão do Distrito Federal.. In: XXXII CONBRAVET - Congresso Brasileiro de Medicina Veterinária, 2005, Uberlândia - MG. XXXII CONBRAVET - Congresso Brasileiro de Medicina Veterinária, 2005.

• PERECMANIS, Simone ; MARTINS, Christine Souza ; ANDRADE, Hudson Holanda ; SOUZA, Nara Rúbia ; TITZE-DE-ALMEIDA, R. . Rhodococcus equi resistente a beta-lactâmicos e macrolídios isolado de piotórax de gato.. In: XXIII Congresso Brasileiro de Microbiologia, 2005, Santos - SP. XXIII Congresso Brasileiro de Microbiologia, 2005.

• GROSSMANN, Nárjara Veras ; MARTINS, Christine Souza ; TITZE-DE-ALMEIDA, R. . Identificação dos genes de resistência à vancomicina vanc1 e vanc2/3 em enterococos isolados de cães atendidos no hospital veterinário da universidade de brasília. In: XXIII Congresso Brasileiro de Microbiologia, 2005, Santos - SP. XXIII Congresso Brasileiro de Microbiologia, 2005.

• TITZE-DE-ALMEIDA, R. ; WILLEMS, R. J. L. ; TOP, J. ; RODRIGUES, I. P. ; FONSECAII, R. F. ; BOELENS, H. ; BRANDILEONE, M. C. ; ZANELLA, R. C. ; FELIPE, M. S. S. ; BELKUM, A. V. . Genetic variability of variable number of tandem repeats (VNTRs) among Brazilian Enterococcus faecalis strains. Resumo publicado no 44th ICAAC, Washington, 30 de outubro a 02 de novembro. In: 44th Interscience Conference on Antimicrobial Agents and Chemotherapy - ICAAC, 2004, Washington. 44th ICAAC, 2004.

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• TITZE-DE-ALMEIDA, R. ; ROLLO FILHO, M. ; NASCIMENTO, R. S. ; SILVEIRA, C. A. N. ; RODRIGUES, I. P. ; EUDES FILHO, J. ; FONSECAII, R. F. ; MORAES, L. M. P. ; FELIPE, M. S. S. . Resistência de enterococos em Unidades de Terapia Intensiva. In: VIII Congresso Brasileiro de Controle de Infecção e Epidemiologia Hospitalar, 2002, Curitiba, 2002.

• TITZE-DE-ALMEIDA, R. ; SILVEIRA, C. A. N. ; TAUIL, P. L. ; CASTRO, C. N. ; CALÁCIA, A. V. ; RODRIGUES, I. P. ; EUDES FILHO, J. ; ROLLO FILHO, M. ; NASCIMENTO, R. S. ; FELIPE, M. S. S. . Perfil de sensibilidade de Enterococci isolados de pacientes de Unidade de Terapia Intensiva do Hospital Universitário de Brasília - HUB. In: I Simpósio de Resistência Bacteriana aos Antimicrobianos, 02 a 05 de abril, 2001, Rio de Janeiro. I Simpósio de Resistência Bacteriana aos Antimicrobianos, 2001. p. 45-45.

• TITZE-DE-ALMEIDA, R. ; SOARES, C. M. ; DEL-BEL, E. A. ; GUIMARÃES, F. S. ; MATOS, L. G. ; AIRES, R. C. ; PEREIRA, L. A. ; M SOBRINHO, F. . Expressão do proto-oncogene FRA-1na formação hipocampal de ratos após estresse de imobilização.. In: XIII Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental, 1998, Caxambu, MG.

• TITZE-DE-ALMEIDA, R. ; GUINA, R. A. . Uso de animais X uso de simulação computadorizada no ensino de Farmacologia Veterinária. In: I Congresso Latino-Americano de Bem-Estar Animal, 1998, São Paulo, SP.

• TITZE-DE-ALMEIDA, R. ; SOARES, C. M. ; DEL-BEL, E. A. ; GARCIA-CAIRASCO, N. G. ; GUIMARÃES, F. S. ; AIRES, R. C. ; IRINEU, V. M. ; CAMPOS, M. G. V. ; PEREIRA, M. A. . Indução da proteína do estresse HSP-60 na formação hipocampal de ratos após convulsão induzida por pentilenotetrazol.. In: XII Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental, 1997, Caxambu, MG.

• TITZE-DE-ALMEIDA, R. ; SOARES, C. M. ; DEL-BEL, E. A. ; MATOS, L. G. ; LOURENÇO, R. G. ; CARVALHO, M. A. ; AIRES, R. C. . Expressão do proto-oncogene FRA-1 após crise convulsiva induzida por pentilenotetrazol.. In: XII Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental, 1997, Caxambu, MG.

• TITZE-DE-ALMEIDA, R. ; SOARES, C. M. ; DEL-BEL, E. A. ; GUIMARÃES, F. S. ; MATOS, L. G. . Expressão cerebral da proteína do estresse HSP-60 após imobilização forçada.. In: XI Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental, 1996. p. 237.

• TITZE-DE-ALMEIDA, R. ; SOARES, C. M. ; DEL-BEL, E. A. ; GARCIA-CAIRASCO, N. G. ; PEREIRA, M. A. ; CAMPOS, M. G. V. . Expressão da heat-shok protein 60 (HSP60) no sistema nervoso central de ratos após convulsão induzida por pentilenotetrazol.. In: XI Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental, 1996, Caxambu, MG. p. 238.

• OLIVEIRA, C. L. ; TITZE-DE-ALMEIDA, R. ; DEL-BEL, E. A. ; SHIDA, H. ; GUIMARÃES, F. S. . Indução do proto-oncogene c-jun na formação hipocampal de ratos submetidos a estresse de imobilização.. In: IX Reunião Anual da Federação das Sociedades de Biologia Experimental, 1994, Caxambu, MG. p. 88.

• OLIVEIRA, C. L. ; TITZE-DE-ALMEIDA, R. ; DEL-BEL, E. A. ; SHIDA, H. ; GUIMARÃES, F. S. . Antagonismo por ansiolíticos da indução do proto-oncogene c-jun na formação hipocampal de ratos submetidos a estresse de imobilização.. In: IX Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental, 1994, Caxambu, MG. p. 87.

• TITZE-DE-ALMEIDA, R. ; DEL-BEL, E. A. ; SHIDA, H. ; GUIMARÃES, F. S. . Antagonismo por ansiolíticos da indução do proto-oncogene c-fos na formação hipocampal de ratos submetidos a estresse de imobilização.. In: IX Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental, 1994, Caxambu, MG. p. 88.

• TITZE-DE-ALMEIDA, R. ; DEL-BEL, E. A. ; SHIDA, H. ; GUIMARÃES, F. S. . Indução do proto-oncogene c-fos na formação hipocampal de ratos submetidos ao estresse de imobilização. In: VIII Reunião Anual da Federação das Sociedades de Biologia Experimental, 1993, Caxambu, MG. p. 161.

• DEL-BEL, E. A. ; TITZE-DE-ALMEIDA, R. ; SHIDA, H. ; GARCIA-CAIRASCO, N. G. ; GUIMARÃES, F. S. . Indução do proto-oncogene c-fos na glândula pineal de ratos durante estresse. In: VIII Reunião Anual da Federação das Sociedades de Biologia Experimental, 1993, Caxambu, MG.

• GUIMARÃES, F. S. ; AGUIAR, J. C. ; TITZE-DE-ALMEIDA, R. ; MECHOULAM, R. . Efeitos de derivados do canabidiol no labirinto em cruz elevado.. In: VII Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental, 1992, Caxambu - MG. p. 46.

• PADOVAN, C. M. ; TITZE-DE-ALMEIDA, R. ; AGUIAR, J. C. ; MENDONÇA NETTO, S. ; GUIMARÃES, F. S. . Papel dos receptores de serotonina localizados no hipocampo nas conseqüências comportamentais do estresse. In: VII Reunião Anual da Federação das Sociedades de Biologia Experimental, 1992, Caxambu, MG. p. 1.35.

• Titze-de-Almeida, R. . Promises of microRNAs for diagnosis and therapeutics of neurodegenerative diseases ?. 2019. (Apresentação de Trabalho/Conferência ou palestra).

• Titze-de-Almeida, R. . RNA interference in brain diseases. 2015. (Apresentação de Trabalho/Conferência ou palestra).

• Titze-de-Almeida, R. . RNA interference - the place of gene silencing in the study of glial biology.. 2013. (Apresentação de Trabalho/Conferência ou palestra).

• Titze-de-Almeida, R. . Silencing genes by RNA interference ? a promising therapy for Parkinson?s disease.. 2013. (Apresentação de Trabalho/Conferência ou palestra).

• GONZAGA, B. C. ; FARIA, A. P. P. ; DEL-BEL, E. A. ; PARDO, L. ; STUHMER, W. ; Titze-de-Almeida, R. . Padronização do PCR em tempo real para quantificação dos níveis de Eag1a em linhagem de células HEK293 transfectadas com Eag1a e tratadas com RNAs interferentes.. 2011. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• KLUPPEL, L. M. ; PEREIRA, L. DE Q. ; FARIA, A. P. P. ; RESENDE, F. F. B. ; Rubini, M. ; GONZAGA, B. C. ; PARDO, L. ; STUHMER, W. ; DEL-BEL, E. A. ; Titze-de-Almeida, R. . Padronização do PCR em tempo real para quantificar os níveis de RNAm da enzima NO sintase neuronal em áreas cerebrais lesionadas com 6-OHDA e tratadas via intereferência de RNA.. 2010. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

Outras produções

Projetos de pesquisa

• 2023 - Atual

  Implantação do consórcio TCSREM Brasil para estudo multicêntrico em pacientes com Transtorno Comportamental do Sono REM: pesquisa de novos biomarcadores e seguimento de coorte de pacientes brasileiros., Descrição: Chamada CNPq/MCTI N 10/2023 - UNIVERSAL. Projeto aprovado. A temática do atual projeto volta-se ao estudo do Transtorno Comportamental do Sono REM (TCSREM), doença caracterizada pela perda da atonia da musculatura esquelética durante o sono REM associado a comportamentos de atuação durante os sonhos e/ou pesadelos. A proposta visa integrar grupos de pesquisas de área básica, com grupos de pesquisa de área clínica, em diferentes centros no país. Esta ação permitirá buscar biomarcadores para o desenvolvimento de sinucleionopatias (doença de Parkinson, Atrofia de Múltiplos Sistemas e Demência por Corpos de Lewy), bem como verificar o desenvovimento destas patologias em uma amostra de pacientes brasileiros com TCSREM isolado. MicroRNAs (miRNAs) são RNAs pequenos e em dupla fita, que controlam a expressão de RNAs mensageiros. A patogênese do TCSREM e da doença de Parkinson inclui a expressão aberrante de microRNAs (miRNAs). Além disso, trabalhos recentes revelam que RNAs circulares (circRNAs) também podem servir como biomarcadores de DP e TCSREM. Destaca-se o ineditismo da atual proposta, visto que nenhum trabalho anterior propôs o uso conjunto de microRNAs e circRNAs em uma assinatura de biomarcadores dessas doenças. O objetivo principal do presente estudo é implantar uma rede de cooperação acadêmica entre diferentes instituições do Brasil, para estudos translacionais e clínicos, associados ao TCSREM e o seu risco de desenvolvimento de doenças neurodegerativas. Para isso, serão recrutados pacientes com TCSREM isolado, TCSREM associado a doenças neurodegenerativas e controles em 8 centros participantes distribuídos nas 5 regiões do país. Será realizada avaliação clínica, com coletas de escalas e realização de polissonografia, quando o paciente não tiver ainda realizado. Serão coletadas amostras de sangue periférico e enviadas para à Universidade de Brasília, onde serão realizadas as análises de microRNAs e circRNAs. Dessa forma, o presente projeto visa integrar grupos de áreas clínicas e básica, além de realizar a consolidação de rede de pesquisa nacional, com a avaliação inovadora de biomarcadores neste grupo de pacientes, além de realizar seguimento inédito do TCSREM isolado em pacientes na América Latina.. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Doutorado: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Manoel Alves Sobreira Neto - Coordenador., Financiador(es): Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - Auxílio financeiro.

• 2022 - Atual

  Suplementação de miR-7 como terapia neuroprotetora no parkinsonismo experimental induzido por fibrilas pré-formadas de sinucleína (PFF)., Descrição: Aprovado no EDITAL 09/2022 DEMANDA ESPONTÂNEA. R$ 90.000,00. O atual projeto visa avaliar se a suplementação do microRNA miR-7 tem potencial para terapia gênica experimental do Parkinson. A reposição de miR-7 poderá prevenir duas alterações neuropatológicas clássicas desta doença crônico-degenerativa, a perda progressiva de células dopaminérgicas nigroestriatais e o acúmulo intracelular de sinucleína em neurônios apoptóticos. O tratamento convencional do Parkinson é tão somente sintomático - baseado na reposição de dopamina, e cujo uso crônico acarreta efeitos colaterais sobre o sistema motor denominados de discinesias. A obtenção de novas estratégias terapêuticas é prioritária. Neste sentido, medicamentos baseados em interferência de RNA "RNAi-based drugs" compõem uma nova classe farmacológica com vários produtos já aprovados para uso clínico. Incluem-se os microRNAs, RNAs interferentes que regulam o conteúdo de RNAs mensageiros (RNAm) envolvidos na fisiopatologia de várias doenças. Certos miRNAs são expressos de maneira aberrante no Parkinson, destacando-se miR-7 que está com expressão diminuída nessa doença e seria alvo terapêutico potencial para suplementação. O presente estudo irá avaliar a eficácia de adenovírus que expressam miR-7 (AAV-miR-7) para controlar a neurodegeneração dopaminérgica e acúmulo de sinucleína no estriado de camundongos submetidos ao modelo das fibrilas pré-formadas de sinucleína (PFF). Os adenovírus AAV-miR-7 e controle serão injetados no estriado dorsal ou no ventrículo lateral. Serão avaliados os potenciais efeitos neuroprotetores sobre neurônios dopaminérgicos nigroestriatais, a redução do acúmulo de sinucleína e a possível melhora de sinais motores do parkinsionismo. Os resultados deste estudo ajudarão a elucidar o papel de miR-7 na patogênese do Parkinson bem como testarão o potencial biotecnológico dessa terapia gênica inovadora.. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) / Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro.

• 2022 - Atual

  COVID longa - sequelas neurológicas e biomarcadores, Descrição: Análise de consequências neuropsiquiátricas em indivíduos que desenvolveram COVID longa e respectivos biomarcadores de dano neuronal, incluindo neurofilamento de cadeia leve neuronal (NfL).. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Simoneide Silva Titze de Almeida - Integrante / Pedro Renato de Paula Brandão - Integrante / Adriana Pinheiro Ribeiro - Integrante / DELGADO RODRIGUES, RAIMUNDO NONATO - Integrante / Andrezza Paula Brito Silva - Integrante / SHIMIZU, HELENA ERI - Integrante.

• 2022 - Atual

  PROBE-PD: Estudo Epidemiológico sobre Doença de Parkinson estabelecida e prodrômica no Brasil, Descrição: Os objetivos do estudo são determinar a prevalência da doença de Parkinson e outras síndromes parkinsonianas em amostras de base populacional de idosos em quatro diferentes municípios do Brasil, com diferentes características socio-demográficas. Serão determinadas a prevalência geral e a ajustada para sexo e grupos etários. Sintomas pré-motores da doença de Parkinson, como o distúrbio comportamental do sono REM, constipação, hiposmia, alterações sutis de voz, depressão, também serão estudadas nessa população com mais de 60 anos.. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (2) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Simoneide Souza Titze de Almeida - Integrante / Pedro Renato de Paula Brandao - Coordenador.

• 2020 - Atual

  Ações emergenciais para combate à COVID-19 e mitigação das consequências da epidemia. TED/MEC n. 9249., Descrição: Projeto visando o "Fortalecimento da infraestrutura laboratorial para testagem de Covid-19 e pesquisa científica", valor R$ 2.456.968,72. Foram adquiridos insumos e equipamentos que refinam a pesquisa científica quanto a consequências neurológicas de COVID-19, avaliando-se fenótipos clínicos e biomarcadores moleculares.. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (15) / Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador., Financiador(es): Ministério da Educação - Auxílio financeiro.

• 2020 - Atual

  Contact tracing ? rastreamento de contatos para COVID-19., Descrição: Introdução: COVID-19 é uma doença infecciosa causada pelo SARS-CoV-2, RNA vírus com genoma de 30 kb. Este coronavírus se dissemina principalmente do indivíduo infectado para o indivíduo contactante mediante gotículas geradas pela tosse, espirro, ou fala. Várias medidas de contenção têm sido impostas, incluindo o distanciamento social, higienização das mãos, vestimentas e utensílios gerais, uso de equipamentos de proteção individual. Tais medidas têm sido importantes, porém insuficientes para conter a epidemia de COVID-19 que se encontra em expansão a nível mundial. Como complemento devem ser adotadas estratégias mais específicas que evitem a disseminação do SARS-CoV-2 a partir dos indivíduos positivos, ou seja, quebrar a cadeia de transmissão da doença atuando na origem do problema. Significa isolamento de indivíduos positivos, para interromper a transmissão do vírus deste indivíduo positivo para indivíduos sadios. Caso determinado indivíduo sadio tenha tido contato com indivíduo positivo para SARS-CoV-2, sendo assim denominado ?contactante?, este deverá ficar em quarentena por 14 dias. O isolamento de indivíduos positivos aliado à quarentena de contactantes reduz de maneira significativa a disseminação de SARS-CoV-2, conforme estudos na China e Coréia do Sul. Objetivo: Implantar a metodologia de contact tracing - rastreamento de contatos para indivíduos com sintomatologia de COVID-19 atendidos nas UPAS e Hospitais públicos do Distrito Federal. Método: a metodologia de contact tracing seguirá a recomendação do Instituto Johns Hopkins, conforme descrita no curso ?COVID-19 Contact Tracing, de autoria de Emily Gurley. Em síntese, o ponto de partida será o indivíduo com sintomas de COVID-19 e confirmação por RT-PCR nas Unidades de Pronto-atendimento do DF (UPAS) e Hospitais públicos do Distrito Federal. Este caso positivo deverá ficar isolado por 14 dias e irá informar à equipe de pesquisa sobre os seus contactantes, que podem já estar infectados e ainda na fase assintomática. O isolamento dos casos positivos somado à quarentena dos contatos irá interromper o fluxo de transmissão viral. Os casos positivos e os contatos receberão orientação sobre como proceder ao isolamento social, e serão monitorados por contato telefônico quanto à evolução da sintomatologia, o que pode exigir atenção médica hospitalar. Os dados obtidos serão cadastrados no software Go.Data da OMS, permitindo um acompanhamento de cada indivíduo do estudo para fins epidemiológicos e ações de controle da disseminação. Palavras chave: contact tracing, coronavírus e epidemias.. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (1) / Doutorado: (5) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Simoneide Silva Titze de Almeida - Integrante / Franciele Schlemmer - Integrante / Gabriel Ginani Ferreira - Integrante / Cínthia Ribeiro - Integrante / Mary-Ann Elvina Xavier - Integrante / Adriana Pinheiro Ribeiro - Integrante.

Projetos de desenvolvimento

• 2011 - 2015

  Desenvolvimento tecnológico de vetores reguláveis para expressão de hairpins de RNA direcionados às variantes de splicing nNOS-alfa, nNOS-beta e nNOS-gama, visando a terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto visa elucidar o papel de variantes de splicing da enzima nNOS (nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama) na proliferação tumoral do glioma. Apresenta duas metas principais, sendo a primeira o desenvolvimento e teste de seqüências de RNA em dupla fita para RNAi sobre cada variante de splicing de nNOS de gliomas humanos e de rato em cultura, avaliando assim os níveis de expressão da enzima nNOS e a atividade proliferativa celular. A segunda meta é desenvolver e testar vetores de expressão de hairpins de RNAi, para alvos que apresentem atividade antiproliferativa. Pretende-se, desta forma, gerar novos conhecimentos sobre o papel da NO sintase e seus variantes de splicing no desenvolvimento tumoral do glioma e, paralelamente, desenvolver vetores de expressão com potencial uso em plataformas tecnológicas de expressão de RNAi para terapêutica do câncer.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (3) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2011 - Atual

  Interferência de RNA sobre a enzima NO sintase neuronal (nNOS) para terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto situa-se na área prioritária de doenças crônico-degenerativas e visa desenvolver uma terapia gênica para o glioma, baseada em interferência de RNA sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. O câncer uma doença responsável por 7,1 milhões de mortes anuais, o que corresponde a 12,6% do total de óbitos. Os tumores cerebrais malignos, por sua vez, apresentam altas taxas de morbidade e mortalidade - em particular os gliomas malignos em adultos e os meduloblastomas em crianças, havendo tempos de sobrevida muito baixos (ex. 15 meses) para as formas mais agressivas como o glioblastoma. Estudos anteriores mostram correlação entre a expressão da enzima nNOS e o desenvolvimento tumoral e, neste sentido, o uso de inibidores desta mesma enzima pode reduzir o crescimento de alguns tipos de tumores. Desta forma, o silenciamento gênico da enzima nNOS via RNAi poderá reduzir o desenvolvimento tumoral, gerando uma terapia gênica efetiva para o glioma.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2009 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados estudo comparativo da farmacocinética e toxicologia do antifúngico Anfotericina B estruturado em nanocápsulas de PLGA-DMSA (Nanoanf, patente PI 0700446-0, 2007) e em lipossomas (Ambisome )., Descrição: A atual proposta é uma pesquisa tecnológica e de inovação, com componente científico, representando a continuidade do projeto Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados farmacocinética da anfotericina B com ácido dimercaptosuccínico nanoencapsulada em polímero de ácido polilático-poliglicólico (AMB-PLGA) , aprovado no edital MCT/CNPq 15/2007 - Universal - Faixa A - Até R$ 20.000,00. O projeto está em andamento, tendo concluído as etapas de validação do método de HPLC e da padronização da extração da anfotericina B da nanopartícula e dos tecidos; estudos de farmacocinética estão planejados para outubro de 2008. No entanto, a caracterização desta preparação de anfotericina B (NanoAnf) patenteada por nosso grupo (PI 220708667. 2007) exige estudos complementares que mostrem as reais vantagens de farmacocinética (ex. maior intervalo posológico, aumento da concentração pulmonar do fármaco) e de segurança (redução da nefrotoxicidade), em relação a um produto comercial disponível (ex. anfotericina lipossomal, Ambisome ). Assim, o atual projeto objetiva gerar dados complementares sobre farmacocinética e toxicidade da NanoAnf em comparação com dois medicamentos comerciais, anfotericina B e aquele estruturado em lipossomas (Ambisome ). Serão determinados, comparativamente para os três medicamentos, os parâmetros de biodisponibilidade Cmax, Tmax e AUC, bem como a meia-vida, o volume de distribuição, o clearence, e as taxas de excreção urinária e fecal. Será também definida a dose máxima tolerada, mediante administração de doses progressivas dos fármacos, visando determinar a maior dose de NanoAnf que não cause alterações renais, hepáticas ou mortalidade. Quanto aos produtos gerados, a execução do atual projeto permitirá o depósito de uma nova patente contendo os resultados do presente estudo, somados a resultados de outro projeto voltado ao scaling up para produção em escala industrial. Serão publicados dois artigos científicos, um com foco nas met. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2008 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de nanopartículas de PLGA-DMSA carreadoras de anfotericina B: caracterização das partículas (físico-química, morfologia, biodistribuição, farmacocinética) e análise de parâmetros de scaling up para produção em escala industrial, Descrição: O atual projeto objetiva realizar a caracterização físico-química e morfológica de nanopartículas de poli ácido (lático-co-glicólico), PLGA, com ácido dimercaptosuccínico - DMSA, carreadoras de anfotericina B. Serão também investigados parâmetros de farmacocinética, biodistribuição e condições de scaling up para produção em escala industrial. O desenvolvimento de formulações de medicamentos estruturadas em nanopartículas é uma área de inovação tecnológica muito promissora, tendo recebido investimentos da indústria farmacêutica e citações de prioridade em políticas de ciência e tecnologia, como a PITCE. Estas novas formulações permitiriam vários avanços terapêuticos, incluindo liberação controlada, redução de toxicidade e vetorização para órgãos de interesse. Este conjunto de vantagens é particularmente importante para medicamentos eficazes, mas que apresentam toxicidade elevada, como é o caso do antifúngico anfotericina B. Assim, foram desenvolvidas preparações comerciais baseadas em lipossomas ou lipídeos, por exemplo, mas que apresentam limitações farmacocinéticas e são de custo elevado. Neste sentido, nosso grupo de pesquisa desenvolveu uma nova formulação de anfotericina B estruturada em polímero de PLGA, contendo DMSA para vetorização ao pulmão. O sistema mostrou eficácia terapêutica em modelo de micose sistêmica, sem efeitos colaterais importantes, e com melhor intervalo posológico, resultando no depósito de uma patente e na preparação de um artigo científico. O atual projeto pretende melhor caracterizar esta preparação, realizando testes físico-químicos, ensaios de farmacocinética e de biodistribuição, visando a futura transferência de tecnologia para o setor produtivo. Assim, serão também realizados experimentos de scaling up para definição de parâmetros visando a produção em escala industrial. O projeto apresenta alto grau de alinhamento com as políticas de ciência e tecnologia do País, sendo encaminhado por equipe qualificada, com infra-estrutura laborato. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Maria Sueli Soares Felipe - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1

• 2008 - Atual

  Nanotecnologia aplicada à terapia gênica via RNAi no Parkinson experimental, Descrição: O atual projeto situa-se no campo da terapia gênica do Parkinson experimental, com foco na interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. Estudos anteriores mostram que esta enzima tem papel nos eventos celulares que levam à morte neuronal e, conseqüentemente, à neurodegeneração. O óxido nítrico é molécula gasosa produzida como radical livre no processo de conversão da L-arginina em citrulina, pela enzima nNOS. A nNOS apresenta 4 variantes de splicing funcionais: nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama e nNOS-mu, que serviram de base para desenho de estruturas genéticas de RNAi. No sentido biotecnológico, e de acordo com o objetivo do atual projeto, pode-se observar uma crescente demanda de mercado por novos produtos farmacêuticos baseados em terapia gênica. Neste mesmo ramo da terapia gênica, torna-se altamente promissora a metodologia da interferência de RNA (RNAi), recentemente descrita para silenciamento de genes específicos, e que tem revolucionado trabalhos científicos e de desenvolvimento tecnológico. Com base no acima exposto, o atual projeto tem como objetivo o desenho e teste de estruturas genéticas para interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima nNOS, visando a terapia gênica do Parkinson experimental. Desta forma, visa atender às seguintes demandas biotecnológicas: 1. Sistemas de expressão gênica eficazes para terapia do Parkinson experimental, com foco em interferência de RNA. 2. Sistemas de liberação de material genético baseados em lipossomas funcionalizados ou em nanocápsulas poliméricas (PLGA), ambos capazes de ultrapassar a barreira hematoencefálica e liberar DNA plasmidial em áreas cerebrais afetadas pelo Parkinson. . , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 3

• 2011 - 2015

  Desenvolvimento tecnológico de vetores reguláveis para expressão de hairpins de RNA direcionados às variantes de splicing nNOS-alfa, nNOS-beta e nNOS-gama, visando a terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto visa elucidar o papel de variantes de splicing da enzima nNOS (nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama) na proliferação tumoral do glioma. Apresenta duas metas principais, sendo a primeira o desenvolvimento e teste de seqüências de RNA em dupla fita para RNAi sobre cada variante de splicing de nNOS de gliomas humanos e de rato em cultura, avaliando assim os níveis de expressão da enzima nNOS e a atividade proliferativa celular. A segunda meta é desenvolver e testar vetores de expressão de hairpins de RNAi, para alvos que apresentem atividade antiproliferativa. Pretende-se, desta forma, gerar novos conhecimentos sobre o papel da NO sintase e seus variantes de splicing no desenvolvimento tumoral do glioma e, paralelamente, desenvolver vetores de expressão com potencial uso em plataformas tecnológicas de expressão de RNAi para terapêutica do câncer.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (3) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2011 - Atual

  Interferência de RNA sobre a enzima NO sintase neuronal (nNOS) para terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto situa-se na área prioritária de doenças crônico-degenerativas e visa desenvolver uma terapia gênica para o glioma, baseada em interferência de RNA sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. O câncer uma doença responsável por 7,1 milhões de mortes anuais, o que corresponde a 12,6% do total de óbitos. Os tumores cerebrais malignos, por sua vez, apresentam altas taxas de morbidade e mortalidade - em particular os gliomas malignos em adultos e os meduloblastomas em crianças, havendo tempos de sobrevida muito baixos (ex. 15 meses) para as formas mais agressivas como o glioblastoma. Estudos anteriores mostram correlação entre a expressão da enzima nNOS e o desenvolvimento tumoral e, neste sentido, o uso de inibidores desta mesma enzima pode reduzir o crescimento de alguns tipos de tumores. Desta forma, o silenciamento gênico da enzima nNOS via RNAi poderá reduzir o desenvolvimento tumoral, gerando uma terapia gênica efetiva para o glioma.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2009 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados estudo comparativo da farmacocinética e toxicologia do antifúngico Anfotericina B estruturado em nanocápsulas de PLGA-DMSA (Nanoanf, patente PI 0700446-0, 2007) e em lipossomas (Ambisome )., Descrição: A atual proposta é uma pesquisa tecnológica e de inovação, com componente científico, representando a continuidade do projeto Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados farmacocinética da anfotericina B com ácido dimercaptosuccínico nanoencapsulada em polímero de ácido polilático-poliglicólico (AMB-PLGA) , aprovado no edital MCT/CNPq 15/2007 - Universal - Faixa A - Até R$ 20.000,00. O projeto está em andamento, tendo concluído as etapas de validação do método de HPLC e da padronização da extração da anfotericina B da nanopartícula e dos tecidos; estudos de farmacocinética estão planejados para outubro de 2008. No entanto, a caracterização desta preparação de anfotericina B (NanoAnf) patenteada por nosso grupo (PI 220708667. 2007) exige estudos complementares que mostrem as reais vantagens de farmacocinética (ex. maior intervalo posológico, aumento da concentração pulmonar do fármaco) e de segurança (redução da nefrotoxicidade), em relação a um produto comercial disponível (ex. anfotericina lipossomal, Ambisome ). Assim, o atual projeto objetiva gerar dados complementares sobre farmacocinética e toxicidade da NanoAnf em comparação com dois medicamentos comerciais, anfotericina B e aquele estruturado em lipossomas (Ambisome ). Serão determinados, comparativamente para os três medicamentos, os parâmetros de biodisponibilidade Cmax, Tmax e AUC, bem como a meia-vida, o volume de distribuição, o clearence, e as taxas de excreção urinária e fecal. Será também definida a dose máxima tolerada, mediante administração de doses progressivas dos fármacos, visando determinar a maior dose de NanoAnf que não cause alterações renais, hepáticas ou mortalidade. Quanto aos produtos gerados, a execução do atual projeto permitirá o depósito de uma nova patente contendo os resultados do presente estudo, somados a resultados de outro projeto voltado ao scaling up para produção em escala industrial. Serão publicados dois artigos científicos, um com foco nas met. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2008 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de nanopartículas de PLGA-DMSA carreadoras de anfotericina B: caracterização das partículas (físico-química, morfologia, biodistribuição, farmacocinética) e análise de parâmetros de scaling up para produção em escala industrial, Descrição: O atual projeto objetiva realizar a caracterização físico-química e morfológica de nanopartículas de poli ácido (lático-co-glicólico), PLGA, com ácido dimercaptosuccínico - DMSA, carreadoras de anfotericina B. Serão também investigados parâmetros de farmacocinética, biodistribuição e condições de scaling up para produção em escala industrial. O desenvolvimento de formulações de medicamentos estruturadas em nanopartículas é uma área de inovação tecnológica muito promissora, tendo recebido investimentos da indústria farmacêutica e citações de prioridade em políticas de ciência e tecnologia, como a PITCE. Estas novas formulações permitiriam vários avanços terapêuticos, incluindo liberação controlada, redução de toxicidade e vetorização para órgãos de interesse. Este conjunto de vantagens é particularmente importante para medicamentos eficazes, mas que apresentam toxicidade elevada, como é o caso do antifúngico anfotericina B. Assim, foram desenvolvidas preparações comerciais baseadas em lipossomas ou lipídeos, por exemplo, mas que apresentam limitações farmacocinéticas e são de custo elevado. Neste sentido, nosso grupo de pesquisa desenvolveu uma nova formulação de anfotericina B estruturada em polímero de PLGA, contendo DMSA para vetorização ao pulmão. O sistema mostrou eficácia terapêutica em modelo de micose sistêmica, sem efeitos colaterais importantes, e com melhor intervalo posológico, resultando no depósito de uma patente e na preparação de um artigo científico. O atual projeto pretende melhor caracterizar esta preparação, realizando testes físico-químicos, ensaios de farmacocinética e de biodistribuição, visando a futura transferência de tecnologia para o setor produtivo. Assim, serão também realizados experimentos de scaling up para definição de parâmetros visando a produção em escala industrial. O projeto apresenta alto grau de alinhamento com as políticas de ciência e tecnologia do País, sendo encaminhado por equipe qualificada, com infra-estrutura laborato. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Maria Sueli Soares Felipe - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1

• 2008 - Atual

  Nanotecnologia aplicada à terapia gênica via RNAi no Parkinson experimental, Descrição: O atual projeto situa-se no campo da terapia gênica do Parkinson experimental, com foco na interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. Estudos anteriores mostram que esta enzima tem papel nos eventos celulares que levam à morte neuronal e, conseqüentemente, à neurodegeneração. O óxido nítrico é molécula gasosa produzida como radical livre no processo de conversão da L-arginina em citrulina, pela enzima nNOS. A nNOS apresenta 4 variantes de splicing funcionais: nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama e nNOS-mu, que serviram de base para desenho de estruturas genéticas de RNAi. No sentido biotecnológico, e de acordo com o objetivo do atual projeto, pode-se observar uma crescente demanda de mercado por novos produtos farmacêuticos baseados em terapia gênica. Neste mesmo ramo da terapia gênica, torna-se altamente promissora a metodologia da interferência de RNA (RNAi), recentemente descrita para silenciamento de genes específicos, e que tem revolucionado trabalhos científicos e de desenvolvimento tecnológico. Com base no acima exposto, o atual projeto tem como objetivo o desenho e teste de estruturas genéticas para interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima nNOS, visando a terapia gênica do Parkinson experimental. Desta forma, visa atender às seguintes demandas biotecnológicas: 1. Sistemas de expressão gênica eficazes para terapia do Parkinson experimental, com foco em interferência de RNA. 2. Sistemas de liberação de material genético baseados em lipossomas funcionalizados ou em nanocápsulas poliméricas (PLGA), ambos capazes de ultrapassar a barreira hematoencefálica e liberar DNA plasmidial em áreas cerebrais afetadas pelo Parkinson. . , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 3

• 2011 - 2015

  Desenvolvimento tecnológico de vetores reguláveis para expressão de hairpins de RNA direcionados às variantes de splicing nNOS-alfa, nNOS-beta e nNOS-gama, visando a terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto visa elucidar o papel de variantes de splicing da enzima nNOS (nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama) na proliferação tumoral do glioma. Apresenta duas metas principais, sendo a primeira o desenvolvimento e teste de seqüências de RNA em dupla fita para RNAi sobre cada variante de splicing de nNOS de gliomas humanos e de rato em cultura, avaliando assim os níveis de expressão da enzima nNOS e a atividade proliferativa celular. A segunda meta é desenvolver e testar vetores de expressão de hairpins de RNAi, para alvos que apresentem atividade antiproliferativa. Pretende-se, desta forma, gerar novos conhecimentos sobre o papel da NO sintase e seus variantes de splicing no desenvolvimento tumoral do glioma e, paralelamente, desenvolver vetores de expressão com potencial uso em plataformas tecnológicas de expressão de RNAi para terapêutica do câncer.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (3) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2011 - Atual

  Interferência de RNA sobre a enzima NO sintase neuronal (nNOS) para terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto situa-se na área prioritária de doenças crônico-degenerativas e visa desenvolver uma terapia gênica para o glioma, baseada em interferência de RNA sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. O câncer uma doença responsável por 7,1 milhões de mortes anuais, o que corresponde a 12,6% do total de óbitos. Os tumores cerebrais malignos, por sua vez, apresentam altas taxas de morbidade e mortalidade - em particular os gliomas malignos em adultos e os meduloblastomas em crianças, havendo tempos de sobrevida muito baixos (ex. 15 meses) para as formas mais agressivas como o glioblastoma. Estudos anteriores mostram correlação entre a expressão da enzima nNOS e o desenvolvimento tumoral e, neste sentido, o uso de inibidores desta mesma enzima pode reduzir o crescimento de alguns tipos de tumores. Desta forma, o silenciamento gênico da enzima nNOS via RNAi poderá reduzir o desenvolvimento tumoral, gerando uma terapia gênica efetiva para o glioma.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2009 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados estudo comparativo da farmacocinética e toxicologia do antifúngico Anfotericina B estruturado em nanocápsulas de PLGA-DMSA (Nanoanf, patente PI 0700446-0, 2007) e em lipossomas (Ambisome )., Descrição: A atual proposta é uma pesquisa tecnológica e de inovação, com componente científico, representando a continuidade do projeto Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados farmacocinética da anfotericina B com ácido dimercaptosuccínico nanoencapsulada em polímero de ácido polilático-poliglicólico (AMB-PLGA) , aprovado no edital MCT/CNPq 15/2007 - Universal - Faixa A - Até R$ 20.000,00. O projeto está em andamento, tendo concluído as etapas de validação do método de HPLC e da padronização da extração da anfotericina B da nanopartícula e dos tecidos; estudos de farmacocinética estão planejados para outubro de 2008. No entanto, a caracterização desta preparação de anfotericina B (NanoAnf) patenteada por nosso grupo (PI 220708667. 2007) exige estudos complementares que mostrem as reais vantagens de farmacocinética (ex. maior intervalo posológico, aumento da concentração pulmonar do fármaco) e de segurança (redução da nefrotoxicidade), em relação a um produto comercial disponível (ex. anfotericina lipossomal, Ambisome ). Assim, o atual projeto objetiva gerar dados complementares sobre farmacocinética e toxicidade da NanoAnf em comparação com dois medicamentos comerciais, anfotericina B e aquele estruturado em lipossomas (Ambisome ). Serão determinados, comparativamente para os três medicamentos, os parâmetros de biodisponibilidade Cmax, Tmax e AUC, bem como a meia-vida, o volume de distribuição, o clearence, e as taxas de excreção urinária e fecal. Será também definida a dose máxima tolerada, mediante administração de doses progressivas dos fármacos, visando determinar a maior dose de NanoAnf que não cause alterações renais, hepáticas ou mortalidade. Quanto aos produtos gerados, a execução do atual projeto permitirá o depósito de uma nova patente contendo os resultados do presente estudo, somados a resultados de outro projeto voltado ao scaling up para produção em escala industrial. Serão publicados dois artigos científicos, um com foco nas met. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2008 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de nanopartículas de PLGA-DMSA carreadoras de anfotericina B: caracterização das partículas (físico-química, morfologia, biodistribuição, farmacocinética) e análise de parâmetros de scaling up para produção em escala industrial, Descrição: O atual projeto objetiva realizar a caracterização físico-química e morfológica de nanopartículas de poli ácido (lático-co-glicólico), PLGA, com ácido dimercaptosuccínico - DMSA, carreadoras de anfotericina B. Serão também investigados parâmetros de farmacocinética, biodistribuição e condições de scaling up para produção em escala industrial. O desenvolvimento de formulações de medicamentos estruturadas em nanopartículas é uma área de inovação tecnológica muito promissora, tendo recebido investimentos da indústria farmacêutica e citações de prioridade em políticas de ciência e tecnologia, como a PITCE. Estas novas formulações permitiriam vários avanços terapêuticos, incluindo liberação controlada, redução de toxicidade e vetorização para órgãos de interesse. Este conjunto de vantagens é particularmente importante para medicamentos eficazes, mas que apresentam toxicidade elevada, como é o caso do antifúngico anfotericina B. Assim, foram desenvolvidas preparações comerciais baseadas em lipossomas ou lipídeos, por exemplo, mas que apresentam limitações farmacocinéticas e são de custo elevado. Neste sentido, nosso grupo de pesquisa desenvolveu uma nova formulação de anfotericina B estruturada em polímero de PLGA, contendo DMSA para vetorização ao pulmão. O sistema mostrou eficácia terapêutica em modelo de micose sistêmica, sem efeitos colaterais importantes, e com melhor intervalo posológico, resultando no depósito de uma patente e na preparação de um artigo científico. O atual projeto pretende melhor caracterizar esta preparação, realizando testes físico-químicos, ensaios de farmacocinética e de biodistribuição, visando a futura transferência de tecnologia para o setor produtivo. Assim, serão também realizados experimentos de scaling up para definição de parâmetros visando a produção em escala industrial. O projeto apresenta alto grau de alinhamento com as políticas de ciência e tecnologia do País, sendo encaminhado por equipe qualificada, com infra-estrutura laborato. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Maria Sueli Soares Felipe - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1

• 2008 - Atual

  Nanotecnologia aplicada à terapia gênica via RNAi no Parkinson experimental, Descrição: O atual projeto situa-se no campo da terapia gênica do Parkinson experimental, com foco na interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. Estudos anteriores mostram que esta enzima tem papel nos eventos celulares que levam à morte neuronal e, conseqüentemente, à neurodegeneração. O óxido nítrico é molécula gasosa produzida como radical livre no processo de conversão da L-arginina em citrulina, pela enzima nNOS. A nNOS apresenta 4 variantes de splicing funcionais: nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama e nNOS-mu, que serviram de base para desenho de estruturas genéticas de RNAi. No sentido biotecnológico, e de acordo com o objetivo do atual projeto, pode-se observar uma crescente demanda de mercado por novos produtos farmacêuticos baseados em terapia gênica. Neste mesmo ramo da terapia gênica, torna-se altamente promissora a metodologia da interferência de RNA (RNAi), recentemente descrita para silenciamento de genes específicos, e que tem revolucionado trabalhos científicos e de desenvolvimento tecnológico. Com base no acima exposto, o atual projeto tem como objetivo o desenho e teste de estruturas genéticas para interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima nNOS, visando a terapia gênica do Parkinson experimental. Desta forma, visa atender às seguintes demandas biotecnológicas: 1. Sistemas de expressão gênica eficazes para terapia do Parkinson experimental, com foco em interferência de RNA. 2. Sistemas de liberação de material genético baseados em lipossomas funcionalizados ou em nanocápsulas poliméricas (PLGA), ambos capazes de ultrapassar a barreira hematoencefálica e liberar DNA plasmidial em áreas cerebrais afetadas pelo Parkinson. . , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 3

• 2015 - Atual

  Implantação de Rede de Cooperação Acadêmica para estudo experimental e pré-clínico com foco na Doença de Parkinson, Descrição: Aprovado no EDITAL CNPq/MS/SCTIE/DECIT Nº 27/2014 - Pesquisas sobre Doenças Neurodegenerativas. Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é um distúrbio neurológico que culmina com prejuízos na atividade motora, impacto na qualidade de vida dos pacientes, desfecho crônico-degenerativo, prevalência na sociedade e, finalmente, apresenta sérias limitações de eficácia medicamentosa. Pesquisas concentradas na última década revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, em particular na degeneração nervosa. Em busca de elucidar a participação de microRNAs no Parkinson, bem como investigar o papel de neurotransmissões não-dopaminérgicas nos gânglios da base do encéfalo, uma equipe proponente (Pós-graduação em Fisiologia, FMRP, USP) e duas equipes associadas (PPG em Ciências da Saúde, UnB, e PPG em Saúde e Desenvolvimento na Região Centro-Oeste, UFMS), com competências complementares, histórico de parceria e experiência comprovada na área temática, reuniram-se para propor o atual projeto de pesquisa. A equipe proponente será responsável pelo planejamento geral das atividades e articulação entre os grupos de pesquisa, contribuindo também com o modelo de discinesia por L-DOPA no modelo da 6-OHDA, para os ensaios de interferência de RNA. A equipe associada da UnB irá realizar estudos em modelos animais e em pacientes hospitalares sobre a expressão e o papel de microRNAs na Doença de Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador.

• 2015 - Atual

  Terapia gênica do Parkinson experimental via inibidores de miR-34a e miR-134 nanoestruturados em magnetolipossomas., Descrição: Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é uma enfermidade crônico-degenerativa do sistema nervoso, que culmina com prejuízos na atividade motora e impacto na qualidade de vida dos pacientes; trata-se da segunda doença neurodegenerativa mais prevalente e que apresenta sérias limitações quanto à eficácia medicamentosa (Baumann, 2012). Pesquisas concentradas nas últimas décadas revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, incluindo aquelas neurológicas. Neste sentido, alterações na expressão de microRNAs têm sido descritas na doença de Parkinson (Mouradian, 2012; Miñones-Moyano, 2011; Harraz, 2011). Estudos mostram, ainda, que a degeneração de neurônios dopaminérgicos no Parkinson esporádico ocorre particularmente em células que apresentam os denominados corpos de Lewy, que são agregados de proteínas, em particular alfa-sinucleína e ubiquitina (Dauer & Przedborski, 2003). Dentre os vários modelos animais válidos para estudo desta doença, apenas o que utiliza a rotenona resulta na formação deste achado neuropatológico clássico do Parkinson (Uversky, 2004; Bove, 2005). Retomando a temática dos microRNAs, nosso grupo já verificou que a inibição específica de miR-34a, via oligonucleotídeos sintéticos antisense, causa efeito neuroprotetor em células dopaminérgicas SH-SY5Y lesadas pela rotenona. A inibição deste mesmo microRNA também causou neuroproteção nos modelos de epilepsia por ácido caínico e lítio-pilocarpina (Hu et al., 2012; Sano et al., 2012). Estudo anterior também mostrou efeito neuroprotetor mediante a inibição de um outro microRNA, miR-134, em modelo de epilepsia (Jimenez-Mateos et al., 2012). Até onde nosso conhecimento alcança, antagomirs para miR-34a e para miR-134 ainda não foram testados em modelos animais de Parkinson. Com base no exposto, o presente estudo visa avaliar a eficácia da injeção intracerebral e endovenosa de inibidores de miR-34a e miR-134 no controle da neurodegeneração dopaminérgica causada pela rotenona no estriado, hipocampo e córtex préfrontal de ratos. Os resultados deste estudo servirão para elucidar o potencial biotecnológico de antagomirs sintéticos na terapêutica do Parkinson. O atual projeto contribuirá, também, para avaliar se o uso de campos magnéticos próximos às regiões cerebrais de interesse é estratégia eficaz para vetorização de magnetolipossomas carreadores dos antagomirs sintéticos.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante.

• 2011 - 2015

  Desenvolvimento tecnológico de vetores reguláveis para expressão de hairpins de RNA direcionados às variantes de splicing nNOS-alfa, nNOS-beta e nNOS-gama, visando a terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto visa elucidar o papel de variantes de splicing da enzima nNOS (nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama) na proliferação tumoral do glioma. Apresenta duas metas principais, sendo a primeira o desenvolvimento e teste de seqüências de RNA em dupla fita para RNAi sobre cada variante de splicing de nNOS de gliomas humanos e de rato em cultura, avaliando assim os níveis de expressão da enzima nNOS e a atividade proliferativa celular. A segunda meta é desenvolver e testar vetores de expressão de hairpins de RNAi, para alvos que apresentem atividade antiproliferativa. Pretende-se, desta forma, gerar novos conhecimentos sobre o papel da NO sintase e seus variantes de splicing no desenvolvimento tumoral do glioma e, paralelamente, desenvolver vetores de expressão com potencial uso em plataformas tecnológicas de expressão de RNAi para terapêutica do câncer.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (3) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2011 - Atual

  Interferência de RNA sobre a enzima NO sintase neuronal (nNOS) para terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto situa-se na área prioritária de doenças crônico-degenerativas e visa desenvolver uma terapia gênica para o glioma, baseada em interferência de RNA sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. O câncer uma doença responsável por 7,1 milhões de mortes anuais, o que corresponde a 12,6% do total de óbitos. Os tumores cerebrais malignos, por sua vez, apresentam altas taxas de morbidade e mortalidade - em particular os gliomas malignos em adultos e os meduloblastomas em crianças, havendo tempos de sobrevida muito baixos (ex. 15 meses) para as formas mais agressivas como o glioblastoma. Estudos anteriores mostram correlação entre a expressão da enzima nNOS e o desenvolvimento tumoral e, neste sentido, o uso de inibidores desta mesma enzima pode reduzir o crescimento de alguns tipos de tumores. Desta forma, o silenciamento gênico da enzima nNOS via RNAi poderá reduzir o desenvolvimento tumoral, gerando uma terapia gênica efetiva para o glioma.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2009 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? estudo comparativo da farmacocinética e toxicologia do antifúngico Anfotericina B estruturado em nanocápsulas de PLGA-DMSA (Nanoanf, patente PI 0700446-0, 2007) e em lipossomas (Ambisome®)., Descrição: A atual proposta é uma pesquisa tecnológica e de inovação, com componente científico, representando a continuidade do projeto ?Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? farmacocinética da anfotericina B com ácido dimercaptosuccínico nanoencapsulada em polímero de ácido polilático-poliglicólico (AMB-PLGA)?, aprovado no edital MCT/CNPq 15/2007 - Universal - Faixa A - Até R$ 20.000,00. O projeto está em andamento, tendo concluído as etapas de validação do método de HPLC e da padronização da extração da anfotericina B da nanopartícula e dos tecidos; estudos de farmacocinética estão planejados para outubro de 2008. No entanto, a caracterização desta preparação de anfotericina B (NanoAnf) patenteada por nosso grupo (PI 220708667. 2007) exige estudos complementares que mostrem as reais vantagens de farmacocinética (ex. maior intervalo posológico, aumento da concentração pulmonar do fármaco) e de segurança (redução da nefrotoxicidade), em relação a um produto comercial disponível (ex. anfotericina lipossomal, Ambisome®). Assim, o atual projeto objetiva gerar dados complementares sobre farmacocinética e toxicidade da NanoAnf em comparação com dois medicamentos comerciais, anfotericina B e aquele estruturado em lipossomas (Ambisome®). Serão determinados, comparativamente para os três medicamentos, os parâmetros de biodisponibilidade Cmax, Tmax e AUC, bem como a meia-vida, o volume de distribuição, o clearence, e as taxas de excreção urinária e fecal. Será também definida a dose máxima tolerada, mediante administração de doses progressivas dos fármacos, visando determinar a maior dose de NanoAnf que não cause alterações renais, hepáticas ou mortalidade. Quanto aos produtos gerados, a execução do atual projeto permitirá o depósito de uma nova patente contendo os resultados do presente estudo, somados a resultados de outro projeto voltado ao scaling up para produção em escala industrial. Serão publicados dois artigos científicos, um com foco nas met. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2008 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de nanopartículas de PLGA-DMSA carreadoras de anfotericina B: caracterização das partículas (físico-química, morfologia, biodistribuição, farmacocinética) e análise de parâmetros de scaling up para produção em escala industrial, Descrição: O atual projeto objetiva realizar a caracterização físico-química e morfológica de nanopartículas de poli ácido (lático-co-glicólico), PLGA, com ácido dimercaptosuccínico - DMSA, carreadoras de anfotericina B. Serão também investigados parâmetros de farmacocinética, biodistribuição e condições de scaling up para produção em escala industrial. O desenvolvimento de formulações de medicamentos estruturadas em nanopartículas é uma área de inovação tecnológica muito promissora, tendo recebido investimentos da indústria farmacêutica e citações de prioridade em políticas de ciência e tecnologia, como a PITCE. Estas novas formulações permitiriam vários avanços terapêuticos, incluindo liberação controlada, redução de toxicidade e vetorização para órgãos de interesse. Este conjunto de vantagens é particularmente importante para medicamentos eficazes, mas que apresentam toxicidade elevada, como é o caso do antifúngico anfotericina B. Assim, foram desenvolvidas preparações comerciais baseadas em lipossomas ou lipídeos, por exemplo, mas que apresentam limitações farmacocinéticas e são de custo elevado. Neste sentido, nosso grupo de pesquisa desenvolveu uma nova formulação de anfotericina B estruturada em polímero de PLGA, contendo DMSA para vetorização ao pulmão. O sistema mostrou eficácia terapêutica em modelo de micose sistêmica, sem efeitos colaterais importantes, e com melhor intervalo posológico, resultando no depósito de uma patente e na preparação de um artigo científico. O atual projeto pretende melhor caracterizar esta preparação, realizando testes físico-químicos, ensaios de farmacocinética e de biodistribuição, visando a futura transferência de tecnologia para o setor produtivo. Assim, serão também realizados experimentos de scaling up para definição de parâmetros visando a produção em escala industrial. O projeto apresenta alto grau de alinhamento com as políticas de ciência e tecnologia do País, sendo encaminhado por equipe qualificada, com infra-estrutura laborato. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Maria Sueli Soares Felipe - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1

• 2008 - Atual

  Nanotecnologia aplicada à terapia gênica via RNAi no Parkinson experimental, Descrição: O atual projeto situa-se no campo da terapia gênica do Parkinson experimental, com foco na interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. Estudos anteriores mostram que esta enzima tem papel nos eventos celulares que levam à morte neuronal e, conseqüentemente, à neurodegeneração. O óxido nítrico é molécula gasosa produzida como radical livre no processo de conversão da L-arginina em citrulina, pela enzima nNOS. A nNOS apresenta 4 variantes de splicing funcionais: nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama e nNOS-mu, que serviram de base para desenho de estruturas genéticas de RNAi. No sentido biotecnológico, e de acordo com o objetivo do atual projeto, pode-se observar uma crescente demanda de mercado por novos produtos farmacêuticos baseados em terapia gênica. Neste mesmo ramo da terapia gênica, torna-se altamente promissora a metodologia da interferência de RNA (RNAi), recentemente descrita para silenciamento de genes específicos, e que tem revolucionado trabalhos científicos e de desenvolvimento tecnológico. Com base no acima exposto, o atual projeto tem como objetivo o desenho e teste de estruturas genéticas para interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima nNOS, visando a terapia gênica do Parkinson experimental. Desta forma, visa atender às seguintes demandas biotecnológicas: 1. Sistemas de expressão gênica eficazes para terapia do Parkinson experimental, com foco em interferência de RNA. 2. Sistemas de liberação de material genético baseados em lipossomas funcionalizados ou em nanocápsulas poliméricas (PLGA), ambos capazes de ultrapassar a barreira hematoencefálica e liberar DNA plasmidial em áreas cerebrais afetadas pelo Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 3

• 2015 - Atual

  Implantação de Rede de Cooperação Acadêmica para estudo experimental e pré-clínico com foco na Doença de Parkinson, Descrição: Aprovado no EDITAL CNPq/MS/SCTIE/DECIT Nº 27/2014 - Pesquisas sobre Doenças Neurodegenerativas. Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é um distúrbio neurológico que culmina com prejuízos na atividade motora, impacto na qualidade de vida dos pacientes, desfecho crônico-degenerativo, prevalência na sociedade e, finalmente, apresenta sérias limitações de eficácia medicamentosa. Pesquisas concentradas na última década revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, em particular na degeneração nervosa. Em busca de elucidar a participação de microRNAs no Parkinson, bem como investigar o papel de neurotransmissões não-dopaminérgicas nos gânglios da base do encéfalo, uma equipe proponente (Pós-graduação em Fisiologia, FMRP, USP) e duas equipes associadas (PPG em Ciências da Saúde, UnB, e PPG em Saúde e Desenvolvimento na Região Centro-Oeste, UFMS), com competências complementares, histórico de parceria e experiência comprovada na área temática, reuniram-se para propor o atual projeto de pesquisa. A equipe proponente será responsável pelo planejamento geral das atividades e articulação entre os grupos de pesquisa, contribuindo também com o modelo de discinesia por L-DOPA no modelo da 6-OHDA, para os ensaios de interferência de RNA. A equipe associada da UnB irá realizar estudos em modelos animais e em pacientes hospitalares sobre a expressão e o papel de microRNAs na Doença de Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador.

• 2015 - Atual

  Terapia gênica do Parkinson experimental via inibidores de miR-34a e miR-134 nanoestruturados em magnetolipossomas., Descrição: Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é uma enfermidade crônico-degenerativa do sistema nervoso, que culmina com prejuízos na atividade motora e impacto na qualidade de vida dos pacientes; trata-se da segunda doença neurodegenerativa mais prevalente e que apresenta sérias limitações quanto à eficácia medicamentosa (Baumann, 2012). Pesquisas concentradas nas últimas décadas revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, incluindo aquelas neurológicas. Neste sentido, alterações na expressão de microRNAs têm sido descritas na doença de Parkinson (Mouradian, 2012; Miñones-Moyano, 2011; Harraz, 2011). Estudos mostram, ainda, que a degeneração de neurônios dopaminérgicos no Parkinson esporádico ocorre particularmente em células que apresentam os denominados corpos de Lewy, que são agregados de proteínas, em particular alfa-sinucleína e ubiquitina (Dauer & Przedborski, 2003). Dentre os vários modelos animais válidos para estudo desta doença, apenas o que utiliza a rotenona resulta na formação deste achado neuropatológico clássico do Parkinson (Uversky, 2004; Bove, 2005). Retomando a temática dos microRNAs, nosso grupo já verificou que a inibição específica de miR-34a, via oligonucleotídeos sintéticos antisense, causa efeito neuroprotetor em células dopaminérgicas SH-SY5Y lesadas pela rotenona. A inibição deste mesmo microRNA também causou neuroproteção nos modelos de epilepsia por ácido caínico e lítio-pilocarpina (Hu et al., 2012; Sano et al., 2012). Estudo anterior também mostrou efeito neuroprotetor mediante a inibição de um outro microRNA, miR-134, em modelo de epilepsia (Jimenez-Mateos et al., 2012). Até onde nosso conhecimento alcança, antagomirs para miR-34a e para miR-134 ainda não foram testados em modelos animais de Parkinson. Com base no exposto, o presente estudo visa avaliar a eficácia da injeção intracerebral e endovenosa de inibidores de miR-34a e miR-134 no controle da neurodegeneração dopaminérgica causada pela rotenona no estriado, hipocampo e córtex préfrontal de ratos. Os resultados deste estudo servirão para elucidar o potencial biotecnológico de antagomirs sintéticos na terapêutica do Parkinson. O atual projeto contribuirá, também, para avaliar se o uso de campos magnéticos próximos às regiões cerebrais de interesse é estratégia eficaz para vetorização de magnetolipossomas carreadores dos antagomirs sintéticos.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante.

• 2011 - 2015

  Desenvolvimento tecnológico de vetores reguláveis para expressão de hairpins de RNA direcionados às variantes de splicing nNOS-alfa, nNOS-beta e nNOS-gama, visando a terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto visa elucidar o papel de variantes de splicing da enzima nNOS (nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama) na proliferação tumoral do glioma. Apresenta duas metas principais, sendo a primeira o desenvolvimento e teste de seqüências de RNA em dupla fita para RNAi sobre cada variante de splicing de nNOS de gliomas humanos e de rato em cultura, avaliando assim os níveis de expressão da enzima nNOS e a atividade proliferativa celular. A segunda meta é desenvolver e testar vetores de expressão de hairpins de RNAi, para alvos que apresentem atividade antiproliferativa. Pretende-se, desta forma, gerar novos conhecimentos sobre o papel da NO sintase e seus variantes de splicing no desenvolvimento tumoral do glioma e, paralelamente, desenvolver vetores de expressão com potencial uso em plataformas tecnológicas de expressão de RNAi para terapêutica do câncer.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (3) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2011 - Atual

  Interferência de RNA sobre a enzima NO sintase neuronal (nNOS) para terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto situa-se na área prioritária de doenças crônico-degenerativas e visa desenvolver uma terapia gênica para o glioma, baseada em interferência de RNA sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. O câncer uma doença responsável por 7,1 milhões de mortes anuais, o que corresponde a 12,6% do total de óbitos. Os tumores cerebrais malignos, por sua vez, apresentam altas taxas de morbidade e mortalidade - em particular os gliomas malignos em adultos e os meduloblastomas em crianças, havendo tempos de sobrevida muito baixos (ex. 15 meses) para as formas mais agressivas como o glioblastoma. Estudos anteriores mostram correlação entre a expressão da enzima nNOS e o desenvolvimento tumoral e, neste sentido, o uso de inibidores desta mesma enzima pode reduzir o crescimento de alguns tipos de tumores. Desta forma, o silenciamento gênico da enzima nNOS via RNAi poderá reduzir o desenvolvimento tumoral, gerando uma terapia gênica efetiva para o glioma.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2009 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? estudo comparativo da farmacocinética e toxicologia do antifúngico Anfotericina B estruturado em nanocápsulas de PLGA-DMSA (Nanoanf, patente PI 0700446-0, 2007) e em lipossomas (Ambisome®)., Descrição: A atual proposta é uma pesquisa tecnológica e de inovação, com componente científico, representando a continuidade do projeto ?Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? farmacocinética da anfotericina B com ácido dimercaptosuccínico nanoencapsulada em polímero de ácido polilático-poliglicólico (AMB-PLGA)?, aprovado no edital MCT/CNPq 15/2007 - Universal - Faixa A - Até R$ 20.000,00. O projeto está em andamento, tendo concluído as etapas de validação do método de HPLC e da padronização da extração da anfotericina B da nanopartícula e dos tecidos; estudos de farmacocinética estão planejados para outubro de 2008. No entanto, a caracterização desta preparação de anfotericina B (NanoAnf) patenteada por nosso grupo (PI 220708667. 2007) exige estudos complementares que mostrem as reais vantagens de farmacocinética (ex. maior intervalo posológico, aumento da concentração pulmonar do fármaco) e de segurança (redução da nefrotoxicidade), em relação a um produto comercial disponível (ex. anfotericina lipossomal, Ambisome®). Assim, o atual projeto objetiva gerar dados complementares sobre farmacocinética e toxicidade da NanoAnf em comparação com dois medicamentos comerciais, anfotericina B e aquele estruturado em lipossomas (Ambisome®). Serão determinados, comparativamente para os três medicamentos, os parâmetros de biodisponibilidade Cmax, Tmax e AUC, bem como a meia-vida, o volume de distribuição, o clearence, e as taxas de excreção urinária e fecal. Será também definida a dose máxima tolerada, mediante administração de doses progressivas dos fármacos, visando determinar a maior dose de NanoAnf que não cause alterações renais, hepáticas ou mortalidade. Quanto aos produtos gerados, a execução do atual projeto permitirá o depósito de uma nova patente contendo os resultados do presente estudo, somados a resultados de outro projeto voltado ao scaling up para produção em escala industrial. Serão publicados dois artigos científicos, um com foco nas met. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2008 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de nanopartículas de PLGA-DMSA carreadoras de anfotericina B: caracterização das partículas (físico-química, morfologia, biodistribuição, farmacocinética) e análise de parâmetros de scaling up para produção em escala industrial, Descrição: O atual projeto objetiva realizar a caracterização físico-química e morfológica de nanopartículas de poli ácido (lático-co-glicólico), PLGA, com ácido dimercaptosuccínico - DMSA, carreadoras de anfotericina B. Serão também investigados parâmetros de farmacocinética, biodistribuição e condições de scaling up para produção em escala industrial. O desenvolvimento de formulações de medicamentos estruturadas em nanopartículas é uma área de inovação tecnológica muito promissora, tendo recebido investimentos da indústria farmacêutica e citações de prioridade em políticas de ciência e tecnologia, como a PITCE. Estas novas formulações permitiriam vários avanços terapêuticos, incluindo liberação controlada, redução de toxicidade e vetorização para órgãos de interesse. Este conjunto de vantagens é particularmente importante para medicamentos eficazes, mas que apresentam toxicidade elevada, como é o caso do antifúngico anfotericina B. Assim, foram desenvolvidas preparações comerciais baseadas em lipossomas ou lipídeos, por exemplo, mas que apresentam limitações farmacocinéticas e são de custo elevado. Neste sentido, nosso grupo de pesquisa desenvolveu uma nova formulação de anfotericina B estruturada em polímero de PLGA, contendo DMSA para vetorização ao pulmão. O sistema mostrou eficácia terapêutica em modelo de micose sistêmica, sem efeitos colaterais importantes, e com melhor intervalo posológico, resultando no depósito de uma patente e na preparação de um artigo científico. O atual projeto pretende melhor caracterizar esta preparação, realizando testes físico-químicos, ensaios de farmacocinética e de biodistribuição, visando a futura transferência de tecnologia para o setor produtivo. Assim, serão também realizados experimentos de scaling up para definição de parâmetros visando a produção em escala industrial. O projeto apresenta alto grau de alinhamento com as políticas de ciência e tecnologia do País, sendo encaminhado por equipe qualificada, com infra-estrutura laborato. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Maria Sueli Soares Felipe - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa., Número de produções C, T & A: 1

• 2008 - Atual

  Nanotecnologia aplicada à terapia gênica via RNAi no Parkinson experimental, Descrição: O atual projeto situa-se no campo da terapia gênica do Parkinson experimental, com foco na interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. Estudos anteriores mostram que esta enzima tem papel nos eventos celulares que levam à morte neuronal e, conseqüentemente, à neurodegeneração. O óxido nítrico é molécula gasosa produzida como radical livre no processo de conversão da L-arginina em citrulina, pela enzima nNOS. A nNOS apresenta 4 variantes de splicing funcionais: nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama e nNOS-mu, que serviram de base para desenho de estruturas genéticas de RNAi. No sentido biotecnológico, e de acordo com o objetivo do atual projeto, pode-se observar uma crescente demanda de mercado por novos produtos farmacêuticos baseados em terapia gênica. Neste mesmo ramo da terapia gênica, torna-se altamente promissora a metodologia da interferência de RNA (RNAi), recentemente descrita para silenciamento de genes específicos, e que tem revolucionado trabalhos científicos e de desenvolvimento tecnológico. Com base no acima exposto, o atual projeto tem como objetivo o desenho e teste de estruturas genéticas para interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima nNOS, visando a terapia gênica do Parkinson experimental. Desta forma, visa atender às seguintes demandas biotecnológicas: 1. Sistemas de expressão gênica eficazes para terapia do Parkinson experimental, com foco em interferência de RNA. 2. Sistemas de liberação de material genético baseados em lipossomas funcionalizados ou em nanocápsulas poliméricas (PLGA), ambos capazes de ultrapassar a barreira hematoencefálica e liberar DNA plasmidial em áreas cerebrais afetadas pelo Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 3

• 2015 - Atual

  Implantação de Rede de Cooperação Acadêmica para estudo experimental e pré-clínico com foco na Doença de Parkinson, Descrição: Aprovado no EDITAL CNPq/MS/SCTIE/DECIT Nº 27/2014 - Pesquisas sobre Doenças Neurodegenerativas. Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é um distúrbio neurológico que culmina com prejuízos na atividade motora, impacto na qualidade de vida dos pacientes, desfecho crônico-degenerativo, prevalência na sociedade e, finalmente, apresenta sérias limitações de eficácia medicamentosa. Pesquisas concentradas na última década revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, em particular na degeneração nervosa. Em busca de elucidar a participação de microRNAs no Parkinson, bem como investigar o papel de neurotransmissões não-dopaminérgicas nos gânglios da base do encéfalo, uma equipe proponente (Pós-graduação em Fisiologia, FMRP, USP) e duas equipes associadas (PPG em Ciências da Saúde, UnB, e PPG em Saúde e Desenvolvimento na Região Centro-Oeste, UFMS), com competências complementares, histórico de parceria e experiência comprovada na área temática, reuniram-se para propor o atual projeto de pesquisa. A equipe proponente será responsável pelo planejamento geral das atividades e articulação entre os grupos de pesquisa, contribuindo também com o modelo de discinesia por L-DOPA no modelo da 6-OHDA, para os ensaios de interferência de RNA. A equipe associada da UnB irá realizar estudos em modelos animais e em pacientes hospitalares sobre a expressão e o papel de microRNAs na Doença de Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador.

• 2015 - Atual

  Terapia gênica do Parkinson experimental via inibidores de miR-34a e miR-134 nanoestruturados em magnetolipossomas., Descrição: Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é uma enfermidade crônico-degenerativa do sistema nervoso, que culmina com prejuízos na atividade motora e impacto na qualidade de vida dos pacientes; trata-se da segunda doença neurodegenerativa mais prevalente e que apresenta sérias limitações quanto à eficácia medicamentosa (Baumann, 2012). Pesquisas concentradas nas últimas décadas revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, incluindo aquelas neurológicas. Neste sentido, alterações na expressão de microRNAs têm sido descritas na doença de Parkinson (Mouradian, 2012; Miñones-Moyano, 2011; Harraz, 2011). Estudos mostram, ainda, que a degeneração de neurônios dopaminérgicos no Parkinson esporádico ocorre particularmente em células que apresentam os denominados corpos de Lewy, que são agregados de proteínas, em particular alfa-sinucleína e ubiquitina (Dauer & Przedborski, 2003). Dentre os vários modelos animais válidos para estudo desta doença, apenas o que utiliza a rotenona resulta na formação deste achado neuropatológico clássico do Parkinson (Uversky, 2004; Bove, 2005). Retomando a temática dos microRNAs, nosso grupo já verificou que a inibição específica de miR-34a, via oligonucleotídeos sintéticos antisense, causa efeito neuroprotetor em células dopaminérgicas SH-SY5Y lesadas pela rotenona. A inibição deste mesmo microRNA também causou neuroproteção nos modelos de epilepsia por ácido caínico e lítio-pilocarpina (Hu et al., 2012; Sano et al., 2012). Estudo anterior também mostrou efeito neuroprotetor mediante a inibição de um outro microRNA, miR-134, em modelo de epilepsia (Jimenez-Mateos et al., 2012). Até onde nosso conhecimento alcança, antagomirs para miR-34a e para miR-134 ainda não foram testados em modelos animais de Parkinson. Com base no exposto, o presente estudo visa avaliar a eficácia da injeção intracerebral e endovenosa de inibidores de miR-34a e miR-134 no controle da neurodegeneração dopaminérgica causada pela rotenona no estriado, hipocampo e córtex préfrontal de ratos. Os resultados deste estudo servirão para elucidar o potencial biotecnológico de antagomirs sintéticos na terapêutica do Parkinson. O atual projeto contribuirá, também, para avaliar se o uso de campos magnéticos próximos às regiões cerebrais de interesse é estratégia eficaz para vetorização de magnetolipossomas carreadores dos antagomirs sintéticos.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante.

• 2011 - 2015

  Desenvolvimento tecnológico de vetores reguláveis para expressão de hairpins de RNA direcionados às variantes de splicing nNOS-alfa, nNOS-beta e nNOS-gama, visando a terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto visa elucidar o papel de variantes de splicing da enzima nNOS (nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama) na proliferação tumoral do glioma. Apresenta duas metas principais, sendo a primeira o desenvolvimento e teste de seqüências de RNA em dupla fita para RNAi sobre cada variante de splicing de nNOS de gliomas humanos e de rato em cultura, avaliando assim os níveis de expressão da enzima nNOS e a atividade proliferativa celular. A segunda meta é desenvolver e testar vetores de expressão de hairpins de RNAi, para alvos que apresentem atividade antiproliferativa. Pretende-se, desta forma, gerar novos conhecimentos sobre o papel da NO sintase e seus variantes de splicing no desenvolvimento tumoral do glioma e, paralelamente, desenvolver vetores de expressão com potencial uso em plataformas tecnológicas de expressão de RNAi para terapêutica do câncer.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (3) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2011 - Atual

  Interferência de RNA sobre a enzima NO sintase neuronal (nNOS) para terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto situa-se na área prioritária de doenças crônico-degenerativas e visa desenvolver uma terapia gênica para o glioma, baseada em interferência de RNA sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. O câncer uma doença responsável por 7,1 milhões de mortes anuais, o que corresponde a 12,6% do total de óbitos. Os tumores cerebrais malignos, por sua vez, apresentam altas taxas de morbidade e mortalidade - em particular os gliomas malignos em adultos e os meduloblastomas em crianças, havendo tempos de sobrevida muito baixos (ex. 15 meses) para as formas mais agressivas como o glioblastoma. Estudos anteriores mostram correlação entre a expressão da enzima nNOS e o desenvolvimento tumoral e, neste sentido, o uso de inibidores desta mesma enzima pode reduzir o crescimento de alguns tipos de tumores. Desta forma, o silenciamento gênico da enzima nNOS via RNAi poderá reduzir o desenvolvimento tumoral, gerando uma terapia gênica efetiva para o glioma.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2009 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? estudo comparativo da farmacocinética e toxicologia do antifúngico Anfotericina B estruturado em nanocápsulas de PLGA-DMSA (Nanoanf, patente PI 0700446-0, 2007) e em lipossomas (Ambisome®)., Descrição: A atual proposta é uma pesquisa tecnológica e de inovação, com componente científico, representando a continuidade do projeto ?Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? farmacocinética da anfotericina B com ácido dimercaptosuccínico nanoencapsulada em polímero de ácido polilático-poliglicólico (AMB-PLGA)?, aprovado no edital MCT/CNPq 15/2007 - Universal - Faixa A - Até R$ 20.000,00. O projeto está em andamento, tendo concluído as etapas de validação do método de HPLC e da padronização da extração da anfotericina B da nanopartícula e dos tecidos; estudos de farmacocinética estão planejados para outubro de 2008. No entanto, a caracterização desta preparação de anfotericina B (NanoAnf) patenteada por nosso grupo (PI 220708667. 2007) exige estudos complementares que mostrem as reais vantagens de farmacocinética (ex. maior intervalo posológico, aumento da concentração pulmonar do fármaco) e de segurança (redução da nefrotoxicidade), em relação a um produto comercial disponível (ex. anfotericina lipossomal, Ambisome®). Assim, o atual projeto objetiva gerar dados complementares sobre farmacocinética e toxicidade da NanoAnf em comparação com dois medicamentos comerciais, anfotericina B e aquele estruturado em lipossomas (Ambisome®). Serão determinados, comparativamente para os três medicamentos, os parâmetros de biodisponibilidade Cmax, Tmax e AUC, bem como a meia-vida, o volume de distribuição, o clearence, e as taxas de excreção urinária e fecal. Será também definida a dose máxima tolerada, mediante administração de doses progressivas dos fármacos, visando determinar a maior dose de NanoAnf que não cause alterações renais, hepáticas ou mortalidade. Quanto aos produtos gerados, a execução do atual projeto permitirá o depósito de uma nova patente contendo os resultados do presente estudo, somados a resultados de outro projeto voltado ao scaling up para produção em escala industrial. Serão publicados dois artigos científicos, um com foco nas met. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2008 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de nanopartículas de PLGA-DMSA carreadoras de anfotericina B: caracterização das partículas (físico-química, morfologia, biodistribuição, farmacocinética) e análise de parâmetros de scaling up para produção em escala industrial, Descrição: O atual projeto objetiva realizar a caracterização físico-química e morfológica de nanopartículas de poli ácido (lático-co-glicólico), PLGA, com ácido dimercaptosuccínico - DMSA, carreadoras de anfotericina B. Serão também investigados parâmetros de farmacocinética, biodistribuição e condições de scaling up para produção em escala industrial. O desenvolvimento de formulações de medicamentos estruturadas em nanopartículas é uma área de inovação tecnológica muito promissora, tendo recebido investimentos da indústria farmacêutica e citações de prioridade em políticas de ciência e tecnologia, como a PITCE. Estas novas formulações permitiriam vários avanços terapêuticos, incluindo liberação controlada, redução de toxicidade e vetorização para órgãos de interesse. Este conjunto de vantagens é particularmente importante para medicamentos eficazes, mas que apresentam toxicidade elevada, como é o caso do antifúngico anfotericina B. Assim, foram desenvolvidas preparações comerciais baseadas em lipossomas ou lipídeos, por exemplo, mas que apresentam limitações farmacocinéticas e são de custo elevado. Neste sentido, nosso grupo de pesquisa desenvolveu uma nova formulação de anfotericina B estruturada em polímero de PLGA, contendo DMSA para vetorização ao pulmão. O sistema mostrou eficácia terapêutica em modelo de micose sistêmica, sem efeitos colaterais importantes, e com melhor intervalo posológico, resultando no depósito de uma patente e na preparação de um artigo científico. O atual projeto pretende melhor caracterizar esta preparação, realizando testes físico-químicos, ensaios de farmacocinética e de biodistribuição, visando a futura transferência de tecnologia para o setor produtivo. Assim, serão também realizados experimentos de scaling up para definição de parâmetros visando a produção em escala industrial. O projeto apresenta alto grau de alinhamento com as políticas de ciência e tecnologia do País, sendo encaminhado por equipe qualificada, com infra-estrutura laborato. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Maria Sueli Soares Felipe - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa., Número de produções C, T & A: 1

• 2008 - Atual

  Nanotecnologia aplicada à terapia gênica via RNAi no Parkinson experimental, Descrição: O atual projeto situa-se no campo da terapia gênica do Parkinson experimental, com foco na interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. Estudos anteriores mostram que esta enzima tem papel nos eventos celulares que levam à morte neuronal e, conseqüentemente, à neurodegeneração. O óxido nítrico é molécula gasosa produzida como radical livre no processo de conversão da L-arginina em citrulina, pela enzima nNOS. A nNOS apresenta 4 variantes de splicing funcionais: nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama e nNOS-mu, que serviram de base para desenho de estruturas genéticas de RNAi. No sentido biotecnológico, e de acordo com o objetivo do atual projeto, pode-se observar uma crescente demanda de mercado por novos produtos farmacêuticos baseados em terapia gênica. Neste mesmo ramo da terapia gênica, torna-se altamente promissora a metodologia da interferência de RNA (RNAi), recentemente descrita para silenciamento de genes específicos, e que tem revolucionado trabalhos científicos e de desenvolvimento tecnológico. Com base no acima exposto, o atual projeto tem como objetivo o desenho e teste de estruturas genéticas para interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima nNOS, visando a terapia gênica do Parkinson experimental. Desta forma, visa atender às seguintes demandas biotecnológicas: 1. Sistemas de expressão gênica eficazes para terapia do Parkinson experimental, com foco em interferência de RNA. 2. Sistemas de liberação de material genético baseados em lipossomas funcionalizados ou em nanocápsulas poliméricas (PLGA), ambos capazes de ultrapassar a barreira hematoencefálica e liberar DNA plasmidial em áreas cerebrais afetadas pelo Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 3

• 2015 - Atual

  Implantação de Rede de Cooperação Acadêmica para estudo experimental e pré-clínico com foco na Doença de Parkinson, Descrição: Aprovado no EDITAL CNPq/MS/SCTIE/DECIT Nº 27/2014 - Pesquisas sobre Doenças Neurodegenerativas. Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é um distúrbio neurológico que culmina com prejuízos na atividade motora, impacto na qualidade de vida dos pacientes, desfecho crônico-degenerativo, prevalência na sociedade e, finalmente, apresenta sérias limitações de eficácia medicamentosa. Pesquisas concentradas na última década revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, em particular na degeneração nervosa. Em busca de elucidar a participação de microRNAs no Parkinson, bem como investigar o papel de neurotransmissões não-dopaminérgicas nos gânglios da base do encéfalo, uma equipe proponente (Pós-graduação em Fisiologia, FMRP, USP) e duas equipes associadas (PPG em Ciências da Saúde, UnB, e PPG em Saúde e Desenvolvimento na Região Centro-Oeste, UFMS), com competências complementares, histórico de parceria e experiência comprovada na área temática, reuniram-se para propor o atual projeto de pesquisa. A equipe proponente será responsável pelo planejamento geral das atividades e articulação entre os grupos de pesquisa, contribuindo também com o modelo de discinesia por L-DOPA no modelo da 6-OHDA, para os ensaios de interferência de RNA. A equipe associada da UnB irá realizar estudos em modelos animais e em pacientes hospitalares sobre a expressão e o papel de microRNAs na Doença de Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador.

• 2015 - Atual

  Terapia gênica do Parkinson experimental via inibidores de miR-34a e miR-134 nanoestruturados em magnetolipossomas., Descrição: Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é uma enfermidade crônico-degenerativa do sistema nervoso, que culmina com prejuízos na atividade motora e impacto na qualidade de vida dos pacientes; trata-se da segunda doença neurodegenerativa mais prevalente e que apresenta sérias limitações quanto à eficácia medicamentosa (Baumann, 2012). Pesquisas concentradas nas últimas décadas revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, incluindo aquelas neurológicas. Neste sentido, alterações na expressão de microRNAs têm sido descritas na doença de Parkinson (Mouradian, 2012; Miñones-Moyano, 2011; Harraz, 2011). Estudos mostram, ainda, que a degeneração de neurônios dopaminérgicos no Parkinson esporádico ocorre particularmente em células que apresentam os denominados corpos de Lewy, que são agregados de proteínas, em particular alfa-sinucleína e ubiquitina (Dauer & Przedborski, 2003). Dentre os vários modelos animais válidos para estudo desta doença, apenas o que utiliza a rotenona resulta na formação deste achado neuropatológico clássico do Parkinson (Uversky, 2004; Bove, 2005). Retomando a temática dos microRNAs, nosso grupo já verificou que a inibição específica de miR-34a, via oligonucleotídeos sintéticos antisense, causa efeito neuroprotetor em células dopaminérgicas SH-SY5Y lesadas pela rotenona. A inibição deste mesmo microRNA também causou neuroproteção nos modelos de epilepsia por ácido caínico e lítio-pilocarpina (Hu et al., 2012; Sano et al., 2012). Estudo anterior também mostrou efeito neuroprotetor mediante a inibição de um outro microRNA, miR-134, em modelo de epilepsia (Jimenez-Mateos et al., 2012). Até onde nosso conhecimento alcança, antagomirs para miR-34a e para miR-134 ainda não foram testados em modelos animais de Parkinson. Com base no exposto, o presente estudo visa avaliar a eficácia da injeção intracerebral e endovenosa de inibidores de miR-34a e miR-134 no controle da neurodegeneração dopaminérgica causada pela rotenona no estriado, hipocampo e córtex préfrontal de ratos. Os resultados deste estudo servirão para elucidar o potencial biotecnológico de antagomirs sintéticos na terapêutica do Parkinson. O atual projeto contribuirá, também, para avaliar se o uso de campos magnéticos próximos às regiões cerebrais de interesse é estratégia eficaz para vetorização de magnetolipossomas carreadores dos antagomirs sintéticos.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante.

• 2011 - 2015

  Desenvolvimento tecnológico de vetores reguláveis para expressão de hairpins de RNA direcionados às variantes de splicing nNOS-alfa, nNOS-beta e nNOS-gama, visando a terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto visa elucidar o papel de variantes de splicing da enzima nNOS (nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama) na proliferação tumoral do glioma. Apresenta duas metas principais, sendo a primeira o desenvolvimento e teste de seqüências de RNA em dupla fita para RNAi sobre cada variante de splicing de nNOS de gliomas humanos e de rato em cultura, avaliando assim os níveis de expressão da enzima nNOS e a atividade proliferativa celular. A segunda meta é desenvolver e testar vetores de expressão de hairpins de RNAi, para alvos que apresentem atividade antiproliferativa. Pretende-se, desta forma, gerar novos conhecimentos sobre o papel da NO sintase e seus variantes de splicing no desenvolvimento tumoral do glioma e, paralelamente, desenvolver vetores de expressão com potencial uso em plataformas tecnológicas de expressão de RNAi para terapêutica do câncer.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (3) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2011 - Atual

  Interferência de RNA sobre a enzima NO sintase neuronal (nNOS) para terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto situa-se na área prioritária de doenças crônico-degenerativas e visa desenvolver uma terapia gênica para o glioma, baseada em interferência de RNA sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. O câncer uma doença responsável por 7,1 milhões de mortes anuais, o que corresponde a 12,6% do total de óbitos. Os tumores cerebrais malignos, por sua vez, apresentam altas taxas de morbidade e mortalidade - em particular os gliomas malignos em adultos e os meduloblastomas em crianças, havendo tempos de sobrevida muito baixos (ex. 15 meses) para as formas mais agressivas como o glioblastoma. Estudos anteriores mostram correlação entre a expressão da enzima nNOS e o desenvolvimento tumoral e, neste sentido, o uso de inibidores desta mesma enzima pode reduzir o crescimento de alguns tipos de tumores. Desta forma, o silenciamento gênico da enzima nNOS via RNAi poderá reduzir o desenvolvimento tumoral, gerando uma terapia gênica efetiva para o glioma.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2009 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? estudo comparativo da farmacocinética e toxicologia do antifúngico Anfotericina B estruturado em nanocápsulas de PLGA-DMSA (Nanoanf, patente PI 0700446-0, 2007) e em lipossomas (Ambisome®)., Descrição: A atual proposta é uma pesquisa tecnológica e de inovação, com componente científico, representando a continuidade do projeto ?Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? farmacocinética da anfotericina B com ácido dimercaptosuccínico nanoencapsulada em polímero de ácido polilático-poliglicólico (AMB-PLGA)?, aprovado no edital MCT/CNPq 15/2007 - Universal - Faixa A - Até R$ 20.000,00. O projeto está em andamento, tendo concluído as etapas de validação do método de HPLC e da padronização da extração da anfotericina B da nanopartícula e dos tecidos; estudos de farmacocinética estão planejados para outubro de 2008. No entanto, a caracterização desta preparação de anfotericina B (NanoAnf) patenteada por nosso grupo (PI 220708667. 2007) exige estudos complementares que mostrem as reais vantagens de farmacocinética (ex. maior intervalo posológico, aumento da concentração pulmonar do fármaco) e de segurança (redução da nefrotoxicidade), em relação a um produto comercial disponível (ex. anfotericina lipossomal, Ambisome®). Assim, o atual projeto objetiva gerar dados complementares sobre farmacocinética e toxicidade da NanoAnf em comparação com dois medicamentos comerciais, anfotericina B e aquele estruturado em lipossomas (Ambisome®). Serão determinados, comparativamente para os três medicamentos, os parâmetros de biodisponibilidade Cmax, Tmax e AUC, bem como a meia-vida, o volume de distribuição, o clearence, e as taxas de excreção urinária e fecal. Será também definida a dose máxima tolerada, mediante administração de doses progressivas dos fármacos, visando determinar a maior dose de NanoAnf que não cause alterações renais, hepáticas ou mortalidade. Quanto aos produtos gerados, a execução do atual projeto permitirá o depósito de uma nova patente contendo os resultados do presente estudo, somados a resultados de outro projeto voltado ao scaling up para produção em escala industrial. Serão publicados dois artigos científicos, um com foco nas met. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2008 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de nanopartículas de PLGA-DMSA carreadoras de anfotericina B: caracterização das partículas (físico-química, morfologia, biodistribuição, farmacocinética) e análise de parâmetros de scaling up para produção em escala industrial, Descrição: O atual projeto objetiva realizar a caracterização físico-química e morfológica de nanopartículas de poli ácido (lático-co-glicólico), PLGA, com ácido dimercaptosuccínico - DMSA, carreadoras de anfotericina B. Serão também investigados parâmetros de farmacocinética, biodistribuição e condições de scaling up para produção em escala industrial. O desenvolvimento de formulações de medicamentos estruturadas em nanopartículas é uma área de inovação tecnológica muito promissora, tendo recebido investimentos da indústria farmacêutica e citações de prioridade em políticas de ciência e tecnologia, como a PITCE. Estas novas formulações permitiriam vários avanços terapêuticos, incluindo liberação controlada, redução de toxicidade e vetorização para órgãos de interesse. Este conjunto de vantagens é particularmente importante para medicamentos eficazes, mas que apresentam toxicidade elevada, como é o caso do antifúngico anfotericina B. Assim, foram desenvolvidas preparações comerciais baseadas em lipossomas ou lipídeos, por exemplo, mas que apresentam limitações farmacocinéticas e são de custo elevado. Neste sentido, nosso grupo de pesquisa desenvolveu uma nova formulação de anfotericina B estruturada em polímero de PLGA, contendo DMSA para vetorização ao pulmão. O sistema mostrou eficácia terapêutica em modelo de micose sistêmica, sem efeitos colaterais importantes, e com melhor intervalo posológico, resultando no depósito de uma patente e na preparação de um artigo científico. O atual projeto pretende melhor caracterizar esta preparação, realizando testes físico-químicos, ensaios de farmacocinética e de biodistribuição, visando a futura transferência de tecnologia para o setor produtivo. Assim, serão também realizados experimentos de scaling up para definição de parâmetros visando a produção em escala industrial. O projeto apresenta alto grau de alinhamento com as políticas de ciência e tecnologia do País, sendo encaminhado por equipe qualificada, com infra-estrutura laborato. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Maria Sueli Soares Felipe - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa., Número de produções C, T & A: 1

• 2008 - Atual

  Nanotecnologia aplicada à terapia gênica via RNAi no Parkinson experimental, Descrição: O atual projeto situa-se no campo da terapia gênica do Parkinson experimental, com foco na interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. Estudos anteriores mostram que esta enzima tem papel nos eventos celulares que levam à morte neuronal e, conseqüentemente, à neurodegeneração. O óxido nítrico é molécula gasosa produzida como radical livre no processo de conversão da L-arginina em citrulina, pela enzima nNOS. A nNOS apresenta 4 variantes de splicing funcionais: nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama e nNOS-mu, que serviram de base para desenho de estruturas genéticas de RNAi. No sentido biotecnológico, e de acordo com o objetivo do atual projeto, pode-se observar uma crescente demanda de mercado por novos produtos farmacêuticos baseados em terapia gênica. Neste mesmo ramo da terapia gênica, torna-se altamente promissora a metodologia da interferência de RNA (RNAi), recentemente descrita para silenciamento de genes específicos, e que tem revolucionado trabalhos científicos e de desenvolvimento tecnológico. Com base no acima exposto, o atual projeto tem como objetivo o desenho e teste de estruturas genéticas para interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima nNOS, visando a terapia gênica do Parkinson experimental. Desta forma, visa atender às seguintes demandas biotecnológicas: 1. Sistemas de expressão gênica eficazes para terapia do Parkinson experimental, com foco em interferência de RNA. 2. Sistemas de liberação de material genético baseados em lipossomas funcionalizados ou em nanocápsulas poliméricas (PLGA), ambos capazes de ultrapassar a barreira hematoencefálica e liberar DNA plasmidial em áreas cerebrais afetadas pelo Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 3

• 2015 - Atual

  Implantação de Rede de Cooperação Acadêmica para estudo experimental e pré-clínico com foco na Doença de Parkinson, Descrição: Aprovado no EDITAL CNPq/MS/SCTIE/DECIT Nº 27/2014 - Pesquisas sobre Doenças Neurodegenerativas. Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é um distúrbio neurológico que culmina com prejuízos na atividade motora, impacto na qualidade de vida dos pacientes, desfecho crônico-degenerativo, prevalência na sociedade e, finalmente, apresenta sérias limitações de eficácia medicamentosa. Pesquisas concentradas na última década revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, em particular na degeneração nervosa. Em busca de elucidar a participação de microRNAs no Parkinson, bem como investigar o papel de neurotransmissões não-dopaminérgicas nos gânglios da base do encéfalo, uma equipe proponente (Pós-graduação em Fisiologia, FMRP, USP) e duas equipes associadas (PPG em Ciências da Saúde, UnB, e PPG em Saúde e Desenvolvimento na Região Centro-Oeste, UFMS), com competências complementares, histórico de parceria e experiência comprovada na área temática, reuniram-se para propor o atual projeto de pesquisa. A equipe proponente será responsável pelo planejamento geral das atividades e articulação entre os grupos de pesquisa, contribuindo também com o modelo de discinesia por L-DOPA no modelo da 6-OHDA, para os ensaios de interferência de RNA. A equipe associada da UnB irá realizar estudos em modelos animais e em pacientes hospitalares sobre a expressão e o papel de microRNAs na Doença de Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador.

• 2015 - Atual

  Terapia gênica do Parkinson experimental via inibidores de miR-34a e miR-134 nanoestruturados em magnetolipossomas., Descrição: Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é uma enfermidade crônico-degenerativa do sistema nervoso, que culmina com prejuízos na atividade motora e impacto na qualidade de vida dos pacientes; trata-se da segunda doença neurodegenerativa mais prevalente e que apresenta sérias limitações quanto à eficácia medicamentosa (Baumann, 2012). Pesquisas concentradas nas últimas décadas revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, incluindo aquelas neurológicas. Neste sentido, alterações na expressão de microRNAs têm sido descritas na doença de Parkinson (Mouradian, 2012; Miñones-Moyano, 2011; Harraz, 2011). Estudos mostram, ainda, que a degeneração de neurônios dopaminérgicos no Parkinson esporádico ocorre particularmente em células que apresentam os denominados corpos de Lewy, que são agregados de proteínas, em particular alfa-sinucleína e ubiquitina (Dauer & Przedborski, 2003). Dentre os vários modelos animais válidos para estudo desta doença, apenas o que utiliza a rotenona resulta na formação deste achado neuropatológico clássico do Parkinson (Uversky, 2004; Bove, 2005). Retomando a temática dos microRNAs, nosso grupo já verificou que a inibição específica de miR-34a, via oligonucleotídeos sintéticos antisense, causa efeito neuroprotetor em células dopaminérgicas SH-SY5Y lesadas pela rotenona. A inibição deste mesmo microRNA também causou neuroproteção nos modelos de epilepsia por ácido caínico e lítio-pilocarpina (Hu et al., 2012; Sano et al., 2012). Estudo anterior também mostrou efeito neuroprotetor mediante a inibição de um outro microRNA, miR-134, em modelo de epilepsia (Jimenez-Mateos et al., 2012). Até onde nosso conhecimento alcança, antagomirs para miR-34a e para miR-134 ainda não foram testados em modelos animais de Parkinson. Com base no exposto, o presente estudo visa avaliar a eficácia da injeção intracerebral e endovenosa de inibidores de miR-34a e miR-134 no controle da neurodegeneração dopaminérgica causada pela rotenona no estriado, hipocampo e córtex préfrontal de ratos. Os resultados deste estudo servirão para elucidar o potencial biotecnológico de antagomirs sintéticos na terapêutica do Parkinson. O atual projeto contribuirá, também, para avaliar se o uso de campos magnéticos próximos às regiões cerebrais de interesse é estratégia eficaz para vetorização de magnetolipossomas carreadores dos antagomirs sintéticos.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante.

• 2011 - 2015

  Desenvolvimento tecnológico de vetores reguláveis para expressão de hairpins de RNA direcionados às variantes de splicing nNOS-alfa, nNOS-beta e nNOS-gama, visando a terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto visa elucidar o papel de variantes de splicing da enzima nNOS (nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama) na proliferação tumoral do glioma. Apresenta duas metas principais, sendo a primeira o desenvolvimento e teste de seqüências de RNA em dupla fita para RNAi sobre cada variante de splicing de nNOS de gliomas humanos e de rato em cultura, avaliando assim os níveis de expressão da enzima nNOS e a atividade proliferativa celular. A segunda meta é desenvolver e testar vetores de expressão de hairpins de RNAi, para alvos que apresentem atividade antiproliferativa. Pretende-se, desta forma, gerar novos conhecimentos sobre o papel da NO sintase e seus variantes de splicing no desenvolvimento tumoral do glioma e, paralelamente, desenvolver vetores de expressão com potencial uso em plataformas tecnológicas de expressão de RNAi para terapêutica do câncer.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (3) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2011 - Atual

  Interferência de RNA sobre a enzima NO sintase neuronal (nNOS) para terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto situa-se na área prioritária de doenças crônico-degenerativas e visa desenvolver uma terapia gênica para o glioma, baseada em interferência de RNA sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. O câncer uma doença responsável por 7,1 milhões de mortes anuais, o que corresponde a 12,6% do total de óbitos. Os tumores cerebrais malignos, por sua vez, apresentam altas taxas de morbidade e mortalidade - em particular os gliomas malignos em adultos e os meduloblastomas em crianças, havendo tempos de sobrevida muito baixos (ex. 15 meses) para as formas mais agressivas como o glioblastoma. Estudos anteriores mostram correlação entre a expressão da enzima nNOS e o desenvolvimento tumoral e, neste sentido, o uso de inibidores desta mesma enzima pode reduzir o crescimento de alguns tipos de tumores. Desta forma, o silenciamento gênico da enzima nNOS via RNAi poderá reduzir o desenvolvimento tumoral, gerando uma terapia gênica efetiva para o glioma.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2009 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? estudo comparativo da farmacocinética e toxicologia do antifúngico Anfotericina B estruturado em nanocápsulas de PLGA-DMSA (Nanoanf, patente PI 0700446-0, 2007) e em lipossomas (Ambisome®)., Descrição: A atual proposta é uma pesquisa tecnológica e de inovação, com componente científico, representando a continuidade do projeto ?Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? farmacocinética da anfotericina B com ácido dimercaptosuccínico nanoencapsulada em polímero de ácido polilático-poliglicólico (AMB-PLGA)?, aprovado no edital MCT/CNPq 15/2007 - Universal - Faixa A - Até R$ 20.000,00. O projeto está em andamento, tendo concluído as etapas de validação do método de HPLC e da padronização da extração da anfotericina B da nanopartícula e dos tecidos; estudos de farmacocinética estão planejados para outubro de 2008. No entanto, a caracterização desta preparação de anfotericina B (NanoAnf) patenteada por nosso grupo (PI 220708667. 2007) exige estudos complementares que mostrem as reais vantagens de farmacocinética (ex. maior intervalo posológico, aumento da concentração pulmonar do fármaco) e de segurança (redução da nefrotoxicidade), em relação a um produto comercial disponível (ex. anfotericina lipossomal, Ambisome®). Assim, o atual projeto objetiva gerar dados complementares sobre farmacocinética e toxicidade da NanoAnf em comparação com dois medicamentos comerciais, anfotericina B e aquele estruturado em lipossomas (Ambisome®). Serão determinados, comparativamente para os três medicamentos, os parâmetros de biodisponibilidade Cmax, Tmax e AUC, bem como a meia-vida, o volume de distribuição, o clearence, e as taxas de excreção urinária e fecal. Será também definida a dose máxima tolerada, mediante administração de doses progressivas dos fármacos, visando determinar a maior dose de NanoAnf que não cause alterações renais, hepáticas ou mortalidade. Quanto aos produtos gerados, a execução do atual projeto permitirá o depósito de uma nova patente contendo os resultados do presente estudo, somados a resultados de outro projeto voltado ao scaling up para produção em escala industrial. Serão publicados dois artigos científicos, um com foco nas met. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2008 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de nanopartículas de PLGA-DMSA carreadoras de anfotericina B: caracterização das partículas (físico-química, morfologia, biodistribuição, farmacocinética) e análise de parâmetros de scaling up para produção em escala industrial, Descrição: O atual projeto objetiva realizar a caracterização físico-química e morfológica de nanopartículas de poli ácido (lático-co-glicólico), PLGA, com ácido dimercaptosuccínico - DMSA, carreadoras de anfotericina B. Serão também investigados parâmetros de farmacocinética, biodistribuição e condições de scaling up para produção em escala industrial. O desenvolvimento de formulações de medicamentos estruturadas em nanopartículas é uma área de inovação tecnológica muito promissora, tendo recebido investimentos da indústria farmacêutica e citações de prioridade em políticas de ciência e tecnologia, como a PITCE. Estas novas formulações permitiriam vários avanços terapêuticos, incluindo liberação controlada, redução de toxicidade e vetorização para órgãos de interesse. Este conjunto de vantagens é particularmente importante para medicamentos eficazes, mas que apresentam toxicidade elevada, como é o caso do antifúngico anfotericina B. Assim, foram desenvolvidas preparações comerciais baseadas em lipossomas ou lipídeos, por exemplo, mas que apresentam limitações farmacocinéticas e são de custo elevado. Neste sentido, nosso grupo de pesquisa desenvolveu uma nova formulação de anfotericina B estruturada em polímero de PLGA, contendo DMSA para vetorização ao pulmão. O sistema mostrou eficácia terapêutica em modelo de micose sistêmica, sem efeitos colaterais importantes, e com melhor intervalo posológico, resultando no depósito de uma patente e na preparação de um artigo científico. O atual projeto pretende melhor caracterizar esta preparação, realizando testes físico-químicos, ensaios de farmacocinética e de biodistribuição, visando a futura transferência de tecnologia para o setor produtivo. Assim, serão também realizados experimentos de scaling up para definição de parâmetros visando a produção em escala industrial. O projeto apresenta alto grau de alinhamento com as políticas de ciência e tecnologia do País, sendo encaminhado por equipe qualificada, com infra-estrutura laborato. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Maria Sueli Soares Felipe - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1

• 2008 - Atual

  Nanotecnologia aplicada à terapia gênica via RNAi no Parkinson experimental, Descrição: O atual projeto situa-se no campo da terapia gênica do Parkinson experimental, com foco na interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. Estudos anteriores mostram que esta enzima tem papel nos eventos celulares que levam à morte neuronal e, conseqüentemente, à neurodegeneração. O óxido nítrico é molécula gasosa produzida como radical livre no processo de conversão da L-arginina em citrulina, pela enzima nNOS. A nNOS apresenta 4 variantes de splicing funcionais: nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama e nNOS-mu, que serviram de base para desenho de estruturas genéticas de RNAi. No sentido biotecnológico, e de acordo com o objetivo do atual projeto, pode-se observar uma crescente demanda de mercado por novos produtos farmacêuticos baseados em terapia gênica. Neste mesmo ramo da terapia gênica, torna-se altamente promissora a metodologia da interferência de RNA (RNAi), recentemente descrita para silenciamento de genes específicos, e que tem revolucionado trabalhos científicos e de desenvolvimento tecnológico. Com base no acima exposto, o atual projeto tem como objetivo o desenho e teste de estruturas genéticas para interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima nNOS, visando a terapia gênica do Parkinson experimental. Desta forma, visa atender às seguintes demandas biotecnológicas: 1. Sistemas de expressão gênica eficazes para terapia do Parkinson experimental, com foco em interferência de RNA. 2. Sistemas de liberação de material genético baseados em lipossomas funcionalizados ou em nanocápsulas poliméricas (PLGA), ambos capazes de ultrapassar a barreira hematoencefálica e liberar DNA plasmidial em áreas cerebrais afetadas pelo Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 3

• 2015 - Atual

  Terapia gênica do Parkinson experimental via inibidores de miR-34a e miR-134 nanoestruturados em magnetolipossomas., Descrição: Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é uma enfermidade crônico-degenerativa do sistema nervoso, que culmina com prejuízos na atividade motora e impacto na qualidade de vida dos pacientes; trata-se da segunda doença neurodegenerativa mais prevalente e que apresenta sérias limitações quanto à eficácia medicamentosa (Baumann, 2012). Pesquisas concentradas nas últimas décadas revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, incluindo aquelas neurológicas. Neste sentido, alterações na expressão de microRNAs têm sido descritas na doença de Parkinson (Mouradian, 2012; Miñones-Moyano, 2011; Harraz, 2011). Estudos mostram, ainda, que a degeneração de neurônios dopaminérgicos no Parkinson esporádico ocorre particularmente em células que apresentam os denominados corpos de Lewy, que são agregados de proteínas, em particular alfa-sinucleína e ubiquitina (Dauer & Przedborski, 2003). Dentre os vários modelos animais válidos para estudo desta doença, apenas o que utiliza a rotenona resulta na formação deste achado neuropatológico clássico do Parkinson (Uversky, 2004; Bove, 2005). Retomando a temática dos microRNAs, nosso grupo já verificou que a inibição específica de miR-34a, via oligonucleotídeos sintéticos antisense, causa efeito neuroprotetor em células dopaminérgicas SH-SY5Y lesadas pela rotenona. A inibição deste mesmo microRNA também causou neuroproteção nos modelos de epilepsia por ácido caínico e lítio-pilocarpina (Hu et al., 2012; Sano et al., 2012). Estudo anterior também mostrou efeito neuroprotetor mediante a inibição de um outro microRNA, miR-134, em modelo de epilepsia (Jimenez-Mateos et al., 2012). Até onde nosso conhecimento alcança, antagomirs para miR-34a e para miR-134 ainda não foram testados em modelos animais de Parkinson. Com base no exposto, o presente estudo visa avaliar a eficácia da injeção intracerebral e endovenosa de inibidores de miR-34a e miR-134 no controle da neurodegeneração dopaminérgica causada pela rotenona no estriado, hipocampo e córtex préfrontal de ratos. Os resultados deste estudo servirão para elucidar o potencial biotecnológico de antagomirs sintéticos na terapêutica do Parkinson. O atual projeto contribuirá, também, para avaliar se o uso de campos magnéticos próximos às regiões cerebrais de interesse é estratégia eficaz para vetorização de magnetolipossomas carreadores dos antagomirs sintéticos.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante.

• 2015 - Atual

  Implantação de Rede de Cooperação Acadêmica para estudo experimental e pré-clínico com foco na Doença de Parkinson, Descrição: Aprovado no EDITAL CNPq/MS/SCTIE/DECIT Nº 27/2014 - Pesquisas sobre Doenças Neurodegenerativas. Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é um distúrbio neurológico que culmina com prejuízos na atividade motora, impacto na qualidade de vida dos pacientes, desfecho crônico-degenerativo, prevalência na sociedade e, finalmente, apresenta sérias limitações de eficácia medicamentosa. Pesquisas concentradas na última década revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, em particular na degeneração nervosa. Em busca de elucidar a participação de microRNAs no Parkinson, bem como investigar o papel de neurotransmissões não-dopaminérgicas nos gânglios da base do encéfalo, uma equipe proponente (Pós-graduação em Fisiologia, FMRP, USP) e duas equipes associadas (PPG em Ciências da Saúde, UnB, e PPG em Saúde e Desenvolvimento na Região Centro-Oeste, UFMS), com competências complementares, histórico de parceria e experiência comprovada na área temática, reuniram-se para propor o atual projeto de pesquisa. A equipe proponente será responsável pelo planejamento geral das atividades e articulação entre os grupos de pesquisa, contribuindo também com o modelo de discinesia por L-DOPA no modelo da 6-OHDA, para os ensaios de interferência de RNA. A equipe associada da UnB irá realizar estudos em modelos animais e em pacientes hospitalares sobre a expressão e o papel de microRNAs na Doença de Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador.

• 2011 - 2015

  Desenvolvimento tecnológico de vetores reguláveis para expressão de hairpins de RNA direcionados às variantes de splicing nNOS-alfa, nNOS-beta e nNOS-gama, visando a terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto visa elucidar o papel de variantes de splicing da enzima nNOS (nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama) na proliferação tumoral do glioma. Apresenta duas metas principais, sendo a primeira o desenvolvimento e teste de seqüências de RNA em dupla fita para RNAi sobre cada variante de splicing de nNOS de gliomas humanos e de rato em cultura, avaliando assim os níveis de expressão da enzima nNOS e a atividade proliferativa celular. A segunda meta é desenvolver e testar vetores de expressão de hairpins de RNAi, para alvos que apresentem atividade antiproliferativa. Pretende-se, desta forma, gerar novos conhecimentos sobre o papel da NO sintase e seus variantes de splicing no desenvolvimento tumoral do glioma e, paralelamente, desenvolver vetores de expressão com potencial uso em plataformas tecnológicas de expressão de RNAi para terapêutica do câncer.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (3) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2011 - Atual

  Interferência de RNA sobre a enzima NO sintase neuronal (nNOS) para terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto situa-se na área prioritária de doenças crônico-degenerativas e visa desenvolver uma terapia gênica para o glioma, baseada em interferência de RNA sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. O câncer uma doença responsável por 7,1 milhões de mortes anuais, o que corresponde a 12,6% do total de óbitos. Os tumores cerebrais malignos, por sua vez, apresentam altas taxas de morbidade e mortalidade - em particular os gliomas malignos em adultos e os meduloblastomas em crianças, havendo tempos de sobrevida muito baixos (ex. 15 meses) para as formas mais agressivas como o glioblastoma. Estudos anteriores mostram correlação entre a expressão da enzima nNOS e o desenvolvimento tumoral e, neste sentido, o uso de inibidores desta mesma enzima pode reduzir o crescimento de alguns tipos de tumores. Desta forma, o silenciamento gênico da enzima nNOS via RNAi poderá reduzir o desenvolvimento tumoral, gerando uma terapia gênica efetiva para o glioma.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2009 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? estudo comparativo da farmacocinética e toxicologia do antifúngico Anfotericina B estruturado em nanocápsulas de PLGA-DMSA (Nanoanf, patente PI 0700446-0, 2007) e em lipossomas (Ambisome®)., Descrição: A atual proposta é uma pesquisa tecnológica e de inovação, com componente científico, representando a continuidade do projeto ?Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? farmacocinética da anfotericina B com ácido dimercaptosuccínico nanoencapsulada em polímero de ácido polilático-poliglicólico (AMB-PLGA)?, aprovado no edital MCT/CNPq 15/2007 - Universal - Faixa A - Até R$ 20.000,00. O projeto está em andamento, tendo concluído as etapas de validação do método de HPLC e da padronização da extração da anfotericina B da nanopartícula e dos tecidos; estudos de farmacocinética estão planejados para outubro de 2008. No entanto, a caracterização desta preparação de anfotericina B (NanoAnf) patenteada por nosso grupo (PI 220708667. 2007) exige estudos complementares que mostrem as reais vantagens de farmacocinética (ex. maior intervalo posológico, aumento da concentração pulmonar do fármaco) e de segurança (redução da nefrotoxicidade), em relação a um produto comercial disponível (ex. anfotericina lipossomal, Ambisome®). Assim, o atual projeto objetiva gerar dados complementares sobre farmacocinética e toxicidade da NanoAnf em comparação com dois medicamentos comerciais, anfotericina B e aquele estruturado em lipossomas (Ambisome®). Serão determinados, comparativamente para os três medicamentos, os parâmetros de biodisponibilidade Cmax, Tmax e AUC, bem como a meia-vida, o volume de distribuição, o clearence, e as taxas de excreção urinária e fecal. Será também definida a dose máxima tolerada, mediante administração de doses progressivas dos fármacos, visando determinar a maior dose de NanoAnf que não cause alterações renais, hepáticas ou mortalidade. Quanto aos produtos gerados, a execução do atual projeto permitirá o depósito de uma nova patente contendo os resultados do presente estudo, somados a resultados de outro projeto voltado ao scaling up para produção em escala industrial. Serão publicados dois artigos científicos, um com foco nas met. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2008 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de nanopartículas de PLGA-DMSA carreadoras de anfotericina B: caracterização das partículas (físico-química, morfologia, biodistribuição, farmacocinética) e análise de parâmetros de scaling up para produção em escala industrial, Descrição: O atual projeto objetiva realizar a caracterização físico-química e morfológica de nanopartículas de poli ácido (lático-co-glicólico), PLGA, com ácido dimercaptosuccínico - DMSA, carreadoras de anfotericina B. Serão também investigados parâmetros de farmacocinética, biodistribuição e condições de scaling up para produção em escala industrial. O desenvolvimento de formulações de medicamentos estruturadas em nanopartículas é uma área de inovação tecnológica muito promissora, tendo recebido investimentos da indústria farmacêutica e citações de prioridade em políticas de ciência e tecnologia, como a PITCE. Estas novas formulações permitiriam vários avanços terapêuticos, incluindo liberação controlada, redução de toxicidade e vetorização para órgãos de interesse. Este conjunto de vantagens é particularmente importante para medicamentos eficazes, mas que apresentam toxicidade elevada, como é o caso do antifúngico anfotericina B. Assim, foram desenvolvidas preparações comerciais baseadas em lipossomas ou lipídeos, por exemplo, mas que apresentam limitações farmacocinéticas e são de custo elevado. Neste sentido, nosso grupo de pesquisa desenvolveu uma nova formulação de anfotericina B estruturada em polímero de PLGA, contendo DMSA para vetorização ao pulmão. O sistema mostrou eficácia terapêutica em modelo de micose sistêmica, sem efeitos colaterais importantes, e com melhor intervalo posológico, resultando no depósito de uma patente e na preparação de um artigo científico. O atual projeto pretende melhor caracterizar esta preparação, realizando testes físico-químicos, ensaios de farmacocinética e de biodistribuição, visando a futura transferência de tecnologia para o setor produtivo. Assim, serão também realizados experimentos de scaling up para definição de parâmetros visando a produção em escala industrial. O projeto apresenta alto grau de alinhamento com as políticas de ciência e tecnologia do País, sendo encaminhado por equipe qualificada, com infra-estrutura laborato. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Maria Sueli Soares Felipe - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1

• 2008 - Atual

  Nanotecnologia aplicada à terapia gênica via RNAi no Parkinson experimental, Descrição: O atual projeto situa-se no campo da terapia gênica do Parkinson experimental, com foco na interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. Estudos anteriores mostram que esta enzima tem papel nos eventos celulares que levam à morte neuronal e, conseqüentemente, à neurodegeneração. O óxido nítrico é molécula gasosa produzida como radical livre no processo de conversão da L-arginina em citrulina, pela enzima nNOS. A nNOS apresenta 4 variantes de splicing funcionais: nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama e nNOS-mu, que serviram de base para desenho de estruturas genéticas de RNAi. No sentido biotecnológico, e de acordo com o objetivo do atual projeto, pode-se observar uma crescente demanda de mercado por novos produtos farmacêuticos baseados em terapia gênica. Neste mesmo ramo da terapia gênica, torna-se altamente promissora a metodologia da interferência de RNA (RNAi), recentemente descrita para silenciamento de genes específicos, e que tem revolucionado trabalhos científicos e de desenvolvimento tecnológico. Com base no acima exposto, o atual projeto tem como objetivo o desenho e teste de estruturas genéticas para interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima nNOS, visando a terapia gênica do Parkinson experimental. Desta forma, visa atender às seguintes demandas biotecnológicas: 1. Sistemas de expressão gênica eficazes para terapia do Parkinson experimental, com foco em interferência de RNA. 2. Sistemas de liberação de material genético baseados em lipossomas funcionalizados ou em nanocápsulas poliméricas (PLGA), ambos capazes de ultrapassar a barreira hematoencefálica e liberar DNA plasmidial em áreas cerebrais afetadas pelo Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 3

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  Implantação de Rede de Cooperação Acadêmica para estudo experimental e pré-clínico com foco na Doença de Parkinson, Descrição: Aprovado no EDITAL CNPq/MS/SCTIE/DECIT Nº 27/2014 - Pesquisas sobre Doenças Neurodegenerativas. Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é um distúrbio neurológico que culmina com prejuízos na atividade motora, impacto na qualidade de vida dos pacientes, desfecho crônico-degenerativo, prevalência na sociedade e, finalmente, apresenta sérias limitações de eficácia medicamentosa. Pesquisas concentradas na última década revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, em particular na degeneração nervosa. Em busca de elucidar a participação de microRNAs no Parkinson, bem como investigar o papel de neurotransmissões não-dopaminérgicas nos gânglios da base do encéfalo, uma equipe proponente (Pós-graduação em Fisiologia, FMRP, USP) e duas equipes associadas (PPG em Ciências da Saúde, UnB, e PPG em Saúde e Desenvolvimento na Região Centro-Oeste, UFMS), com competências complementares, histórico de parceria e experiência comprovada na área temática, reuniram-se para propor o atual projeto de pesquisa. A equipe proponente será responsável pelo planejamento geral das atividades e articulação entre os grupos de pesquisa, contribuindo também com o modelo de discinesia por L-DOPA no modelo da 6-OHDA, para os ensaios de interferência de RNA. A equipe associada da UnB irá realizar estudos em modelos animais e em pacientes hospitalares sobre a expressão e o papel de microRNAs na Doença de Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador.

• 2015 - Atual

  Terapia gênica do Parkinson experimental via inibidores de miR-34a e miR-134 nanoestruturados em magnetolipossomas., Descrição: Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é uma enfermidade crônico-degenerativa do sistema nervoso, que culmina com prejuízos na atividade motora e impacto na qualidade de vida dos pacientes; trata-se da segunda doença neurodegenerativa mais prevalente e que apresenta sérias limitações quanto à eficácia medicamentosa (Baumann, 2012). Pesquisas concentradas nas últimas décadas revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, incluindo aquelas neurológicas. Neste sentido, alterações na expressão de microRNAs têm sido descritas na doença de Parkinson (Mouradian, 2012; Miñones-Moyano, 2011; Harraz, 2011). Estudos mostram, ainda, que a degeneração de neurônios dopaminérgicos no Parkinson esporádico ocorre particularmente em células que apresentam os denominados corpos de Lewy, que são agregados de proteínas, em particular alfa-sinucleína e ubiquitina (Dauer & Przedborski, 2003). Dentre os vários modelos animais válidos para estudo desta doença, apenas o que utiliza a rotenona resulta na formação deste achado neuropatológico clássico do Parkinson (Uversky, 2004; Bove, 2005). Retomando a temática dos microRNAs, nosso grupo já verificou que a inibição específica de miR-34a, via oligonucleotídeos sintéticos antisense, causa efeito neuroprotetor em células dopaminérgicas SH-SY5Y lesadas pela rotenona. A inibição deste mesmo microRNA também causou neuroproteção nos modelos de epilepsia por ácido caínico e lítio-pilocarpina (Hu et al., 2012; Sano et al., 2012). Estudo anterior também mostrou efeito neuroprotetor mediante a inibição de um outro microRNA, miR-134, em modelo de epilepsia (Jimenez-Mateos et al., 2012). Até onde nosso conhecimento alcança, antagomirs para miR-34a e para miR-134 ainda não foram testados em modelos animais de Parkinson. Com base no exposto, o presente estudo visa avaliar a eficácia da injeção intracerebral e endovenosa de inibidores de miR-34a e miR-134 no controle da neurodegeneração dopaminérgica causada pela rotenona no estriado, hipocampo e córtex préfrontal de ratos. Os resultados deste estudo servirão para elucidar o potencial biotecnológico de antagomirs sintéticos na terapêutica do Parkinson. O atual projeto contribuirá, também, para avaliar se o uso de campos magnéticos próximos às regiões cerebrais de interesse é estratégia eficaz para vetorização de magnetolipossomas carreadores dos antagomirs sintéticos.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante.

• 2011 - 2015

  Desenvolvimento tecnológico de vetores reguláveis para expressão de hairpins de RNA direcionados às variantes de splicing nNOS-alfa, nNOS-beta e nNOS-gama, visando a terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto visa elucidar o papel de variantes de splicing da enzima nNOS (nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama) na proliferação tumoral do glioma. Apresenta duas metas principais, sendo a primeira o desenvolvimento e teste de seqüências de RNA em dupla fita para RNAi sobre cada variante de splicing de nNOS de gliomas humanos e de rato em cultura, avaliando assim os níveis de expressão da enzima nNOS e a atividade proliferativa celular. A segunda meta é desenvolver e testar vetores de expressão de hairpins de RNAi, para alvos que apresentem atividade antiproliferativa. Pretende-se, desta forma, gerar novos conhecimentos sobre o papel da NO sintase e seus variantes de splicing no desenvolvimento tumoral do glioma e, paralelamente, desenvolver vetores de expressão com potencial uso em plataformas tecnológicas de expressão de RNAi para terapêutica do câncer.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (3) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2011 - Atual

  Interferência de RNA sobre a enzima NO sintase neuronal (nNOS) para terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto situa-se na área prioritária de doenças crônico-degenerativas e visa desenvolver uma terapia gênica para o glioma, baseada em interferência de RNA sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. O câncer uma doença responsável por 7,1 milhões de mortes anuais, o que corresponde a 12,6% do total de óbitos. Os tumores cerebrais malignos, por sua vez, apresentam altas taxas de morbidade e mortalidade - em particular os gliomas malignos em adultos e os meduloblastomas em crianças, havendo tempos de sobrevida muito baixos (ex. 15 meses) para as formas mais agressivas como o glioblastoma. Estudos anteriores mostram correlação entre a expressão da enzima nNOS e o desenvolvimento tumoral e, neste sentido, o uso de inibidores desta mesma enzima pode reduzir o crescimento de alguns tipos de tumores. Desta forma, o silenciamento gênico da enzima nNOS via RNAi poderá reduzir o desenvolvimento tumoral, gerando uma terapia gênica efetiva para o glioma.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2009 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? estudo comparativo da farmacocinética e toxicologia do antifúngico Anfotericina B estruturado em nanocápsulas de PLGA-DMSA (Nanoanf, patente PI 0700446-0, 2007) e em lipossomas (Ambisome®)., Descrição: A atual proposta é uma pesquisa tecnológica e de inovação, com componente científico, representando a continuidade do projeto ?Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? farmacocinética da anfotericina B com ácido dimercaptosuccínico nanoencapsulada em polímero de ácido polilático-poliglicólico (AMB-PLGA)?, aprovado no edital MCT/CNPq 15/2007 - Universal - Faixa A - Até R$ 20.000,00. O projeto está em andamento, tendo concluído as etapas de validação do método de HPLC e da padronização da extração da anfotericina B da nanopartícula e dos tecidos; estudos de farmacocinética estão planejados para outubro de 2008. No entanto, a caracterização desta preparação de anfotericina B (NanoAnf) patenteada por nosso grupo (PI 220708667. 2007) exige estudos complementares que mostrem as reais vantagens de farmacocinética (ex. maior intervalo posológico, aumento da concentração pulmonar do fármaco) e de segurança (redução da nefrotoxicidade), em relação a um produto comercial disponível (ex. anfotericina lipossomal, Ambisome®). Assim, o atual projeto objetiva gerar dados complementares sobre farmacocinética e toxicidade da NanoAnf em comparação com dois medicamentos comerciais, anfotericina B e aquele estruturado em lipossomas (Ambisome®). Serão determinados, comparativamente para os três medicamentos, os parâmetros de biodisponibilidade Cmax, Tmax e AUC, bem como a meia-vida, o volume de distribuição, o clearence, e as taxas de excreção urinária e fecal. Será também definida a dose máxima tolerada, mediante administração de doses progressivas dos fármacos, visando determinar a maior dose de NanoAnf que não cause alterações renais, hepáticas ou mortalidade. Quanto aos produtos gerados, a execução do atual projeto permitirá o depósito de uma nova patente contendo os resultados do presente estudo, somados a resultados de outro projeto voltado ao scaling up para produção em escala industrial. Serão publicados dois artigos científicos, um com foco nas met. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2008 - Atual

  Nanotecnologia aplicada à terapia gênica via RNAi no Parkinson experimental, Descrição: O atual projeto situa-se no campo da terapia gênica do Parkinson experimental, com foco na interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. Estudos anteriores mostram que esta enzima tem papel nos eventos celulares que levam à morte neuronal e, conseqüentemente, à neurodegeneração. O óxido nítrico é molécula gasosa produzida como radical livre no processo de conversão da L-arginina em citrulina, pela enzima nNOS. A nNOS apresenta 4 variantes de splicing funcionais: nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama e nNOS-mu, que serviram de base para desenho de estruturas genéticas de RNAi. No sentido biotecnológico, e de acordo com o objetivo do atual projeto, pode-se observar uma crescente demanda de mercado por novos produtos farmacêuticos baseados em terapia gênica. Neste mesmo ramo da terapia gênica, torna-se altamente promissora a metodologia da interferência de RNA (RNAi), recentemente descrita para silenciamento de genes específicos, e que tem revolucionado trabalhos científicos e de desenvolvimento tecnológico. Com base no acima exposto, o atual projeto tem como objetivo o desenho e teste de estruturas genéticas para interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima nNOS, visando a terapia gênica do Parkinson experimental. Desta forma, visa atender às seguintes demandas biotecnológicas: 1. Sistemas de expressão gênica eficazes para terapia do Parkinson experimental, com foco em interferência de RNA. 2. Sistemas de liberação de material genético baseados em lipossomas funcionalizados ou em nanocápsulas poliméricas (PLGA), ambos capazes de ultrapassar a barreira hematoencefálica e liberar DNA plasmidial em áreas cerebrais afetadas pelo Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 3

• 2008 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de nanopartículas de PLGA-DMSA carreadoras de anfotericina B: caracterização das partículas (físico-química, morfologia, biodistribuição, farmacocinética) e análise de parâmetros de scaling up para produção em escala industrial, Descrição: O atual projeto objetiva realizar a caracterização físico-química e morfológica de nanopartículas de poli ácido (lático-co-glicólico), PLGA, com ácido dimercaptosuccínico - DMSA, carreadoras de anfotericina B. Serão também investigados parâmetros de farmacocinética, biodistribuição e condições de scaling up para produção em escala industrial. O desenvolvimento de formulações de medicamentos estruturadas em nanopartículas é uma área de inovação tecnológica muito promissora, tendo recebido investimentos da indústria farmacêutica e citações de prioridade em políticas de ciência e tecnologia, como a PITCE. Estas novas formulações permitiriam vários avanços terapêuticos, incluindo liberação controlada, redução de toxicidade e vetorização para órgãos de interesse. Este conjunto de vantagens é particularmente importante para medicamentos eficazes, mas que apresentam toxicidade elevada, como é o caso do antifúngico anfotericina B. Assim, foram desenvolvidas preparações comerciais baseadas em lipossomas ou lipídeos, por exemplo, mas que apresentam limitações farmacocinéticas e são de custo elevado. Neste sentido, nosso grupo de pesquisa desenvolveu uma nova formulação de anfotericina B estruturada em polímero de PLGA, contendo DMSA para vetorização ao pulmão. O sistema mostrou eficácia terapêutica em modelo de micose sistêmica, sem efeitos colaterais importantes, e com melhor intervalo posológico, resultando no depósito de uma patente e na preparação de um artigo científico. O atual projeto pretende melhor caracterizar esta preparação, realizando testes físico-químicos, ensaios de farmacocinética e de biodistribuição, visando a futura transferência de tecnologia para o setor produtivo. Assim, serão também realizados experimentos de scaling up para definição de parâmetros visando a produção em escala industrial. O projeto apresenta alto grau de alinhamento com as políticas de ciência e tecnologia do País, sendo encaminhado por equipe qualificada, com infra-estrutura laborato. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Maria Sueli Soares Felipe - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1

• 2015 - Atual

  Implantação de Rede de Cooperação Acadêmica para estudo experimental e pré-clínico com foco na Doença de Parkinson, Descrição: Aprovado no EDITAL CNPq/MS/SCTIE/DECIT Nº 27/2014 - Pesquisas sobre Doenças Neurodegenerativas. Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é um distúrbio neurológico que culmina com prejuízos na atividade motora, impacto na qualidade de vida dos pacientes, desfecho crônico-degenerativo, prevalência na sociedade e, finalmente, apresenta sérias limitações de eficácia medicamentosa. Pesquisas concentradas na última década revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, em particular na degeneração nervosa. Em busca de elucidar a participação de microRNAs no Parkinson, bem como investigar o papel de neurotransmissões não-dopaminérgicas nos gânglios da base do encéfalo, uma equipe proponente (Pós-graduação em Fisiologia, FMRP, USP) e duas equipes associadas (PPG em Ciências da Saúde, UnB, e PPG em Saúde e Desenvolvimento na Região Centro-Oeste, UFMS), com competências complementares, histórico de parceria e experiência comprovada na área temática, reuniram-se para propor o atual projeto de pesquisa. A equipe proponente será responsável pelo planejamento geral das atividades e articulação entre os grupos de pesquisa, contribuindo também com o modelo de discinesia por L-DOPA no modelo da 6-OHDA, para os ensaios de interferência de RNA. A equipe associada da UnB irá realizar estudos em modelos animais e em pacientes hospitalares sobre a expressão e o papel de microRNAs na Doença de Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador.

• 2015 - Atual

  Terapia gênica do Parkinson experimental via inibidores de miR-34a e miR-134 nanoestruturados em magnetolipossomas., Descrição: Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é uma enfermidade crônico-degenerativa do sistema nervoso, que culmina com prejuízos na atividade motora e impacto na qualidade de vida dos pacientes; trata-se da segunda doença neurodegenerativa mais prevalente e que apresenta sérias limitações quanto à eficácia medicamentosa (Baumann, 2012). Pesquisas concentradas nas últimas décadas revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, incluindo aquelas neurológicas. Neste sentido, alterações na expressão de microRNAs têm sido descritas na doença de Parkinson (Mouradian, 2012; Miñones-Moyano, 2011; Harraz, 2011). Estudos mostram, ainda, que a degeneração de neurônios dopaminérgicos no Parkinson esporádico ocorre particularmente em células que apresentam os denominados corpos de Lewy, que são agregados de proteínas, em particular alfa-sinucleína e ubiquitina (Dauer & Przedborski, 2003). Dentre os vários modelos animais válidos para estudo desta doença, apenas o que utiliza a rotenona resulta na formação deste achado neuropatológico clássico do Parkinson (Uversky, 2004; Bove, 2005). Retomando a temática dos microRNAs, nosso grupo já verificou que a inibição específica de miR-34a, via oligonucleotídeos sintéticos antisense, causa efeito neuroprotetor em células dopaminérgicas SH-SY5Y lesadas pela rotenona. A inibição deste mesmo microRNA também causou neuroproteção nos modelos de epilepsia por ácido caínico e lítio-pilocarpina (Hu et al., 2012; Sano et al., 2012). Estudo anterior também mostrou efeito neuroprotetor mediante a inibição de um outro microRNA, miR-134, em modelo de epilepsia (Jimenez-Mateos et al., 2012). Até onde nosso conhecimento alcança, antagomirs para miR-34a e para miR-134 ainda não foram testados em modelos animais de Parkinson. Com base no exposto, o presente estudo visa avaliar a eficácia da injeção intracerebral e endovenosa de inibidores de miR-34a e miR-134 no controle da neurodegeneração dopaminérgica causada pela rotenona no estriado, hipocampo e córtex préfrontal de ratos. Os resultados deste estudo servirão para elucidar o potencial biotecnológico de antagomirs sintéticos na terapêutica do Parkinson. O atual projeto contribuirá, também, para avaliar se o uso de campos magnéticos próximos às regiões cerebrais de interesse é estratégia eficaz para vetorização de magnetolipossomas carreadores dos antagomirs sintéticos.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante.

• 2011 - 2015

  Desenvolvimento tecnológico de vetores reguláveis para expressão de hairpins de RNA direcionados às variantes de splicing nNOS-alfa, nNOS-beta e nNOS-gama, visando a terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto visa elucidar o papel de variantes de splicing da enzima nNOS (nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama) na proliferação tumoral do glioma. Apresenta duas metas principais, sendo a primeira o desenvolvimento e teste de seqüências de RNA em dupla fita para RNAi sobre cada variante de splicing de nNOS de gliomas humanos e de rato em cultura, avaliando assim os níveis de expressão da enzima nNOS e a atividade proliferativa celular. A segunda meta é desenvolver e testar vetores de expressão de hairpins de RNAi, para alvos que apresentem atividade antiproliferativa. Pretende-se, desta forma, gerar novos conhecimentos sobre o papel da NO sintase e seus variantes de splicing no desenvolvimento tumoral do glioma e, paralelamente, desenvolver vetores de expressão com potencial uso em plataformas tecnológicas de expressão de RNAi para terapêutica do câncer.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (3) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2011 - Atual

  Interferência de RNA sobre a enzima NO sintase neuronal (nNOS) para terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto situa-se na área prioritária de doenças crônico-degenerativas e visa desenvolver uma terapia gênica para o glioma, baseada em interferência de RNA sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. O câncer uma doença responsável por 7,1 milhões de mortes anuais, o que corresponde a 12,6% do total de óbitos. Os tumores cerebrais malignos, por sua vez, apresentam altas taxas de morbidade e mortalidade - em particular os gliomas malignos em adultos e os meduloblastomas em crianças, havendo tempos de sobrevida muito baixos (ex. 15 meses) para as formas mais agressivas como o glioblastoma. Estudos anteriores mostram correlação entre a expressão da enzima nNOS e o desenvolvimento tumoral e, neste sentido, o uso de inibidores desta mesma enzima pode reduzir o crescimento de alguns tipos de tumores. Desta forma, o silenciamento gênico da enzima nNOS via RNAi poderá reduzir o desenvolvimento tumoral, gerando uma terapia gênica efetiva para o glioma.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2009 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? estudo comparativo da farmacocinética e toxicologia do antifúngico Anfotericina B estruturado em nanocápsulas de PLGA-DMSA (Nanoanf, patente PI 0700446-0, 2007) e em lipossomas (Ambisome®)., Descrição: A atual proposta é uma pesquisa tecnológica e de inovação, com componente científico, representando a continuidade do projeto ?Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? farmacocinética da anfotericina B com ácido dimercaptosuccínico nanoencapsulada em polímero de ácido polilático-poliglicólico (AMB-PLGA)?, aprovado no edital MCT/CNPq 15/2007 - Universal - Faixa A - Até R$ 20.000,00. O projeto está em andamento, tendo concluído as etapas de validação do método de HPLC e da padronização da extração da anfotericina B da nanopartícula e dos tecidos; estudos de farmacocinética estão planejados para outubro de 2008. No entanto, a caracterização desta preparação de anfotericina B (NanoAnf) patenteada por nosso grupo (PI 220708667. 2007) exige estudos complementares que mostrem as reais vantagens de farmacocinética (ex. maior intervalo posológico, aumento da concentração pulmonar do fármaco) e de segurança (redução da nefrotoxicidade), em relação a um produto comercial disponível (ex. anfotericina lipossomal, Ambisome®). Assim, o atual projeto objetiva gerar dados complementares sobre farmacocinética e toxicidade da NanoAnf em comparação com dois medicamentos comerciais, anfotericina B e aquele estruturado em lipossomas (Ambisome®). Serão determinados, comparativamente para os três medicamentos, os parâmetros de biodisponibilidade Cmax, Tmax e AUC, bem como a meia-vida, o volume de distribuição, o clearence, e as taxas de excreção urinária e fecal. Será também definida a dose máxima tolerada, mediante administração de doses progressivas dos fármacos, visando determinar a maior dose de NanoAnf que não cause alterações renais, hepáticas ou mortalidade. Quanto aos produtos gerados, a execução do atual projeto permitirá o depósito de uma nova patente contendo os resultados do presente estudo, somados a resultados de outro projeto voltado ao scaling up para produção em escala industrial. Serão publicados dois artigos científicos, um com foco nas met. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2008 - Atual

  Nanotecnologia aplicada à terapia gênica via RNAi no Parkinson experimental, Descrição: O atual projeto situa-se no campo da terapia gênica do Parkinson experimental, com foco na interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. Estudos anteriores mostram que esta enzima tem papel nos eventos celulares que levam à morte neuronal e, conseqüentemente, à neurodegeneração. O óxido nítrico é molécula gasosa produzida como radical livre no processo de conversão da L-arginina em citrulina, pela enzima nNOS. A nNOS apresenta 4 variantes de splicing funcionais: nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama e nNOS-mu, que serviram de base para desenho de estruturas genéticas de RNAi. No sentido biotecnológico, e de acordo com o objetivo do atual projeto, pode-se observar uma crescente demanda de mercado por novos produtos farmacêuticos baseados em terapia gênica. Neste mesmo ramo da terapia gênica, torna-se altamente promissora a metodologia da interferência de RNA (RNAi), recentemente descrita para silenciamento de genes específicos, e que tem revolucionado trabalhos científicos e de desenvolvimento tecnológico. Com base no acima exposto, o atual projeto tem como objetivo o desenho e teste de estruturas genéticas para interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima nNOS, visando a terapia gênica do Parkinson experimental. Desta forma, visa atender às seguintes demandas biotecnológicas: 1. Sistemas de expressão gênica eficazes para terapia do Parkinson experimental, com foco em interferência de RNA. 2. Sistemas de liberação de material genético baseados em lipossomas funcionalizados ou em nanocápsulas poliméricas (PLGA), ambos capazes de ultrapassar a barreira hematoencefálica e liberar DNA plasmidial em áreas cerebrais afetadas pelo Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 3

• 2008 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de nanopartículas de PLGA-DMSA carreadoras de anfotericina B: caracterização das partículas (físico-química, morfologia, biodistribuição, farmacocinética) e análise de parâmetros de scaling up para produção em escala industrial, Descrição: O atual projeto objetiva realizar a caracterização físico-química e morfológica de nanopartículas de poli ácido (lático-co-glicólico), PLGA, com ácido dimercaptosuccínico - DMSA, carreadoras de anfotericina B. Serão também investigados parâmetros de farmacocinética, biodistribuição e condições de scaling up para produção em escala industrial. O desenvolvimento de formulações de medicamentos estruturadas em nanopartículas é uma área de inovação tecnológica muito promissora, tendo recebido investimentos da indústria farmacêutica e citações de prioridade em políticas de ciência e tecnologia, como a PITCE. Estas novas formulações permitiriam vários avanços terapêuticos, incluindo liberação controlada, redução de toxicidade e vetorização para órgãos de interesse. Este conjunto de vantagens é particularmente importante para medicamentos eficazes, mas que apresentam toxicidade elevada, como é o caso do antifúngico anfotericina B. Assim, foram desenvolvidas preparações comerciais baseadas em lipossomas ou lipídeos, por exemplo, mas que apresentam limitações farmacocinéticas e são de custo elevado. Neste sentido, nosso grupo de pesquisa desenvolveu uma nova formulação de anfotericina B estruturada em polímero de PLGA, contendo DMSA para vetorização ao pulmão. O sistema mostrou eficácia terapêutica em modelo de micose sistêmica, sem efeitos colaterais importantes, e com melhor intervalo posológico, resultando no depósito de uma patente e na preparação de um artigo científico. O atual projeto pretende melhor caracterizar esta preparação, realizando testes físico-químicos, ensaios de farmacocinética e de biodistribuição, visando a futura transferência de tecnologia para o setor produtivo. Assim, serão também realizados experimentos de scaling up para definição de parâmetros visando a produção em escala industrial. O projeto apresenta alto grau de alinhamento com as políticas de ciência e tecnologia do País, sendo encaminhado por equipe qualificada, com infra-estrutura laborato. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Maria Sueli Soares Felipe - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1

• 2015 - Atual

  Terapia gênica do Parkinson experimental via inibidores de miR-34a e miR-134 nanoestruturados em magnetolipossomas., Descrição: Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é uma enfermidade crônico-degenerativa do sistema nervoso, que culmina com prejuízos na atividade motora e impacto na qualidade de vida dos pacientes; trata-se da segunda doença neurodegenerativa mais prevalente e que apresenta sérias limitações quanto à eficácia medicamentosa (Baumann, 2012). Pesquisas concentradas nas últimas décadas revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, incluindo aquelas neurológicas. Neste sentido, alterações na expressão de microRNAs têm sido descritas na doença de Parkinson (Mouradian, 2012; Miñones-Moyano, 2011; Harraz, 2011). Estudos mostram, ainda, que a degeneração de neurônios dopaminérgicos no Parkinson esporádico ocorre particularmente em células que apresentam os denominados corpos de Lewy, que são agregados de proteínas, em particular alfa-sinucleína e ubiquitina (Dauer & Przedborski, 2003). Dentre os vários modelos animais válidos para estudo desta doença, apenas o que utiliza a rotenona resulta na formação deste achado neuropatológico clássico do Parkinson (Uversky, 2004; Bove, 2005). Retomando a temática dos microRNAs, nosso grupo já verificou que a inibição específica de miR-34a, via oligonucleotídeos sintéticos antisense, causa efeito neuroprotetor em células dopaminérgicas SH-SY5Y lesadas pela rotenona. A inibição deste mesmo microRNA também causou neuroproteção nos modelos de epilepsia por ácido caínico e lítio-pilocarpina (Hu et al., 2012; Sano et al., 2012). Estudo anterior também mostrou efeito neuroprotetor mediante a inibição de um outro microRNA, miR-134, em modelo de epilepsia (Jimenez-Mateos et al., 2012). Até onde nosso conhecimento alcança, antagomirs para miR-34a e para miR-134 ainda não foram testados em modelos animais de Parkinson. Com base no exposto, o presente estudo visa avaliar a eficácia da injeção intracerebral e endovenosa de inibidores de miR-34a e miR-134 no controle da neurodegeneração dopaminérgica causada pela rotenona no estriado, hipocampo e córtex préfrontal de ratos. Os resultados deste estudo servirão para elucidar o potencial biotecnológico de antagomirs sintéticos na terapêutica do Parkinson. O atual projeto contribuirá, também, para avaliar se o uso de campos magnéticos próximos às regiões cerebrais de interesse é estratégia eficaz para vetorização de magnetolipossomas carreadores dos antagomirs sintéticos.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante.

• 2015 - Atual

  Implantação de Rede de Cooperação Acadêmica para estudo experimental e pré-clínico com foco na Doença de Parkinson, Descrição: Aprovado no EDITAL CNPq/MS/SCTIE/DECIT Nº 27/2014 - Pesquisas sobre Doenças Neurodegenerativas. Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é um distúrbio neurológico que culmina com prejuízos na atividade motora, impacto na qualidade de vida dos pacientes, desfecho crônico-degenerativo, prevalência na sociedade e, finalmente, apresenta sérias limitações de eficácia medicamentosa. Pesquisas concentradas na última década revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, em particular na degeneração nervosa. Em busca de elucidar a participação de microRNAs no Parkinson, bem como investigar o papel de neurotransmissões não-dopaminérgicas nos gânglios da base do encéfalo, uma equipe proponente (Pós-graduação em Fisiologia, FMRP, USP) e duas equipes associadas (PPG em Ciências da Saúde, UnB, e PPG em Saúde e Desenvolvimento na Região Centro-Oeste, UFMS), com competências complementares, histórico de parceria e experiência comprovada na área temática, reuniram-se para propor o atual projeto de pesquisa. A equipe proponente será responsável pelo planejamento geral das atividades e articulação entre os grupos de pesquisa, contribuindo também com o modelo de discinesia por L-DOPA no modelo da 6-OHDA, para os ensaios de interferência de RNA. A equipe associada da UnB irá realizar estudos em modelos animais e em pacientes hospitalares sobre a expressão e o papel de microRNAs na Doença de Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador.

• 2011 - 2015

  Desenvolvimento tecnológico de vetores reguláveis para expressão de hairpins de RNA direcionados às variantes de splicing nNOS-alfa, nNOS-beta e nNOS-gama, visando a terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto visa elucidar o papel de variantes de splicing da enzima nNOS (nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama) na proliferação tumoral do glioma. Apresenta duas metas principais, sendo a primeira o desenvolvimento e teste de seqüências de RNA em dupla fita para RNAi sobre cada variante de splicing de nNOS de gliomas humanos e de rato em cultura, avaliando assim os níveis de expressão da enzima nNOS e a atividade proliferativa celular. A segunda meta é desenvolver e testar vetores de expressão de hairpins de RNAi, para alvos que apresentem atividade antiproliferativa. Pretende-se, desta forma, gerar novos conhecimentos sobre o papel da NO sintase e seus variantes de splicing no desenvolvimento tumoral do glioma e, paralelamente, desenvolver vetores de expressão com potencial uso em plataformas tecnológicas de expressão de RNAi para terapêutica do câncer.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (3) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2011 - Atual

  Interferência de RNA sobre a enzima NO sintase neuronal (nNOS) para terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto situa-se na área prioritária de doenças crônico-degenerativas e visa desenvolver uma terapia gênica para o glioma, baseada em interferência de RNA sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. O câncer uma doença responsável por 7,1 milhões de mortes anuais, o que corresponde a 12,6% do total de óbitos. Os tumores cerebrais malignos, por sua vez, apresentam altas taxas de morbidade e mortalidade - em particular os gliomas malignos em adultos e os meduloblastomas em crianças, havendo tempos de sobrevida muito baixos (ex. 15 meses) para as formas mais agressivas como o glioblastoma. Estudos anteriores mostram correlação entre a expressão da enzima nNOS e o desenvolvimento tumoral e, neste sentido, o uso de inibidores desta mesma enzima pode reduzir o crescimento de alguns tipos de tumores. Desta forma, o silenciamento gênico da enzima nNOS via RNAi poderá reduzir o desenvolvimento tumoral, gerando uma terapia gênica efetiva para o glioma.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2009 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? estudo comparativo da farmacocinética e toxicologia do antifúngico Anfotericina B estruturado em nanocápsulas de PLGA-DMSA (Nanoanf, patente PI 0700446-0, 2007) e em lipossomas (Ambisome®)., Descrição: A atual proposta é uma pesquisa tecnológica e de inovação, com componente científico, representando a continuidade do projeto ?Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? farmacocinética da anfotericina B com ácido dimercaptosuccínico nanoencapsulada em polímero de ácido polilático-poliglicólico (AMB-PLGA)?, aprovado no edital MCT/CNPq 15/2007 - Universal - Faixa A - Até R$ 20.000,00. O projeto está em andamento, tendo concluído as etapas de validação do método de HPLC e da padronização da extração da anfotericina B da nanopartícula e dos tecidos; estudos de farmacocinética estão planejados para outubro de 2008. No entanto, a caracterização desta preparação de anfotericina B (NanoAnf) patenteada por nosso grupo (PI 220708667. 2007) exige estudos complementares que mostrem as reais vantagens de farmacocinética (ex. maior intervalo posológico, aumento da concentração pulmonar do fármaco) e de segurança (redução da nefrotoxicidade), em relação a um produto comercial disponível (ex. anfotericina lipossomal, Ambisome®). Assim, o atual projeto objetiva gerar dados complementares sobre farmacocinética e toxicidade da NanoAnf em comparação com dois medicamentos comerciais, anfotericina B e aquele estruturado em lipossomas (Ambisome®). Serão determinados, comparativamente para os três medicamentos, os parâmetros de biodisponibilidade Cmax, Tmax e AUC, bem como a meia-vida, o volume de distribuição, o clearence, e as taxas de excreção urinária e fecal. Será também definida a dose máxima tolerada, mediante administração de doses progressivas dos fármacos, visando determinar a maior dose de NanoAnf que não cause alterações renais, hepáticas ou mortalidade. Quanto aos produtos gerados, a execução do atual projeto permitirá o depósito de uma nova patente contendo os resultados do presente estudo, somados a resultados de outro projeto voltado ao scaling up para produção em escala industrial. Serão publicados dois artigos científicos, um com foco nas met. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2008 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de nanopartículas de PLGA-DMSA carreadoras de anfotericina B: caracterização das partículas (físico-química, morfologia, biodistribuição, farmacocinética) e análise de parâmetros de scaling up para produção em escala industrial, Descrição: O atual projeto objetiva realizar a caracterização físico-química e morfológica de nanopartículas de poli ácido (lático-co-glicólico), PLGA, com ácido dimercaptosuccínico - DMSA, carreadoras de anfotericina B. Serão também investigados parâmetros de farmacocinética, biodistribuição e condições de scaling up para produção em escala industrial. O desenvolvimento de formulações de medicamentos estruturadas em nanopartículas é uma área de inovação tecnológica muito promissora, tendo recebido investimentos da indústria farmacêutica e citações de prioridade em políticas de ciência e tecnologia, como a PITCE. Estas novas formulações permitiriam vários avanços terapêuticos, incluindo liberação controlada, redução de toxicidade e vetorização para órgãos de interesse. Este conjunto de vantagens é particularmente importante para medicamentos eficazes, mas que apresentam toxicidade elevada, como é o caso do antifúngico anfotericina B. Assim, foram desenvolvidas preparações comerciais baseadas em lipossomas ou lipídeos, por exemplo, mas que apresentam limitações farmacocinéticas e são de custo elevado. Neste sentido, nosso grupo de pesquisa desenvolveu uma nova formulação de anfotericina B estruturada em polímero de PLGA, contendo DMSA para vetorização ao pulmão. O sistema mostrou eficácia terapêutica em modelo de micose sistêmica, sem efeitos colaterais importantes, e com melhor intervalo posológico, resultando no depósito de uma patente e na preparação de um artigo científico. O atual projeto pretende melhor caracterizar esta preparação, realizando testes físico-químicos, ensaios de farmacocinética e de biodistribuição, visando a futura transferência de tecnologia para o setor produtivo. Assim, serão também realizados experimentos de scaling up para definição de parâmetros visando a produção em escala industrial. O projeto apresenta alto grau de alinhamento com as políticas de ciência e tecnologia do País, sendo encaminhado por equipe qualificada, com infra-estrutura laborato. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Maria Sueli Soares Felipe - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa., Número de produções C, T & A: 1

• 2008 - Atual

  Nanotecnologia aplicada à terapia gênica via RNAi no Parkinson experimental, Descrição: O atual projeto situa-se no campo da terapia gênica do Parkinson experimental, com foco na interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. Estudos anteriores mostram que esta enzima tem papel nos eventos celulares que levam à morte neuronal e, conseqüentemente, à neurodegeneração. O óxido nítrico é molécula gasosa produzida como radical livre no processo de conversão da L-arginina em citrulina, pela enzima nNOS. A nNOS apresenta 4 variantes de splicing funcionais: nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama e nNOS-mu, que serviram de base para desenho de estruturas genéticas de RNAi. No sentido biotecnológico, e de acordo com o objetivo do atual projeto, pode-se observar uma crescente demanda de mercado por novos produtos farmacêuticos baseados em terapia gênica. Neste mesmo ramo da terapia gênica, torna-se altamente promissora a metodologia da interferência de RNA (RNAi), recentemente descrita para silenciamento de genes específicos, e que tem revolucionado trabalhos científicos e de desenvolvimento tecnológico. Com base no acima exposto, o atual projeto tem como objetivo o desenho e teste de estruturas genéticas para interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima nNOS, visando a terapia gênica do Parkinson experimental. Desta forma, visa atender às seguintes demandas biotecnológicas: 1. Sistemas de expressão gênica eficazes para terapia do Parkinson experimental, com foco em interferência de RNA. 2. Sistemas de liberação de material genético baseados em lipossomas funcionalizados ou em nanocápsulas poliméricas (PLGA), ambos capazes de ultrapassar a barreira hematoencefálica e liberar DNA plasmidial em áreas cerebrais afetadas pelo Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 3

• 2015 - Atual

  Implantação de Rede de Cooperação Acadêmica para estudo experimental e pré-clínico com foco na Doença de Parkinson, Descrição: Aprovado no EDITAL CNPq/MS/SCTIE/DECIT Nº 27/2014 - Pesquisas sobre Doenças Neurodegenerativas. Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é um distúrbio neurológico que culmina com prejuízos na atividade motora, impacto na qualidade de vida dos pacientes, desfecho crônico-degenerativo, prevalência na sociedade e, finalmente, apresenta sérias limitações de eficácia medicamentosa. Pesquisas concentradas na última década revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, em particular na degeneração nervosa. Em busca de elucidar a participação de microRNAs no Parkinson, bem como investigar o papel de neurotransmissões não-dopaminérgicas nos gânglios da base do encéfalo, uma equipe proponente (Pós-graduação em Fisiologia, FMRP, USP) e duas equipes associadas (PPG em Ciências da Saúde, UnB, e PPG em Saúde e Desenvolvimento na Região Centro-Oeste, UFMS), com competências complementares, histórico de parceria e experiência comprovada na área temática, reuniram-se para propor o atual projeto de pesquisa. A equipe proponente será responsável pelo planejamento geral das atividades e articulação entre os grupos de pesquisa, contribuindo também com o modelo de discinesia por L-DOPA no modelo da 6-OHDA, para os ensaios de interferência de RNA. A equipe associada da UnB irá realizar estudos em modelos animais e em pacientes hospitalares sobre a expressão e o papel de microRNAs na Doença de Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador.

• 2015 - Atual

  Terapia gênica do Parkinson experimental via inibidores de miR-34a e miR-134 nanoestruturados em magnetolipossomas., Descrição: Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é uma enfermidade crônico-degenerativa do sistema nervoso, que culmina com prejuízos na atividade motora e impacto na qualidade de vida dos pacientes; trata-se da segunda doença neurodegenerativa mais prevalente e que apresenta sérias limitações quanto à eficácia medicamentosa (Baumann, 2012). Pesquisas concentradas nas últimas décadas revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, incluindo aquelas neurológicas. Neste sentido, alterações na expressão de microRNAs têm sido descritas na doença de Parkinson (Mouradian, 2012; Miñones-Moyano, 2011; Harraz, 2011). Estudos mostram, ainda, que a degeneração de neurônios dopaminérgicos no Parkinson esporádico ocorre particularmente em células que apresentam os denominados corpos de Lewy, que são agregados de proteínas, em particular alfa-sinucleína e ubiquitina (Dauer & Przedborski, 2003). Dentre os vários modelos animais válidos para estudo desta doença, apenas o que utiliza a rotenona resulta na formação deste achado neuropatológico clássico do Parkinson (Uversky, 2004; Bove, 2005). Retomando a temática dos microRNAs, nosso grupo já verificou que a inibição específica de miR-34a, via oligonucleotídeos sintéticos antisense, causa efeito neuroprotetor em células dopaminérgicas SH-SY5Y lesadas pela rotenona. A inibição deste mesmo microRNA também causou neuroproteção nos modelos de epilepsia por ácido caínico e lítio-pilocarpina (Hu et al., 2012; Sano et al., 2012). Estudo anterior também mostrou efeito neuroprotetor mediante a inibição de um outro microRNA, miR-134, em modelo de epilepsia (Jimenez-Mateos et al., 2012). Até onde nosso conhecimento alcança, antagomirs para miR-34a e para miR-134 ainda não foram testados em modelos animais de Parkinson. Com base no exposto, o presente estudo visa avaliar a eficácia da injeção intracerebral e endovenosa de inibidores de miR-34a e miR-134 no controle da neurodegeneração dopaminérgica causada pela rotenona no estriado, hipocampo e córtex préfrontal de ratos. Os resultados deste estudo servirão para elucidar o potencial biotecnológico de antagomirs sintéticos na terapêutica do Parkinson. O atual projeto contribuirá, também, para avaliar se o uso de campos magnéticos próximos às regiões cerebrais de interesse é estratégia eficaz para vetorização de magnetolipossomas carreadores dos antagomirs sintéticos.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante.

• 2011 - 2015

  Desenvolvimento tecnológico de vetores reguláveis para expressão de hairpins de RNA direcionados às variantes de splicing nNOS-alfa, nNOS-beta e nNOS-gama, visando a terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto visa elucidar o papel de variantes de splicing da enzima nNOS (nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama) na proliferação tumoral do glioma. Apresenta duas metas principais, sendo a primeira o desenvolvimento e teste de seqüências de RNA em dupla fita para RNAi sobre cada variante de splicing de nNOS de gliomas humanos e de rato em cultura, avaliando assim os níveis de expressão da enzima nNOS e a atividade proliferativa celular. A segunda meta é desenvolver e testar vetores de expressão de hairpins de RNAi, para alvos que apresentem atividade antiproliferativa. Pretende-se, desta forma, gerar novos conhecimentos sobre o papel da NO sintase e seus variantes de splicing no desenvolvimento tumoral do glioma e, paralelamente, desenvolver vetores de expressão com potencial uso em plataformas tecnológicas de expressão de RNAi para terapêutica do câncer.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (3) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2011 - Atual

  Interferência de RNA sobre a enzima NO sintase neuronal (nNOS) para terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto situa-se na área prioritária de doenças crônico-degenerativas e visa desenvolver uma terapia gênica para o glioma, baseada em interferência de RNA sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. O câncer uma doença responsável por 7,1 milhões de mortes anuais, o que corresponde a 12,6% do total de óbitos. Os tumores cerebrais malignos, por sua vez, apresentam altas taxas de morbidade e mortalidade - em particular os gliomas malignos em adultos e os meduloblastomas em crianças, havendo tempos de sobrevida muito baixos (ex. 15 meses) para as formas mais agressivas como o glioblastoma. Estudos anteriores mostram correlação entre a expressão da enzima nNOS e o desenvolvimento tumoral e, neste sentido, o uso de inibidores desta mesma enzima pode reduzir o crescimento de alguns tipos de tumores. Desta forma, o silenciamento gênico da enzima nNOS via RNAi poderá reduzir o desenvolvimento tumoral, gerando uma terapia gênica efetiva para o glioma.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2009 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? estudo comparativo da farmacocinética e toxicologia do antifúngico Anfotericina B estruturado em nanocápsulas de PLGA-DMSA (Nanoanf, patente PI 0700446-0, 2007) e em lipossomas (Ambisome®)., Descrição: A atual proposta é uma pesquisa tecnológica e de inovação, com componente científico, representando a continuidade do projeto ?Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? farmacocinética da anfotericina B com ácido dimercaptosuccínico nanoencapsulada em polímero de ácido polilático-poliglicólico (AMB-PLGA)?, aprovado no edital MCT/CNPq 15/2007 - Universal - Faixa A - Até R$ 20.000,00. O projeto está em andamento, tendo concluído as etapas de validação do método de HPLC e da padronização da extração da anfotericina B da nanopartícula e dos tecidos; estudos de farmacocinética estão planejados para outubro de 2008. No entanto, a caracterização desta preparação de anfotericina B (NanoAnf) patenteada por nosso grupo (PI 220708667. 2007) exige estudos complementares que mostrem as reais vantagens de farmacocinética (ex. maior intervalo posológico, aumento da concentração pulmonar do fármaco) e de segurança (redução da nefrotoxicidade), em relação a um produto comercial disponível (ex. anfotericina lipossomal, Ambisome®). Assim, o atual projeto objetiva gerar dados complementares sobre farmacocinética e toxicidade da NanoAnf em comparação com dois medicamentos comerciais, anfotericina B e aquele estruturado em lipossomas (Ambisome®). Serão determinados, comparativamente para os três medicamentos, os parâmetros de biodisponibilidade Cmax, Tmax e AUC, bem como a meia-vida, o volume de distribuição, o clearence, e as taxas de excreção urinária e fecal. Será também definida a dose máxima tolerada, mediante administração de doses progressivas dos fármacos, visando determinar a maior dose de NanoAnf que não cause alterações renais, hepáticas ou mortalidade. Quanto aos produtos gerados, a execução do atual projeto permitirá o depósito de uma nova patente contendo os resultados do presente estudo, somados a resultados de outro projeto voltado ao scaling up para produção em escala industrial. Serão publicados dois artigos científicos, um com foco nas met. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2008 - Atual

  Nanotecnologia aplicada à terapia gênica via RNAi no Parkinson experimental, Descrição: O atual projeto situa-se no campo da terapia gênica do Parkinson experimental, com foco na interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. Estudos anteriores mostram que esta enzima tem papel nos eventos celulares que levam à morte neuronal e, conseqüentemente, à neurodegeneração. O óxido nítrico é molécula gasosa produzida como radical livre no processo de conversão da L-arginina em citrulina, pela enzima nNOS. A nNOS apresenta 4 variantes de splicing funcionais: nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama e nNOS-mu, que serviram de base para desenho de estruturas genéticas de RNAi. No sentido biotecnológico, e de acordo com o objetivo do atual projeto, pode-se observar uma crescente demanda de mercado por novos produtos farmacêuticos baseados em terapia gênica. Neste mesmo ramo da terapia gênica, torna-se altamente promissora a metodologia da interferência de RNA (RNAi), recentemente descrita para silenciamento de genes específicos, e que tem revolucionado trabalhos científicos e de desenvolvimento tecnológico. Com base no acima exposto, o atual projeto tem como objetivo o desenho e teste de estruturas genéticas para interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima nNOS, visando a terapia gênica do Parkinson experimental. Desta forma, visa atender às seguintes demandas biotecnológicas: 1. Sistemas de expressão gênica eficazes para terapia do Parkinson experimental, com foco em interferência de RNA. 2. Sistemas de liberação de material genético baseados em lipossomas funcionalizados ou em nanocápsulas poliméricas (PLGA), ambos capazes de ultrapassar a barreira hematoencefálica e liberar DNA plasmidial em áreas cerebrais afetadas pelo Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 3

• 2008 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de nanopartículas de PLGA-DMSA carreadoras de anfotericina B: caracterização das partículas (físico-química, morfologia, biodistribuição, farmacocinética) e análise de parâmetros de scaling up para produção em escala industrial, Descrição: O atual projeto objetiva realizar a caracterização físico-química e morfológica de nanopartículas de poli ácido (lático-co-glicólico), PLGA, com ácido dimercaptosuccínico - DMSA, carreadoras de anfotericina B. Serão também investigados parâmetros de farmacocinética, biodistribuição e condições de scaling up para produção em escala industrial. O desenvolvimento de formulações de medicamentos estruturadas em nanopartículas é uma área de inovação tecnológica muito promissora, tendo recebido investimentos da indústria farmacêutica e citações de prioridade em políticas de ciência e tecnologia, como a PITCE. Estas novas formulações permitiriam vários avanços terapêuticos, incluindo liberação controlada, redução de toxicidade e vetorização para órgãos de interesse. Este conjunto de vantagens é particularmente importante para medicamentos eficazes, mas que apresentam toxicidade elevada, como é o caso do antifúngico anfotericina B. Assim, foram desenvolvidas preparações comerciais baseadas em lipossomas ou lipídeos, por exemplo, mas que apresentam limitações farmacocinéticas e são de custo elevado. Neste sentido, nosso grupo de pesquisa desenvolveu uma nova formulação de anfotericina B estruturada em polímero de PLGA, contendo DMSA para vetorização ao pulmão. O sistema mostrou eficácia terapêutica em modelo de micose sistêmica, sem efeitos colaterais importantes, e com melhor intervalo posológico, resultando no depósito de uma patente e na preparação de um artigo científico. O atual projeto pretende melhor caracterizar esta preparação, realizando testes físico-químicos, ensaios de farmacocinética e de biodistribuição, visando a futura transferência de tecnologia para o setor produtivo. Assim, serão também realizados experimentos de scaling up para definição de parâmetros visando a produção em escala industrial. O projeto apresenta alto grau de alinhamento com as políticas de ciência e tecnologia do País, sendo encaminhado por equipe qualificada, com infra-estrutura laborato. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Maria Sueli Soares Felipe - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa., Número de produções C, T & A: 1

• 2015 - Atual

  Implantação de Rede de Cooperação Acadêmica para estudo experimental e pré-clínico com foco na Doença de Parkinson, Descrição: Aprovado no EDITAL CNPq/MS/SCTIE/DECIT Nº 27/2014 - Pesquisas sobre Doenças Neurodegenerativas. Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é um distúrbio neurológico que culmina com prejuízos na atividade motora, impacto na qualidade de vida dos pacientes, desfecho crônico-degenerativo, prevalência na sociedade e, finalmente, apresenta sérias limitações de eficácia medicamentosa. Pesquisas concentradas na última década revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, em particular na degeneração nervosa. Em busca de elucidar a participação de microRNAs no Parkinson, bem como investigar o papel de neurotransmissões não-dopaminérgicas nos gânglios da base do encéfalo, uma equipe proponente (Pós-graduação em Fisiologia, FMRP, USP) e duas equipes associadas (PPG em Ciências da Saúde, UnB, e PPG em Saúde e Desenvolvimento na Região Centro-Oeste, UFMS), com competências complementares, histórico de parceria e experiência comprovada na área temática, reuniram-se para propor o atual projeto de pesquisa. A equipe proponente será responsável pelo planejamento geral das atividades e articulação entre os grupos de pesquisa, contribuindo também com o modelo de discinesia por L-DOPA no modelo da 6-OHDA, para os ensaios de interferência de RNA. A equipe associada da UnB irá realizar estudos em modelos animais e em pacientes hospitalares sobre a expressão e o papel de microRNAs na Doença de Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento.

• 2015 - Atual

  Terapia gênica do Parkinson experimental via inibidores de miR-34a e miR-134 nanoestruturados em magnetolipossomas., Descrição: Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é uma enfermidade crônico-degenerativa do sistema nervoso, que culmina com prejuízos na atividade motora e impacto na qualidade de vida dos pacientes; trata-se da segunda doença neurodegenerativa mais prevalente e que apresenta sérias limitações quanto à eficácia medicamentosa (Baumann, 2012). Pesquisas concentradas nas últimas décadas revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, incluindo aquelas neurológicas. Neste sentido, alterações na expressão de microRNAs têm sido descritas na doença de Parkinson (Mouradian, 2012; Miñones-Moyano, 2011; Harraz, 2011). Estudos mostram, ainda, que a degeneração de neurônios dopaminérgicos no Parkinson esporádico ocorre particularmente em células que apresentam os denominados corpos de Lewy, que são agregados de proteínas, em particular alfa-sinucleína e ubiquitina (Dauer & Przedborski, 2003). Dentre os vários modelos animais válidos para estudo desta doença, apenas o que utiliza a rotenona resulta na formação deste achado neuropatológico clássico do Parkinson (Uversky, 2004; Bove, 2005). Retomando a temática dos microRNAs, nosso grupo já verificou que a inibição específica de miR-34a, via oligonucleotídeos sintéticos antisense, causa efeito neuroprotetor em células dopaminérgicas SH-SY5Y lesadas pela rotenona. A inibição deste mesmo microRNA também causou neuroproteção nos modelos de epilepsia por ácido caínico e lítio-pilocarpina (Hu et al., 2012; Sano et al., 2012). Estudo anterior também mostrou efeito neuroprotetor mediante a inibição de um outro microRNA, miR-134, em modelo de epilepsia (Jimenez-Mateos et al., 2012). Até onde nosso conhecimento alcança, antagomirs para miR-34a e para miR-134 ainda não foram testados em modelos animais de Parkinson. Com base no exposto, o presente estudo visa avaliar a eficácia da injeção intracerebral e endovenosa de inibidores de miR-34a e miR-134 no controle da neurodegeneração dopaminérgica causada pela rotenona no estriado, hipocampo e córtex préfrontal de ratos. Os resultados deste estudo servirão para elucidar o potencial biotecnológico de antagomirs sintéticos na terapêutica do Parkinson. O atual projeto contribuirá, também, para avaliar se o uso de campos magnéticos próximos às regiões cerebrais de interesse é estratégia eficaz para vetorização de magnetolipossomas carreadores dos antagomirs sintéticos.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento.

• 2011 - 2015

  Desenvolvimento tecnológico de vetores reguláveis para expressão de hairpins de RNA direcionados às variantes de splicing nNOS-alfa, nNOS-beta e nNOS-gama, visando a terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto visa elucidar o papel de variantes de splicing da enzima nNOS (nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama) na proliferação tumoral do glioma. Apresenta duas metas principais, sendo a primeira o desenvolvimento e teste de seqüências de RNA em dupla fita para RNAi sobre cada variante de splicing de nNOS de gliomas humanos e de rato em cultura, avaliando assim os níveis de expressão da enzima nNOS e a atividade proliferativa celular. A segunda meta é desenvolver e testar vetores de expressão de hairpins de RNAi, para alvos que apresentem atividade antiproliferativa. Pretende-se, desta forma, gerar novos conhecimentos sobre o papel da NO sintase e seus variantes de splicing no desenvolvimento tumoral do glioma e, paralelamente, desenvolver vetores de expressão com potencial uso em plataformas tecnológicas de expressão de RNAi para terapêutica do câncer.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (3) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante / Walter Stuhmer - Integrante.Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2011 - Atual

  Interferência de RNA sobre a enzima NO sintase neuronal (nNOS) para terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto situa-se na área prioritária de doenças crônico-degenerativas e visa desenvolver uma terapia gênica para o glioma, baseada em interferência de RNA sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. O câncer uma doença responsável por 7,1 milhões de mortes anuais, o que corresponde a 12,6% do total de óbitos. Os tumores cerebrais malignos, por sua vez, apresentam altas taxas de morbidade e mortalidade - em particular os gliomas malignos em adultos e os meduloblastomas em crianças, havendo tempos de sobrevida muito baixos (ex. 15 meses) para as formas mais agressivas como o glioblastoma. Estudos anteriores mostram correlação entre a expressão da enzima nNOS e o desenvolvimento tumoral e, neste sentido, o uso de inibidores desta mesma enzima pode reduzir o crescimento de alguns tipos de tumores. Desta forma, o silenciamento gênico da enzima nNOS via RNAi poderá reduzir o desenvolvimento tumoral, gerando uma terapia gênica efetiva para o glioma.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante.Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2009 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? estudo comparativo da farmacocinética e toxicologia do antifúngico Anfotericina B estruturado em nanocápsulas de PLGA-DMSA (Nanoanf, patente PI 0700446-0, 2007) e em lipossomas (Ambisome®)., Descrição: A atual proposta é uma pesquisa tecnológica e de inovação, com componente científico, representando a continuidade do projeto ?Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? farmacocinética da anfotericina B com ácido dimercaptosuccínico nanoencapsulada em polímero de ácido polilático-poliglicólico (AMB-PLGA)?, aprovado no edital MCT/CNPq 15/2007 - Universal - Faixa A - Até R$ 20.000,00. O projeto está em andamento, tendo concluído as etapas de validação do método de HPLC e da padronização da extração da anfotericina B da nanopartícula e dos tecidos; estudos de farmacocinética estão planejados para outubro de 2008. No entanto, a caracterização desta preparação de anfotericina B (NanoAnf) patenteada por nosso grupo (PI 220708667. 2007) exige estudos complementares que mostrem as reais vantagens de farmacocinética (ex. maior intervalo posológico, aumento da concentração pulmonar do fármaco) e de segurança (redução da nefrotoxicidade), em relação a um produto comercial disponível (ex. anfotericina lipossomal, Ambisome®). Assim, o atual projeto objetiva gerar dados complementares sobre farmacocinética e toxicidade da NanoAnf em comparação com dois medicamentos comerciais, anfotericina B e aquele estruturado em lipossomas (Ambisome®). Serão determinados, comparativamente para os três medicamentos, os parâmetros de biodisponibilidade Cmax, Tmax e AUC, bem como a meia-vida, o volume de distribuição, o clearence, e as taxas de excreção urinária e fecal. Será também definida a dose máxima tolerada, mediante administração de doses progressivas dos fármacos, visando determinar a maior dose de NanoAnf que não cause alterações renais, hepáticas ou mortalidade. Quanto aos produtos gerados, a execução do atual projeto permitirá o depósito de uma nova patente contendo os resultados do presente estudo, somados a resultados de outro projeto voltado ao scaling up para produção em escala industrial. Serão publicados dois artigos científicos, um com foco nas met. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante.Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2008 - Atual

  Nanotecnologia aplicada à terapia gênica via RNAi no Parkinson experimental, Descrição: O atual projeto situa-se no campo da terapia gênica do Parkinson experimental, com foco na interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. Estudos anteriores mostram que esta enzima tem papel nos eventos celulares que levam à morte neuronal e, conseqüentemente, à neurodegeneração. O óxido nítrico é molécula gasosa produzida como radical livre no processo de conversão da L-arginina em citrulina, pela enzima nNOS. A nNOS apresenta 4 variantes de splicing funcionais: nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama e nNOS-mu, que serviram de base para desenho de estruturas genéticas de RNAi. No sentido biotecnológico, e de acordo com o objetivo do atual projeto, pode-se observar uma crescente demanda de mercado por novos produtos farmacêuticos baseados em terapia gênica. Neste mesmo ramo da terapia gênica, torna-se altamente promissora a metodologia da interferência de RNA (RNAi), recentemente descrita para silenciamento de genes específicos, e que tem revolucionado trabalhos científicos e de desenvolvimento tecnológico. Com base no acima exposto, o atual projeto tem como objetivo o desenho e teste de estruturas genéticas para interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima nNOS, visando a terapia gênica do Parkinson experimental. Desta forma, visa atender às seguintes demandas biotecnológicas: 1. Sistemas de expressão gênica eficazes para terapia do Parkinson experimental, com foco em interferência de RNA. 2. Sistemas de liberação de material genético baseados em lipossomas funcionalizados ou em nanocápsulas poliméricas (PLGA), ambos capazes de ultrapassar a barreira hematoencefálica e liberar DNA plasmidial em áreas cerebrais afetadas pelo Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador / Walter Stuhmer - Integrante.Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 3

• 2008 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de nanopartículas de PLGA-DMSA carreadoras de anfotericina B: caracterização das partículas (físico-química, morfologia, biodistribuição, farmacocinética) e análise de parâmetros de scaling up para produção em escala industrial, Descrição: O atual projeto objetiva realizar a caracterização físico-química e morfológica de nanopartículas de poli ácido (lático-co-glicólico), PLGA, com ácido dimercaptosuccínico - DMSA, carreadoras de anfotericina B. Serão também investigados parâmetros de farmacocinética, biodistribuição e condições de scaling up para produção em escala industrial. O desenvolvimento de formulações de medicamentos estruturadas em nanopartículas é uma área de inovação tecnológica muito promissora, tendo recebido investimentos da indústria farmacêutica e citações de prioridade em políticas de ciência e tecnologia, como a PITCE. Estas novas formulações permitiriam vários avanços terapêuticos, incluindo liberação controlada, redução de toxicidade e vetorização para órgãos de interesse. Este conjunto de vantagens é particularmente importante para medicamentos eficazes, mas que apresentam toxicidade elevada, como é o caso do antifúngico anfotericina B. Assim, foram desenvolvidas preparações comerciais baseadas em lipossomas ou lipídeos, por exemplo, mas que apresentam limitações farmacocinéticas e são de custo elevado. Neste sentido, nosso grupo de pesquisa desenvolveu uma nova formulação de anfotericina B estruturada em polímero de PLGA, contendo DMSA para vetorização ao pulmão. O sistema mostrou eficácia terapêutica em modelo de micose sistêmica, sem efeitos colaterais importantes, e com melhor intervalo posológico, resultando no depósito de uma patente e na preparação de um artigo científico. O atual projeto pretende melhor caracterizar esta preparação, realizando testes físico-químicos, ensaios de farmacocinética e de biodistribuição, visando a futura transferência de tecnologia para o setor produtivo. Assim, serão também realizados experimentos de scaling up para definição de parâmetros visando a produção em escala industrial. O projeto apresenta alto grau de alinhamento com as políticas de ciência e tecnologia do País, sendo encaminhado por equipe qualificada, com infra-estrutura laborato. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Maria Sueli Soares Felipe - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante.Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa., Número de produções C, T & A: 1

• 2015 - Atual

  Terapia gênica do Parkinson experimental via inibidores de miR-34a e miR-134 nanoestruturados em magnetolipossomas., Descrição: Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é uma enfermidade crônico-degenerativa do sistema nervoso, que culmina com prejuízos na atividade motora e impacto na qualidade de vida dos pacientes; trata-se da segunda doença neurodegenerativa mais prevalente e que apresenta sérias limitações quanto à eficácia medicamentosa (Baumann, 2012). Pesquisas concentradas nas últimas décadas revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, incluindo aquelas neurológicas. Neste sentido, alterações na expressão de microRNAs têm sido descritas na doença de Parkinson (Mouradian, 2012; Miñones-Moyano, 2011; Harraz, 2011). Estudos mostram, ainda, que a degeneração de neurônios dopaminérgicos no Parkinson esporádico ocorre particularmente em células que apresentam os denominados corpos de Lewy, que são agregados de proteínas, em particular alfa-sinucleína e ubiquitina (Dauer & Przedborski, 2003). Dentre os vários modelos animais válidos para estudo desta doença, apenas o que utiliza a rotenona resulta na formação deste achado neuropatológico clássico do Parkinson (Uversky, 2004; Bove, 2005). Retomando a temática dos microRNAs, nosso grupo já verificou que a inibição específica de miR-34a, via oligonucleotídeos sintéticos antisense, causa efeito neuroprotetor em células dopaminérgicas SH-SY5Y lesadas pela rotenona. A inibição deste mesmo microRNA também causou neuroproteção nos modelos de epilepsia por ácido caínico e lítio-pilocarpina (Hu et al., 2012; Sano et al., 2012). Estudo anterior também mostrou efeito neuroprotetor mediante a inibição de um outro microRNA, miR-134, em modelo de epilepsia (Jimenez-Mateos et al., 2012). Até onde nosso conhecimento alcança, antagomirs para miR-34a e para miR-134 ainda não foram testados em modelos animais de Parkinson. Com base no exposto, o presente estudo visa avaliar a eficácia da injeção intracerebral e endovenosa de inibidores de miR-34a e miR-134 no controle da neurodegeneração dopaminérgica causada pela rotenona no estriado, hipocampo e córtex préfrontal de ratos. Os resultados deste estudo servirão para elucidar o potencial biotecnológico de antagomirs sintéticos na terapêutica do Parkinson. O atual projeto contribuirá, também, para avaliar se o uso de campos magnéticos próximos às regiões cerebrais de interesse é estratégia eficaz para vetorização de magnetolipossomas carreadores dos antagomirs sintéticos.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante.

• 2015 - Atual

  Implantação de Rede de Cooperação Acadêmica para estudo experimental e pré-clínico com foco na Doença de Parkinson, Descrição: Aprovado no EDITAL CNPq/MS/SCTIE/DECIT Nº 27/2014 - Pesquisas sobre Doenças Neurodegenerativas. Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é um distúrbio neurológico que culmina com prejuízos na atividade motora, impacto na qualidade de vida dos pacientes, desfecho crônico-degenerativo, prevalência na sociedade e, finalmente, apresenta sérias limitações de eficácia medicamentosa. Pesquisas concentradas na última década revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, em particular na degeneração nervosa. Em busca de elucidar a participação de microRNAs no Parkinson, bem como investigar o papel de neurotransmissões não-dopaminérgicas nos gânglios da base do encéfalo, uma equipe proponente (Pós-graduação em Fisiologia, FMRP, USP) e duas equipes associadas (PPG em Ciências da Saúde, UnB, e PPG em Saúde e Desenvolvimento na Região Centro-Oeste, UFMS), com competências complementares, histórico de parceria e experiência comprovada na área temática, reuniram-se para propor o atual projeto de pesquisa. A equipe proponente será responsável pelo planejamento geral das atividades e articulação entre os grupos de pesquisa, contribuindo também com o modelo de discinesia por L-DOPA no modelo da 6-OHDA, para os ensaios de interferência de RNA. A equipe associada da UnB irá realizar estudos em modelos animais e em pacientes hospitalares sobre a expressão e o papel de microRNAs na Doença de Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador.

• 2011 - 2015

  Desenvolvimento tecnológico de vetores reguláveis para expressão de hairpins de RNA direcionados às variantes de splicing nNOS-alfa, nNOS-beta e nNOS-gama, visando a terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto visa elucidar o papel de variantes de splicing da enzima nNOS (nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama) na proliferação tumoral do glioma. Apresenta duas metas principais, sendo a primeira o desenvolvimento e teste de seqüências de RNA em dupla fita para RNAi sobre cada variante de splicing de nNOS de gliomas humanos e de rato em cultura, avaliando assim os níveis de expressão da enzima nNOS e a atividade proliferativa celular. A segunda meta é desenvolver e testar vetores de expressão de hairpins de RNAi, para alvos que apresentem atividade antiproliferativa. Pretende-se, desta forma, gerar novos conhecimentos sobre o papel da NO sintase e seus variantes de splicing no desenvolvimento tumoral do glioma e, paralelamente, desenvolver vetores de expressão com potencial uso em plataformas tecnológicas de expressão de RNAi para terapêutica do câncer.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (3) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2011 - Atual

  Interferência de RNA sobre a enzima NO sintase neuronal (nNOS) para terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto situa-se na área prioritária de doenças crônico-degenerativas e visa desenvolver uma terapia gênica para o glioma, baseada em interferência de RNA sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. O câncer uma doença responsável por 7,1 milhões de mortes anuais, o que corresponde a 12,6% do total de óbitos. Os tumores cerebrais malignos, por sua vez, apresentam altas taxas de morbidade e mortalidade - em particular os gliomas malignos em adultos e os meduloblastomas em crianças, havendo tempos de sobrevida muito baixos (ex. 15 meses) para as formas mais agressivas como o glioblastoma. Estudos anteriores mostram correlação entre a expressão da enzima nNOS e o desenvolvimento tumoral e, neste sentido, o uso de inibidores desta mesma enzima pode reduzir o crescimento de alguns tipos de tumores. Desta forma, o silenciamento gênico da enzima nNOS via RNAi poderá reduzir o desenvolvimento tumoral, gerando uma terapia gênica efetiva para o glioma.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2009 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? estudo comparativo da farmacocinética e toxicologia do antifúngico Anfotericina B estruturado em nanocápsulas de PLGA-DMSA (Nanoanf, patente PI 0700446-0, 2007) e em lipossomas (Ambisome®)., Descrição: A atual proposta é uma pesquisa tecnológica e de inovação, com componente científico, representando a continuidade do projeto ?Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? farmacocinética da anfotericina B com ácido dimercaptosuccínico nanoencapsulada em polímero de ácido polilático-poliglicólico (AMB-PLGA)?, aprovado no edital MCT/CNPq 15/2007 - Universal - Faixa A - Até R$ 20.000,00. O projeto está em andamento, tendo concluído as etapas de validação do método de HPLC e da padronização da extração da anfotericina B da nanopartícula e dos tecidos; estudos de farmacocinética estão planejados para outubro de 2008. No entanto, a caracterização desta preparação de anfotericina B (NanoAnf) patenteada por nosso grupo (PI 220708667. 2007) exige estudos complementares que mostrem as reais vantagens de farmacocinética (ex. maior intervalo posológico, aumento da concentração pulmonar do fármaco) e de segurança (redução da nefrotoxicidade), em relação a um produto comercial disponível (ex. anfotericina lipossomal, Ambisome®). Assim, o atual projeto objetiva gerar dados complementares sobre farmacocinética e toxicidade da NanoAnf em comparação com dois medicamentos comerciais, anfotericina B e aquele estruturado em lipossomas (Ambisome®). Serão determinados, comparativamente para os três medicamentos, os parâmetros de biodisponibilidade Cmax, Tmax e AUC, bem como a meia-vida, o volume de distribuição, o clearence, e as taxas de excreção urinária e fecal. Será também definida a dose máxima tolerada, mediante administração de doses progressivas dos fármacos, visando determinar a maior dose de NanoAnf que não cause alterações renais, hepáticas ou mortalidade. Quanto aos produtos gerados, a execução do atual projeto permitirá o depósito de uma nova patente contendo os resultados do presente estudo, somados a resultados de outro projeto voltado ao scaling up para produção em escala industrial. Serão publicados dois artigos científicos, um com foco nas met. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2008 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de nanopartículas de PLGA-DMSA carreadoras de anfotericina B: caracterização das partículas (físico-química, morfologia, biodistribuição, farmacocinética) e análise de parâmetros de scaling up para produção em escala industrial, Descrição: O atual projeto objetiva realizar a caracterização físico-química e morfológica de nanopartículas de poli ácido (lático-co-glicólico), PLGA, com ácido dimercaptosuccínico - DMSA, carreadoras de anfotericina B. Serão também investigados parâmetros de farmacocinética, biodistribuição e condições de scaling up para produção em escala industrial. O desenvolvimento de formulações de medicamentos estruturadas em nanopartículas é uma área de inovação tecnológica muito promissora, tendo recebido investimentos da indústria farmacêutica e citações de prioridade em políticas de ciência e tecnologia, como a PITCE. Estas novas formulações permitiriam vários avanços terapêuticos, incluindo liberação controlada, redução de toxicidade e vetorização para órgãos de interesse. Este conjunto de vantagens é particularmente importante para medicamentos eficazes, mas que apresentam toxicidade elevada, como é o caso do antifúngico anfotericina B. Assim, foram desenvolvidas preparações comerciais baseadas em lipossomas ou lipídeos, por exemplo, mas que apresentam limitações farmacocinéticas e são de custo elevado. Neste sentido, nosso grupo de pesquisa desenvolveu uma nova formulação de anfotericina B estruturada em polímero de PLGA, contendo DMSA para vetorização ao pulmão. O sistema mostrou eficácia terapêutica em modelo de micose sistêmica, sem efeitos colaterais importantes, e com melhor intervalo posológico, resultando no depósito de uma patente e na preparação de um artigo científico. O atual projeto pretende melhor caracterizar esta preparação, realizando testes físico-químicos, ensaios de farmacocinética e de biodistribuição, visando a futura transferência de tecnologia para o setor produtivo. Assim, serão também realizados experimentos de scaling up para definição de parâmetros visando a produção em escala industrial. O projeto apresenta alto grau de alinhamento com as políticas de ciência e tecnologia do País, sendo encaminhado por equipe qualificada, com infra-estrutura laborato. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Maria Sueli Soares Felipe - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa., Número de produções C, T & A: 1

• 2008 - Atual

  Nanotecnologia aplicada à terapia gênica via RNAi no Parkinson experimental, Descrição: O atual projeto situa-se no campo da terapia gênica do Parkinson experimental, com foco na interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. Estudos anteriores mostram que esta enzima tem papel nos eventos celulares que levam à morte neuronal e, conseqüentemente, à neurodegeneração. O óxido nítrico é molécula gasosa produzida como radical livre no processo de conversão da L-arginina em citrulina, pela enzima nNOS. A nNOS apresenta 4 variantes de splicing funcionais: nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama e nNOS-mu, que serviram de base para desenho de estruturas genéticas de RNAi. No sentido biotecnológico, e de acordo com o objetivo do atual projeto, pode-se observar uma crescente demanda de mercado por novos produtos farmacêuticos baseados em terapia gênica. Neste mesmo ramo da terapia gênica, torna-se altamente promissora a metodologia da interferência de RNA (RNAi), recentemente descrita para silenciamento de genes específicos, e que tem revolucionado trabalhos científicos e de desenvolvimento tecnológico. Com base no acima exposto, o atual projeto tem como objetivo o desenho e teste de estruturas genéticas para interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima nNOS, visando a terapia gênica do Parkinson experimental. Desta forma, visa atender às seguintes demandas biotecnológicas: 1. Sistemas de expressão gênica eficazes para terapia do Parkinson experimental, com foco em interferência de RNA. 2. Sistemas de liberação de material genético baseados em lipossomas funcionalizados ou em nanocápsulas poliméricas (PLGA), ambos capazes de ultrapassar a barreira hematoencefálica e liberar DNA plasmidial em áreas cerebrais afetadas pelo Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 3

• 2015 - Atual

  Implantação de Rede de Cooperação Acadêmica para estudo experimental e pré-clínico com foco na Doença de Parkinson, Descrição: Aprovado no EDITAL CNPq/MS/SCTIE/DECIT Nº 27/2014 - Pesquisas sobre Doenças Neurodegenerativas. Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é um distúrbio neurológico que culmina com prejuízos na atividade motora, impacto na qualidade de vida dos pacientes, desfecho crônico-degenerativo, prevalência na sociedade e, finalmente, apresenta sérias limitações de eficácia medicamentosa. Pesquisas concentradas na última década revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, em particular na degeneração nervosa. Em busca de elucidar a participação de microRNAs no Parkinson, bem como investigar o papel de neurotransmissões não-dopaminérgicas nos gânglios da base do encéfalo, uma equipe proponente (Pós-graduação em Fisiologia, FMRP, USP) e duas equipes associadas (PPG em Ciências da Saúde, UnB, e PPG em Saúde e Desenvolvimento na Região Centro-Oeste, UFMS), com competências complementares, histórico de parceria e experiência comprovada na área temática, reuniram-se para propor o atual projeto de pesquisa. A equipe proponente será responsável pelo planejamento geral das atividades e articulação entre os grupos de pesquisa, contribuindo também com o modelo de discinesia por L-DOPA no modelo da 6-OHDA, para os ensaios de interferência de RNA. A equipe associada da UnB irá realizar estudos em modelos animais e em pacientes hospitalares sobre a expressão e o papel de microRNAs na Doença de Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador.

• 2015 - Atual

  Terapia gênica do Parkinson experimental via inibidores de miR-34a e miR-134 nanoestruturados em magnetolipossomas., Descrição: Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é uma enfermidade crônico-degenerativa do sistema nervoso, que culmina com prejuízos na atividade motora e impacto na qualidade de vida dos pacientes; trata-se da segunda doença neurodegenerativa mais prevalente e que apresenta sérias limitações quanto à eficácia medicamentosa (Baumann, 2012). Pesquisas concentradas nas últimas décadas revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, incluindo aquelas neurológicas. Neste sentido, alterações na expressão de microRNAs têm sido descritas na doença de Parkinson (Mouradian, 2012; Miñones-Moyano, 2011; Harraz, 2011). Estudos mostram, ainda, que a degeneração de neurônios dopaminérgicos no Parkinson esporádico ocorre particularmente em células que apresentam os denominados corpos de Lewy, que são agregados de proteínas, em particular alfa-sinucleína e ubiquitina (Dauer & Przedborski, 2003). Dentre os vários modelos animais válidos para estudo desta doença, apenas o que utiliza a rotenona resulta na formação deste achado neuropatológico clássico do Parkinson (Uversky, 2004; Bove, 2005). Retomando a temática dos microRNAs, nosso grupo já verificou que a inibição específica de miR-34a, via oligonucleotídeos sintéticos antisense, causa efeito neuroprotetor em células dopaminérgicas SH-SY5Y lesadas pela rotenona. A inibição deste mesmo microRNA também causou neuroproteção nos modelos de epilepsia por ácido caínico e lítio-pilocarpina (Hu et al., 2012; Sano et al., 2012). Estudo anterior também mostrou efeito neuroprotetor mediante a inibição de um outro microRNA, miR-134, em modelo de epilepsia (Jimenez-Mateos et al., 2012). Até onde nosso conhecimento alcança, antagomirs para miR-34a e para miR-134 ainda não foram testados em modelos animais de Parkinson. Com base no exposto, o presente estudo visa avaliar a eficácia da injeção intracerebral e endovenosa de inibidores de miR-34a e miR-134 no controle da neurodegeneração dopaminérgica causada pela rotenona no estriado, hipocampo e córtex préfrontal de ratos. Os resultados deste estudo servirão para elucidar o potencial biotecnológico de antagomirs sintéticos na terapêutica do Parkinson. O atual projeto contribuirá, também, para avaliar se o uso de campos magnéticos próximos às regiões cerebrais de interesse é estratégia eficaz para vetorização de magnetolipossomas carreadores dos antagomirs sintéticos.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante.

• 2011 - 2015

  Desenvolvimento tecnológico de vetores reguláveis para expressão de hairpins de RNA direcionados às variantes de splicing nNOS-alfa, nNOS-beta e nNOS-gama, visando a terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto visa elucidar o papel de variantes de splicing da enzima nNOS (nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama) na proliferação tumoral do glioma. Apresenta duas metas principais, sendo a primeira o desenvolvimento e teste de seqüências de RNA em dupla fita para RNAi sobre cada variante de splicing de nNOS de gliomas humanos e de rato em cultura, avaliando assim os níveis de expressão da enzima nNOS e a atividade proliferativa celular. A segunda meta é desenvolver e testar vetores de expressão de hairpins de RNAi, para alvos que apresentem atividade antiproliferativa. Pretende-se, desta forma, gerar novos conhecimentos sobre o papel da NO sintase e seus variantes de splicing no desenvolvimento tumoral do glioma e, paralelamente, desenvolver vetores de expressão com potencial uso em plataformas tecnológicas de expressão de RNAi para terapêutica do câncer.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (3) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2011 - Atual

  Interferência de RNA sobre a enzima NO sintase neuronal (nNOS) para terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto situa-se na área prioritária de doenças crônico-degenerativas e visa desenvolver uma terapia gênica para o glioma, baseada em interferência de RNA sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. O câncer uma doença responsável por 7,1 milhões de mortes anuais, o que corresponde a 12,6% do total de óbitos. Os tumores cerebrais malignos, por sua vez, apresentam altas taxas de morbidade e mortalidade - em particular os gliomas malignos em adultos e os meduloblastomas em crianças, havendo tempos de sobrevida muito baixos (ex. 15 meses) para as formas mais agressivas como o glioblastoma. Estudos anteriores mostram correlação entre a expressão da enzima nNOS e o desenvolvimento tumoral e, neste sentido, o uso de inibidores desta mesma enzima pode reduzir o crescimento de alguns tipos de tumores. Desta forma, o silenciamento gênico da enzima nNOS via RNAi poderá reduzir o desenvolvimento tumoral, gerando uma terapia gênica efetiva para o glioma.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2009 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? estudo comparativo da farmacocinética e toxicologia do antifúngico Anfotericina B estruturado em nanocápsulas de PLGA-DMSA (Nanoanf, patente PI 0700446-0, 2007) e em lipossomas (Ambisome®)., Descrição: A atual proposta é uma pesquisa tecnológica e de inovação, com componente científico, representando a continuidade do projeto ?Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? farmacocinética da anfotericina B com ácido dimercaptosuccínico nanoencapsulada em polímero de ácido polilático-poliglicólico (AMB-PLGA)?, aprovado no edital MCT/CNPq 15/2007 - Universal - Faixa A - Até R$ 20.000,00. O projeto está em andamento, tendo concluído as etapas de validação do método de HPLC e da padronização da extração da anfotericina B da nanopartícula e dos tecidos; estudos de farmacocinética estão planejados para outubro de 2008. No entanto, a caracterização desta preparação de anfotericina B (NanoAnf) patenteada por nosso grupo (PI 220708667. 2007) exige estudos complementares que mostrem as reais vantagens de farmacocinética (ex. maior intervalo posológico, aumento da concentração pulmonar do fármaco) e de segurança (redução da nefrotoxicidade), em relação a um produto comercial disponível (ex. anfotericina lipossomal, Ambisome®). Assim, o atual projeto objetiva gerar dados complementares sobre farmacocinética e toxicidade da NanoAnf em comparação com dois medicamentos comerciais, anfotericina B e aquele estruturado em lipossomas (Ambisome®). Serão determinados, comparativamente para os três medicamentos, os parâmetros de biodisponibilidade Cmax, Tmax e AUC, bem como a meia-vida, o volume de distribuição, o clearence, e as taxas de excreção urinária e fecal. Será também definida a dose máxima tolerada, mediante administração de doses progressivas dos fármacos, visando determinar a maior dose de NanoAnf que não cause alterações renais, hepáticas ou mortalidade. Quanto aos produtos gerados, a execução do atual projeto permitirá o depósito de uma nova patente contendo os resultados do presente estudo, somados a resultados de outro projeto voltado ao scaling up para produção em escala industrial. Serão publicados dois artigos científicos, um com foco nas met. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2008 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de nanopartículas de PLGA-DMSA carreadoras de anfotericina B: caracterização das partículas (físico-química, morfologia, biodistribuição, farmacocinética) e análise de parâmetros de scaling up para produção em escala industrial, Descrição: O atual projeto objetiva realizar a caracterização físico-química e morfológica de nanopartículas de poli ácido (lático-co-glicólico), PLGA, com ácido dimercaptosuccínico - DMSA, carreadoras de anfotericina B. Serão também investigados parâmetros de farmacocinética, biodistribuição e condições de scaling up para produção em escala industrial. O desenvolvimento de formulações de medicamentos estruturadas em nanopartículas é uma área de inovação tecnológica muito promissora, tendo recebido investimentos da indústria farmacêutica e citações de prioridade em políticas de ciência e tecnologia, como a PITCE. Estas novas formulações permitiriam vários avanços terapêuticos, incluindo liberação controlada, redução de toxicidade e vetorização para órgãos de interesse. Este conjunto de vantagens é particularmente importante para medicamentos eficazes, mas que apresentam toxicidade elevada, como é o caso do antifúngico anfotericina B. Assim, foram desenvolvidas preparações comerciais baseadas em lipossomas ou lipídeos, por exemplo, mas que apresentam limitações farmacocinéticas e são de custo elevado. Neste sentido, nosso grupo de pesquisa desenvolveu uma nova formulação de anfotericina B estruturada em polímero de PLGA, contendo DMSA para vetorização ao pulmão. O sistema mostrou eficácia terapêutica em modelo de micose sistêmica, sem efeitos colaterais importantes, e com melhor intervalo posológico, resultando no depósito de uma patente e na preparação de um artigo científico. O atual projeto pretende melhor caracterizar esta preparação, realizando testes físico-químicos, ensaios de farmacocinética e de biodistribuição, visando a futura transferência de tecnologia para o setor produtivo. Assim, serão também realizados experimentos de scaling up para definição de parâmetros visando a produção em escala industrial. O projeto apresenta alto grau de alinhamento com as políticas de ciência e tecnologia do País, sendo encaminhado por equipe qualificada, com infra-estrutura laborato. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Maria Sueli Soares Felipe - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1

• 2008 - Atual

  Nanotecnologia aplicada à terapia gênica via RNAi no Parkinson experimental, Descrição: O atual projeto situa-se no campo da terapia gênica do Parkinson experimental, com foco na interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. Estudos anteriores mostram que esta enzima tem papel nos eventos celulares que levam à morte neuronal e, conseqüentemente, à neurodegeneração. O óxido nítrico é molécula gasosa produzida como radical livre no processo de conversão da L-arginina em citrulina, pela enzima nNOS. A nNOS apresenta 4 variantes de splicing funcionais: nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama e nNOS-mu, que serviram de base para desenho de estruturas genéticas de RNAi. No sentido biotecnológico, e de acordo com o objetivo do atual projeto, pode-se observar uma crescente demanda de mercado por novos produtos farmacêuticos baseados em terapia gênica. Neste mesmo ramo da terapia gênica, torna-se altamente promissora a metodologia da interferência de RNA (RNAi), recentemente descrita para silenciamento de genes específicos, e que tem revolucionado trabalhos científicos e de desenvolvimento tecnológico. Com base no acima exposto, o atual projeto tem como objetivo o desenho e teste de estruturas genéticas para interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima nNOS, visando a terapia gênica do Parkinson experimental. Desta forma, visa atender às seguintes demandas biotecnológicas: 1. Sistemas de expressão gênica eficazes para terapia do Parkinson experimental, com foco em interferência de RNA. 2. Sistemas de liberação de material genético baseados em lipossomas funcionalizados ou em nanocápsulas poliméricas (PLGA), ambos capazes de ultrapassar a barreira hematoencefálica e liberar DNA plasmidial em áreas cerebrais afetadas pelo Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 3

• 2015 - Atual

  Terapia gênica do Parkinson experimental via inibidores de miR-34a e miR-134 nanoestruturados em magnetolipossomas., Descrição: Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é uma enfermidade crônico-degenerativa do sistema nervoso, que culmina com prejuízos na atividade motora e impacto na qualidade de vida dos pacientes; trata-se da segunda doença neurodegenerativa mais prevalente e que apresenta sérias limitações quanto à eficácia medicamentosa (Baumann, 2012). Pesquisas concentradas nas últimas décadas revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, incluindo aquelas neurológicas. Neste sentido, alterações na expressão de microRNAs têm sido descritas na doença de Parkinson (Mouradian, 2012; Miñones-Moyano, 2011; Harraz, 2011). Estudos mostram, ainda, que a degeneração de neurônios dopaminérgicos no Parkinson esporádico ocorre particularmente em células que apresentam os denominados corpos de Lewy, que são agregados de proteínas, em particular alfa-sinucleína e ubiquitina (Dauer & Przedborski, 2003). Dentre os vários modelos animais válidos para estudo desta doença, apenas o que utiliza a rotenona resulta na formação deste achado neuropatológico clássico do Parkinson (Uversky, 2004; Bove, 2005). Retomando a temática dos microRNAs, nosso grupo já verificou que a inibição específica de miR-34a, via oligonucleotídeos sintéticos antisense, causa efeito neuroprotetor em células dopaminérgicas SH-SY5Y lesadas pela rotenona. A inibição deste mesmo microRNA também causou neuroproteção nos modelos de epilepsia por ácido caínico e lítio-pilocarpina (Hu et al., 2012; Sano et al., 2012). Estudo anterior também mostrou efeito neuroprotetor mediante a inibição de um outro microRNA, miR-134, em modelo de epilepsia (Jimenez-Mateos et al., 2012). Até onde nosso conhecimento alcança, antagomirs para miR-34a e para miR-134 ainda não foram testados em modelos animais de Parkinson. Com base no exposto, o presente estudo visa avaliar a eficácia da injeção intracerebral e endovenosa de inibidores de miR-34a e miR-134 no controle da neurodegeneração dopaminérgica causada pela rotenona no estriado, hipocampo e córtex préfrontal de ratos. Os resultados deste estudo servirão para elucidar o potencial biotecnológico de antagomirs sintéticos na terapêutica do Parkinson. O atual projeto contribuirá, também, para avaliar se o uso de campos magnéticos próximos às regiões cerebrais de interesse é estratégia eficaz para vetorização de magnetolipossomas carreadores dos antagomirs sintéticos.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante.

• 2015 - Atual

  Implantação de Rede de Cooperação Acadêmica para estudo experimental e pré-clínico com foco na Doença de Parkinson, Descrição: Aprovado no EDITAL CNPq/MS/SCTIE/DECIT Nº 27/2014 - Pesquisas sobre Doenças Neurodegenerativas. Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é um distúrbio neurológico que culmina com prejuízos na atividade motora, impacto na qualidade de vida dos pacientes, desfecho crônico-degenerativo, prevalência na sociedade e, finalmente, apresenta sérias limitações de eficácia medicamentosa. Pesquisas concentradas na última década revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, em particular na degeneração nervosa. Em busca de elucidar a participação de microRNAs no Parkinson, bem como investigar o papel de neurotransmissões não-dopaminérgicas nos gânglios da base do encéfalo, uma equipe proponente (Pós-graduação em Fisiologia, FMRP, USP) e duas equipes associadas (PPG em Ciências da Saúde, UnB, e PPG em Saúde e Desenvolvimento na Região Centro-Oeste, UFMS), com competências complementares, histórico de parceria e experiência comprovada na área temática, reuniram-se para propor o atual projeto de pesquisa. A equipe proponente será responsável pelo planejamento geral das atividades e articulação entre os grupos de pesquisa, contribuindo também com o modelo de discinesia por L-DOPA no modelo da 6-OHDA, para os ensaios de interferência de RNA. A equipe associada da UnB irá realizar estudos em modelos animais e em pacientes hospitalares sobre a expressão e o papel de microRNAs na Doença de Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador.

• 2011 - 2015

  Desenvolvimento tecnológico de vetores reguláveis para expressão de hairpins de RNA direcionados às variantes de splicing nNOS-alfa, nNOS-beta e nNOS-gama, visando a terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto visa elucidar o papel de variantes de splicing da enzima nNOS (nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama) na proliferação tumoral do glioma. Apresenta duas metas principais, sendo a primeira o desenvolvimento e teste de seqüências de RNA em dupla fita para RNAi sobre cada variante de splicing de nNOS de gliomas humanos e de rato em cultura, avaliando assim os níveis de expressão da enzima nNOS e a atividade proliferativa celular. A segunda meta é desenvolver e testar vetores de expressão de hairpins de RNAi, para alvos que apresentem atividade antiproliferativa. Pretende-se, desta forma, gerar novos conhecimentos sobre o papel da NO sintase e seus variantes de splicing no desenvolvimento tumoral do glioma e, paralelamente, desenvolver vetores de expressão com potencial uso em plataformas tecnológicas de expressão de RNAi para terapêutica do câncer.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (3) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2011 - Atual

  Interferência de RNA sobre a enzima NO sintase neuronal (nNOS) para terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto situa-se na área prioritária de doenças crônico-degenerativas e visa desenvolver uma terapia gênica para o glioma, baseada em interferência de RNA sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. O câncer uma doença responsável por 7,1 milhões de mortes anuais, o que corresponde a 12,6% do total de óbitos. Os tumores cerebrais malignos, por sua vez, apresentam altas taxas de morbidade e mortalidade - em particular os gliomas malignos em adultos e os meduloblastomas em crianças, havendo tempos de sobrevida muito baixos (ex. 15 meses) para as formas mais agressivas como o glioblastoma. Estudos anteriores mostram correlação entre a expressão da enzima nNOS e o desenvolvimento tumoral e, neste sentido, o uso de inibidores desta mesma enzima pode reduzir o crescimento de alguns tipos de tumores. Desta forma, o silenciamento gênico da enzima nNOS via RNAi poderá reduzir o desenvolvimento tumoral, gerando uma terapia gênica efetiva para o glioma.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2009 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? estudo comparativo da farmacocinética e toxicologia do antifúngico Anfotericina B estruturado em nanocápsulas de PLGA-DMSA (Nanoanf, patente PI 0700446-0, 2007) e em lipossomas (Ambisome®)., Descrição: A atual proposta é uma pesquisa tecnológica e de inovação, com componente científico, representando a continuidade do projeto ?Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? farmacocinética da anfotericina B com ácido dimercaptosuccínico nanoencapsulada em polímero de ácido polilático-poliglicólico (AMB-PLGA)?, aprovado no edital MCT/CNPq 15/2007 - Universal - Faixa A - Até R$ 20.000,00. O projeto está em andamento, tendo concluído as etapas de validação do método de HPLC e da padronização da extração da anfotericina B da nanopartícula e dos tecidos; estudos de farmacocinética estão planejados para outubro de 2008. No entanto, a caracterização desta preparação de anfotericina B (NanoAnf) patenteada por nosso grupo (PI 220708667. 2007) exige estudos complementares que mostrem as reais vantagens de farmacocinética (ex. maior intervalo posológico, aumento da concentração pulmonar do fármaco) e de segurança (redução da nefrotoxicidade), em relação a um produto comercial disponível (ex. anfotericina lipossomal, Ambisome®). Assim, o atual projeto objetiva gerar dados complementares sobre farmacocinética e toxicidade da NanoAnf em comparação com dois medicamentos comerciais, anfotericina B e aquele estruturado em lipossomas (Ambisome®). Serão determinados, comparativamente para os três medicamentos, os parâmetros de biodisponibilidade Cmax, Tmax e AUC, bem como a meia-vida, o volume de distribuição, o clearence, e as taxas de excreção urinária e fecal. Será também definida a dose máxima tolerada, mediante administração de doses progressivas dos fármacos, visando determinar a maior dose de NanoAnf que não cause alterações renais, hepáticas ou mortalidade. Quanto aos produtos gerados, a execução do atual projeto permitirá o depósito de uma nova patente contendo os resultados do presente estudo, somados a resultados de outro projeto voltado ao scaling up para produção em escala industrial. Serão publicados dois artigos científicos, um com foco nas met. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2008 - Atual

  Nanotecnologia aplicada à terapia gênica via RNAi no Parkinson experimental, Descrição: O atual projeto situa-se no campo da terapia gênica do Parkinson experimental, com foco na interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. Estudos anteriores mostram que esta enzima tem papel nos eventos celulares que levam à morte neuronal e, conseqüentemente, à neurodegeneração. O óxido nítrico é molécula gasosa produzida como radical livre no processo de conversão da L-arginina em citrulina, pela enzima nNOS. A nNOS apresenta 4 variantes de splicing funcionais: nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama e nNOS-mu, que serviram de base para desenho de estruturas genéticas de RNAi. No sentido biotecnológico, e de acordo com o objetivo do atual projeto, pode-se observar uma crescente demanda de mercado por novos produtos farmacêuticos baseados em terapia gênica. Neste mesmo ramo da terapia gênica, torna-se altamente promissora a metodologia da interferência de RNA (RNAi), recentemente descrita para silenciamento de genes específicos, e que tem revolucionado trabalhos científicos e de desenvolvimento tecnológico. Com base no acima exposto, o atual projeto tem como objetivo o desenho e teste de estruturas genéticas para interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima nNOS, visando a terapia gênica do Parkinson experimental. Desta forma, visa atender às seguintes demandas biotecnológicas: 1. Sistemas de expressão gênica eficazes para terapia do Parkinson experimental, com foco em interferência de RNA. 2. Sistemas de liberação de material genético baseados em lipossomas funcionalizados ou em nanocápsulas poliméricas (PLGA), ambos capazes de ultrapassar a barreira hematoencefálica e liberar DNA plasmidial em áreas cerebrais afetadas pelo Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 3

• 2008 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de nanopartículas de PLGA-DMSA carreadoras de anfotericina B: caracterização das partículas (físico-química, morfologia, biodistribuição, farmacocinética) e análise de parâmetros de scaling up para produção em escala industrial, Descrição: O atual projeto objetiva realizar a caracterização físico-química e morfológica de nanopartículas de poli ácido (lático-co-glicólico), PLGA, com ácido dimercaptosuccínico - DMSA, carreadoras de anfotericina B. Serão também investigados parâmetros de farmacocinética, biodistribuição e condições de scaling up para produção em escala industrial. O desenvolvimento de formulações de medicamentos estruturadas em nanopartículas é uma área de inovação tecnológica muito promissora, tendo recebido investimentos da indústria farmacêutica e citações de prioridade em políticas de ciência e tecnologia, como a PITCE. Estas novas formulações permitiriam vários avanços terapêuticos, incluindo liberação controlada, redução de toxicidade e vetorização para órgãos de interesse. Este conjunto de vantagens é particularmente importante para medicamentos eficazes, mas que apresentam toxicidade elevada, como é o caso do antifúngico anfotericina B. Assim, foram desenvolvidas preparações comerciais baseadas em lipossomas ou lipídeos, por exemplo, mas que apresentam limitações farmacocinéticas e são de custo elevado. Neste sentido, nosso grupo de pesquisa desenvolveu uma nova formulação de anfotericina B estruturada em polímero de PLGA, contendo DMSA para vetorização ao pulmão. O sistema mostrou eficácia terapêutica em modelo de micose sistêmica, sem efeitos colaterais importantes, e com melhor intervalo posológico, resultando no depósito de uma patente e na preparação de um artigo científico. O atual projeto pretende melhor caracterizar esta preparação, realizando testes físico-químicos, ensaios de farmacocinética e de biodistribuição, visando a futura transferência de tecnologia para o setor produtivo. Assim, serão também realizados experimentos de scaling up para definição de parâmetros visando a produção em escala industrial. O projeto apresenta alto grau de alinhamento com as políticas de ciência e tecnologia do País, sendo encaminhado por equipe qualificada, com infra-estrutura laborato. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Maria Sueli Soares Felipe - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1

• 2015 - Atual

  Terapia gênica do Parkinson experimental via inibidores de miR-34a e miR-134 nanoestruturados em magnetolipossomas., Descrição: Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é uma enfermidade crônico-degenerativa do sistema nervoso, que culmina com prejuízos na atividade motora e impacto na qualidade de vida dos pacientes; trata-se da segunda doença neurodegenerativa mais prevalente e que apresenta sérias limitações quanto à eficácia medicamentosa (Baumann, 2012). Pesquisas concentradas nas últimas décadas revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, incluindo aquelas neurológicas. Neste sentido, alterações na expressão de microRNAs têm sido descritas na doença de Parkinson (Mouradian, 2012; Miones-Moyano, 2011; Harraz, 2011). Estudos mostram, ainda, que a degeneração de neurônios dopaminérgicos no Parkinson esporádico ocorre particularmente em células que apresentam os denominados corpos de Lewy, que são agregados de proteínas, em particular alfa-sinucleína e ubiquitina (Dauer & Przedborski, 2003). Dentre os vários modelos animais válidos para estudo desta doença, apenas o que utiliza a rotenona resulta na formação deste achado neuropatológico clássico do Parkinson (Uversky, 2004; Bove, 2005). Retomando a temática dos microRNAs, nosso grupo já verificou que a inibição específica de miR-34a, via oligonucleotídeos sintéticos antisense, causa efeito neuroprotetor em células dopaminérgicas SH-SY5Y lesadas pela rotenona. A inibição deste mesmo microRNA também causou neuroproteção nos modelos de epilepsia por ácido caínico e lítio-pilocarpina (Hu et al., 2012; Sano et al., 2012). Estudo anterior também mostrou efeito neuroprotetor mediante a inibição de um outro microRNA, miR-134, em modelo de epilepsia (Jimenez-Mateos et al., 2012). Até onde nosso conhecimento alcança, antagomirs para miR-34a e para miR-134 ainda não foram testados em modelos animais de Parkinson. Com base no exposto, o presente estudo visa avaliar a eficácia da injeção intracerebral e endovenosa de inibidores de miR-34a e miR-134 no controle da neurodegeneração dopaminérgica causada pela rotenona no estriado, hipocampo e córtex préfrontal de ratos. Os resultados deste estudo servirão para elucidar o potencial biotecnológico de antagomirs sintéticos na terapêutica do Parkinson. O atual projeto contribuirá, também, para avaliar se o uso de campos magnéticos próximos às regiões cerebrais de interesse é estratégia eficaz para vetorização de magnetolipossomas carreadores dos antagomirs sintéticos.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante.

• 2015 - Atual

  Implantação de Rede de Cooperação Acadêmica para estudo experimental e pré-clínico com foco na Doença de Parkinson, Descrição: Aprovado no EDITAL CNPq/MS/SCTIE/DECIT N 27/2014 - Pesquisas sobre Doenças Neurodegenerativas. Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é um distúrbio neurológico que culmina com prejuízos na atividade motora, impacto na qualidade de vida dos pacientes, desfecho crônico-degenerativo, prevalência na sociedade e, finalmente, apresenta sérias limitações de eficácia medicamentosa. Pesquisas concentradas na última década revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, em particular na degeneração nervosa. Em busca de elucidar a participação de microRNAs no Parkinson, bem como investigar o papel de neurotransmissões não-dopaminérgicas nos gânglios da base do encéfalo, uma equipe proponente (Pós-graduação em Fisiologia, FMRP, USP) e duas equipes associadas (PPG em Ciências da Saúde, UnB, e PPG em Saúde e Desenvolvimento na Região Centro-Oeste, UFMS), com competências complementares, histórico de parceria e experiência comprovada na área temática, reuniram-se para propor o atual projeto de pesquisa. A equipe proponente será responsável pelo planejamento geral das atividades e articulação entre os grupos de pesquisa, contribuindo também com o modelo de discinesia por L-DOPA no modelo da 6-OHDA, para os ensaios de interferência de RNA. A equipe associada da UnB irá realizar estudos em modelos animais e em pacientes hospitalares sobre a expressão e o papel de microRNAs na Doença de Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador.

• 2011 - 2015

  Desenvolvimento tecnológico de vetores reguláveis para expressão de hairpins de RNA direcionados às variantes de splicing nNOS-alfa, nNOS-beta e nNOS-gama, visando a terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto visa elucidar o papel de variantes de splicing da enzima nNOS (nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama) na proliferação tumoral do glioma. Apresenta duas metas principais, sendo a primeira o desenvolvimento e teste de seqüências de RNA em dupla fita para RNAi sobre cada variante de splicing de nNOS de gliomas humanos e de rato em cultura, avaliando assim os níveis de expressão da enzima nNOS e a atividade proliferativa celular. A segunda meta é desenvolver e testar vetores de expressão de hairpins de RNAi, para alvos que apresentem atividade antiproliferativa. Pretende-se, desta forma, gerar novos conhecimentos sobre o papel da NO sintase e seus variantes de splicing no desenvolvimento tumoral do glioma e, paralelamente, desenvolver vetores de expressão com potencial uso em plataformas tecnológicas de expressão de RNAi para terapêutica do câncer.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (3) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2011 - Atual

  Interferência de RNA sobre a enzima NO sintase neuronal (nNOS) para terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto situa-se na área prioritária de doenças crônico-degenerativas e visa desenvolver uma terapia gênica para o glioma, baseada em interferência de RNA sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. O câncer uma doença responsável por 7,1 milhões de mortes anuais, o que corresponde a 12,6% do total de óbitos. Os tumores cerebrais malignos, por sua vez, apresentam altas taxas de morbidade e mortalidade - em particular os gliomas malignos em adultos e os meduloblastomas em crianças, havendo tempos de sobrevida muito baixos (ex. 15 meses) para as formas mais agressivas como o glioblastoma. Estudos anteriores mostram correlação entre a expressão da enzima nNOS e o desenvolvimento tumoral e, neste sentido, o uso de inibidores desta mesma enzima pode reduzir o crescimento de alguns tipos de tumores. Desta forma, o silenciamento gênico da enzima nNOS via RNAi poderá reduzir o desenvolvimento tumoral, gerando uma terapia gênica efetiva para o glioma.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2009 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? estudo comparativo da farmacocinética e toxicologia do antifúngico Anfotericina B estruturado em nanocápsulas de PLGA-DMSA (Nanoanf, patente PI 0700446-0, 2007) e em lipossomas (Ambisome)., Descrição: A atual proposta é uma pesquisa tecnológica e de inovação, com componente científico, representando a continuidade do projeto ?Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? farmacocinética da anfotericina B com ácido dimercaptosuccínico nanoencapsulada em polímero de ácido polilático-poliglicólico (AMB-PLGA)?, aprovado no edital MCT/CNPq 15/2007 - Universal - Faixa A - Até R$ 20.000,00. O projeto está em andamento, tendo concluído as etapas de validação do método de HPLC e da padronização da extração da anfotericina B da nanopartícula e dos tecidos; estudos de farmacocinética estão planejados para outubro de 2008. No entanto, a caracterização desta preparação de anfotericina B (NanoAnf) patenteada por nosso grupo (PI 220708667. 2007) exige estudos complementares que mostrem as reais vantagens de farmacocinética (ex. maior intervalo posológico, aumento da concentração pulmonar do fármaco) e de segurança (redução da nefrotoxicidade), em relação a um produto comercial disponível (ex. anfotericina lipossomal, Ambisome). Assim, o atual projeto objetiva gerar dados complementares sobre farmacocinética e toxicidade da NanoAnf em comparação com dois medicamentos comerciais, anfotericina B e aquele estruturado em lipossomas (Ambisome). Serão determinados, comparativamente para os três medicamentos, os parâmetros de biodisponibilidade Cmax, Tmax e AUC, bem como a meia-vida, o volume de distribuição, o clearence, e as taxas de excreção urinária e fecal. Será também definida a dose máxima tolerada, mediante administração de doses progressivas dos fármacos, visando determinar a maior dose de NanoAnf que não cause alterações renais, hepáticas ou mortalidade. Quanto aos produtos gerados, a execução do atual projeto permitirá o depósito de uma nova patente contendo os resultados do presente estudo, somados a resultados de outro projeto voltado ao scaling up para produção em escala industrial. Serão publicados dois artigos científicos, um com foco nas met. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 1

• 2008 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de nanopartículas de PLGA-DMSA carreadoras de anfotericina B: caracterização das partículas (físico-química, morfologia, biodistribuição, farmacocinética) e análise de parâmetros de scaling up para produção em escala industrial, Descrição: O atual projeto objetiva realizar a caracterização físico-química e morfológica de nanopartículas de poli ácido (lático-co-glicólico), PLGA, com ácido dimercaptosuccínico - DMSA, carreadoras de anfotericina B. Serão também investigados parâmetros de farmacocinética, biodistribuição e condições de scaling up para produção em escala industrial. O desenvolvimento de formulações de medicamentos estruturadas em nanopartículas é uma área de inovação tecnológica muito promissora, tendo recebido investimentos da indústria farmacêutica e citações de prioridade em políticas de ciência e tecnologia, como a PITCE. Estas novas formulações permitiriam vários avanços terapêuticos, incluindo liberação controlada, redução de toxicidade e vetorização para órgãos de interesse. Este conjunto de vantagens é particularmente importante para medicamentos eficazes, mas que apresentam toxicidade elevada, como é o caso do antifúngico anfotericina B. Assim, foram desenvolvidas preparações comerciais baseadas em lipossomas ou lipídeos, por exemplo, mas que apresentam limitações farmacocinéticas e são de custo elevado. Neste sentido, nosso grupo de pesquisa desenvolveu uma nova formulação de anfotericina B estruturada em polímero de PLGA, contendo DMSA para vetorização ao pulmão. O sistema mostrou eficácia terapêutica em modelo de micose sistêmica, sem efeitos colaterais importantes, e com melhor intervalo posológico, resultando no depósito de uma patente e na preparação de um artigo científico. O atual projeto pretende melhor caracterizar esta preparação, realizando testes físico-químicos, ensaios de farmacocinética e de biodistribuição, visando a futura transferência de tecnologia para o setor produtivo. Assim, serão também realizados experimentos de scaling up para definição de parâmetros visando a produção em escala industrial. O projeto apresenta alto grau de alinhamento com as políticas de ciência e tecnologia do País, sendo encaminhado por equipe qualificada, com infra-estrutura laborato. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Maria Sueli Soares Felipe - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1

• 2008 - Atual

  Nanotecnologia aplicada à terapia gênica via RNAi no Parkinson experimental, Descrição: O atual projeto situa-se no campo da terapia gênica do Parkinson experimental, com foco na interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. Estudos anteriores mostram que esta enzima tem papel nos eventos celulares que levam à morte neuronal e, conseqüentemente, à neurodegeneração. O óxido nítrico é molécula gasosa produzida como radical livre no processo de conversão da L-arginina em citrulina, pela enzima nNOS. A nNOS apresenta 4 variantes de splicing funcionais: nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama e nNOS-mu, que serviram de base para desenho de estruturas genéticas de RNAi. No sentido biotecnológico, e de acordo com o objetivo do atual projeto, pode-se observar uma crescente demanda de mercado por novos produtos farmacêuticos baseados em terapia gênica. Neste mesmo ramo da terapia gênica, torna-se altamente promissora a metodologia da interferência de RNA (RNAi), recentemente descrita para silenciamento de genes específicos, e que tem revolucionado trabalhos científicos e de desenvolvimento tecnológico. Com base no acima exposto, o atual projeto tem como objetivo o desenho e teste de estruturas genéticas para interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima nNOS, visando a terapia gênica do Parkinson experimental. Desta forma, visa atender às seguintes demandas biotecnológicas: 1. Sistemas de expressão gênica eficazes para terapia do Parkinson experimental, com foco em interferência de RNA. 2. Sistemas de liberação de material genético baseados em lipossomas funcionalizados ou em nanocápsulas poliméricas (PLGA), ambos capazes de ultrapassar a barreira hematoencefálica e liberar DNA plasmidial em áreas cerebrais afetadas pelo Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1 / Número de orientações: 3

• 2015 - Atual

  Implantação de Rede de Cooperação Acadêmica para estudo experimental e pré-clínico com foco na Doença de Parkinson, Projeto certificado pelo(a) coordenador(a) Elaine Aparecida Del Bel Belluz Guimarães em 30/09/2021., Descrição: Aprovado no EDITAL CNPq/MS/SCTIE/DECIT N 27/2014 - Pesquisas sobre Doenças Neurodegenerativas. Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é um distúrbio neurológico que culmina com prejuízos na atividade motora, impacto na qualidade de vida dos pacientes, desfecho crônico-degenerativo, prevalência na sociedade e, finalmente, apresenta sérias limitações de eficácia medicamentosa. Pesquisas concentradas na última década revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, em particular na degeneração nervosa. Em busca de elucidar a participação de microRNAs no Parkinson, bem como investigar o papel de neurotransmissões não-dopaminérgicas nos gânglios da base do encéfalo, uma equipe proponente (Pós-graduação em Fisiologia, FMRP, USP) e duas equipes associadas (PPG em Ciências da Saúde, UnB, e PPG em Saúde e Desenvolvimento na Região Centro-Oeste, UFMS), com competências complementares, histórico de parceria e experiência comprovada na área temática, reuniram-se para propor o atual projeto de pesquisa. A equipe proponente será responsável pelo planejamento geral das atividades e articulação entre os grupos de pesquisa, contribuindo também com o modelo de discinesia por L-DOPA no modelo da 6-OHDA, para os ensaios de interferência de RNA. A equipe associada da UnB irá realizar estudos em modelos animais e em pacientes hospitalares sobre a expressão e o papel de microRNAs na Doença de Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador.

• 2015 - Atual

  Terapia gênica do Parkinson experimental via inibidores de miR-34a e miR-134 nanoestruturados em magnetolipossomas., Descrição: Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é uma enfermidade crônico-degenerativa do sistema nervoso, que culmina com prejuízos na atividade motora e impacto na qualidade de vida dos pacientes; trata-se da segunda doença neurodegenerativa mais prevalente e que apresenta sérias limitações quanto à eficácia medicamentosa (Baumann, 2012). Pesquisas concentradas nas últimas décadas revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, incluindo aquelas neurológicas. Neste sentido, alterações na expressão de microRNAs têm sido descritas na doença de Parkinson (Mouradian, 2012; Miones-Moyano, 2011; Harraz, 2011). Estudos mostram, ainda, que a degeneração de neurônios dopaminérgicos no Parkinson esporádico ocorre particularmente em células que apresentam os denominados corpos de Lewy, que são agregados de proteínas, em particular alfa-sinucleína e ubiquitina (Dauer & Przedborski, 2003). Dentre os vários modelos animais válidos para estudo desta doença, apenas o que utiliza a rotenona resulta na formação deste achado neuropatológico clássico do Parkinson (Uversky, 2004; Bove, 2005). Retomando a temática dos microRNAs, nosso grupo já verificou que a inibição específica de miR-34a, via oligonucleotídeos sintéticos antisense, causa efeito neuroprotetor em células dopaminérgicas SH-SY5Y lesadas pela rotenona. A inibição deste mesmo microRNA também causou neuroproteção nos modelos de epilepsia por ácido caínico e lítio-pilocarpina (Hu et al., 2012; Sano et al., 2012). Estudo anterior também mostrou efeito neuroprotetor mediante a inibição de um outro microRNA, miR-134, em modelo de epilepsia (Jimenez-Mateos et al., 2012). Até onde nosso conhecimento alcança, antagomirs para miR-34a e para miR-134 ainda não foram testados em modelos animais de Parkinson. Com base no exposto, o presente estudo visa avaliar a eficácia da injeção intracerebral e endovenosa de inibidores de miR-34a e miR-134 no controle da neurodegeneração dopaminérgica causada pela rotenona no estriado, hipocampo e córtex préfrontal de ratos. Os resultados deste estudo servirão para elucidar o potencial biotecnológico de antagomirs sintéticos na terapêutica do Parkinson. O atual projeto contribuirá, também, para avaliar se o uso de campos magnéticos próximos às regiões cerebrais de interesse é estratégia eficaz para vetorização de magnetolipossomas carreadores dos antagomirs sintéticos.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante.

• 2011 - 2015

  Desenvolvimento tecnológico de vetores reguláveis para expressão de hairpins de RNA direcionados às variantes de splicing nNOS-alfa, nNOS-beta e nNOS-gama, visando a terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto visa elucidar o papel de variantes de splicing da enzima nNOS (nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama) na proliferação tumoral do glioma. Apresenta duas metas principais, sendo a primeira o desenvolvimento e teste de seqüências de RNA em dupla fita para RNAi sobre cada variante de splicing de nNOS de gliomas humanos e de rato em cultura, avaliando assim os níveis de expressão da enzima nNOS e a atividade proliferativa celular. A segunda meta é desenvolver e testar vetores de expressão de hairpins de RNAi, para alvos que apresentem atividade antiproliferativa. Pretende-se, desta forma, gerar novos conhecimentos sobre o papel da NO sintase e seus variantes de splicing no desenvolvimento tumoral do glioma e, paralelamente, desenvolver vetores de expressão com potencial uso em plataformas tecnológicas de expressão de RNAi para terapêutica do câncer.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (3) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa., Número de produções C, T & A: 2

• 2011 - Atual

  Interferência de RNA sobre a enzima NO sintase neuronal (nNOS) para terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto situa-se na área prioritária de doenças crônico-degenerativas e visa desenvolver uma terapia gênica para o glioma, baseada em interferência de RNA sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. O câncer uma doença responsável por 7,1 milhões de mortes anuais, o que corresponde a 12,6% do total de óbitos. Os tumores cerebrais malignos, por sua vez, apresentam altas taxas de morbidade e mortalidade - em particular os gliomas malignos em adultos e os meduloblastomas em crianças, havendo tempos de sobrevida muito baixos (ex. 15 meses) para as formas mais agressivas como o glioblastoma. Estudos anteriores mostram correlação entre a expressão da enzima nNOS e o desenvolvimento tumoral e, neste sentido, o uso de inibidores desta mesma enzima pode reduzir o crescimento de alguns tipos de tumores. Desta forma, o silenciamento gênico da enzima nNOS via RNAi poderá reduzir o desenvolvimento tumoral, gerando uma terapia gênica efetiva para o glioma.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 2

• 2009 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? estudo comparativo da farmacocinética e toxicologia do antifúngico Anfotericina B estruturado em nanocápsulas de PLGA-DMSA (Nanoanf, patente PI 0700446-0, 2007) e em lipossomas (Ambisome)., Descrição: A atual proposta é uma pesquisa tecnológica e de inovação, com componente científico, representando a continuidade do projeto ?Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? farmacocinética da anfotericina B com ácido dimercaptosuccínico nanoencapsulada em polímero de ácido polilático-poliglicólico (AMB-PLGA)?, aprovado no edital MCT/CNPq 15/2007 - Universal - Faixa A - Até R$ 20.000,00. O projeto está em andamento, tendo concluído as etapas de validação do método de HPLC e da padronização da extração da anfotericina B da nanopartícula e dos tecidos; estudos de farmacocinética estão planejados para outubro de 2008. No entanto, a caracterização desta preparação de anfotericina B (NanoAnf) patenteada por nosso grupo (PI 220708667. 2007) exige estudos complementares que mostrem as reais vantagens de farmacocinética (ex. maior intervalo posológico, aumento da concentração pulmonar do fármaco) e de segurança (redução da nefrotoxicidade), em relação a um produto comercial disponível (ex. anfotericina lipossomal, Ambisome). Assim, o atual projeto objetiva gerar dados complementares sobre farmacocinética e toxicidade da NanoAnf em comparação com dois medicamentos comerciais, anfotericina B e aquele estruturado em lipossomas (Ambisome). Serão determinados, comparativamente para os três medicamentos, os parâmetros de biodisponibilidade Cmax, Tmax e AUC, bem como a meia-vida, o volume de distribuição, o clearence, e as taxas de excreção urinária e fecal. Será também definida a dose máxima tolerada, mediante administração de doses progressivas dos fármacos, visando determinar a maior dose de NanoAnf que não cause alterações renais, hepáticas ou mortalidade. Quanto aos produtos gerados, a execução do atual projeto permitirá o depósito de uma nova patente contendo os resultados do presente estudo, somados a resultados de outro projeto voltado ao scaling up para produção em escala industrial. Serão publicados dois artigos científicos, um com foco nas met. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 2

• 2008 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de nanopartículas de PLGA-DMSA carreadoras de anfotericina B: caracterização das partículas (físico-química, morfologia, biodistribuição, farmacocinética) e análise de parâmetros de scaling up para produção em escala industrial, Descrição: O atual projeto objetiva realizar a caracterização físico-química e morfológica de nanopartículas de poli ácido (lático-co-glicólico), PLGA, com ácido dimercaptosuccínico - DMSA, carreadoras de anfotericina B. Serão também investigados parâmetros de farmacocinética, biodistribuição e condições de scaling up para produção em escala industrial. O desenvolvimento de formulações de medicamentos estruturadas em nanopartículas é uma área de inovação tecnológica muito promissora, tendo recebido investimentos da indústria farmacêutica e citações de prioridade em políticas de ciência e tecnologia, como a PITCE. Estas novas formulações permitiriam vários avanços terapêuticos, incluindo liberação controlada, redução de toxicidade e vetorização para órgãos de interesse. Este conjunto de vantagens é particularmente importante para medicamentos eficazes, mas que apresentam toxicidade elevada, como é o caso do antifúngico anfotericina B. Assim, foram desenvolvidas preparações comerciais baseadas em lipossomas ou lipídeos, por exemplo, mas que apresentam limitações farmacocinéticas e são de custo elevado. Neste sentido, nosso grupo de pesquisa desenvolveu uma nova formulação de anfotericina B estruturada em polímero de PLGA, contendo DMSA para vetorização ao pulmão. O sistema mostrou eficácia terapêutica em modelo de micose sistêmica, sem efeitos colaterais importantes, e com melhor intervalo posológico, resultando no depósito de uma patente e na preparação de um artigo científico. O atual projeto pretende melhor caracterizar esta preparação, realizando testes físico-químicos, ensaios de farmacocinética e de biodistribuição, visando a futura transferência de tecnologia para o setor produtivo. Assim, serão também realizados experimentos de scaling up para definição de parâmetros visando a produção em escala industrial. O projeto apresenta alto grau de alinhamento com as políticas de ciência e tecnologia do País, sendo encaminhado por equipe qualificada, com infra-estrutura laborato. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Maria Sueli Soares Felipe - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 1

• 2008 - Atual

  Nanotecnologia aplicada à terapia gênica via RNAi no Parkinson experimental, Descrição: O atual projeto situa-se no campo da terapia gênica do Parkinson experimental, com foco na interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. Estudos anteriores mostram que esta enzima tem papel nos eventos celulares que levam à morte neuronal e, conseqüentemente, à neurodegeneração. O óxido nítrico é molécula gasosa produzida como radical livre no processo de conversão da L-arginina em citrulina, pela enzima nNOS. A nNOS apresenta 4 variantes de splicing funcionais: nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama e nNOS-mu, que serviram de base para desenho de estruturas genéticas de RNAi. No sentido biotecnológico, e de acordo com o objetivo do atual projeto, pode-se observar uma crescente demanda de mercado por novos produtos farmacêuticos baseados em terapia gênica. Neste mesmo ramo da terapia gênica, torna-se altamente promissora a metodologia da interferência de RNA (RNAi), recentemente descrita para silenciamento de genes específicos, e que tem revolucionado trabalhos científicos e de desenvolvimento tecnológico. Com base no acima exposto, o atual projeto tem como objetivo o desenho e teste de estruturas genéticas para interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima nNOS, visando a terapia gênica do Parkinson experimental. Desta forma, visa atender às seguintes demandas biotecnológicas: 1. Sistemas de expressão gênica eficazes para terapia do Parkinson experimental, com foco em interferência de RNA. 2. Sistemas de liberação de material genético baseados em lipossomas funcionalizados ou em nanocápsulas poliméricas (PLGA), ambos capazes de ultrapassar a barreira hematoencefálica e liberar DNA plasmidial em áreas cerebrais afetadas pelo Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa., Número de produções C, T & A: 4

• 2015 - Atual

  Implantação de Rede de Cooperação Acadêmica para estudo experimental e pré-clínico com foco na Doença de Parkinson, Projeto certificado pelo(a) coordenador(a) Elaine Aparecida Del Bel Belluz Guimarães em 30/09/2021., Descrição: Aprovado no EDITAL CNPq/MS/SCTIE/DECIT Nº 27/2014 - Pesquisas sobre Doenças Neurodegenerativas. Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é um distúrbio neurológico que culmina com prejuízos na atividade motora, impacto na qualidade de vida dos pacientes, desfecho crônico-degenerativo, prevalência na sociedade e, finalmente, apresenta sérias limitações de eficácia medicamentosa. Pesquisas concentradas na última década revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, em particular na degeneração nervosa. Em busca de elucidar a participação de microRNAs no Parkinson, bem como investigar o papel de neurotransmissões não-dopaminérgicas nos gânglios da base do encéfalo, uma equipe proponente (Pós-graduação em Fisiologia, FMRP, USP) e duas equipes associadas (PPG em Ciências da Saúde, UnB, e PPG em Saúde e Desenvolvimento na Região Centro-Oeste, UFMS), com competências complementares, histórico de parceria e experiência comprovada na área temática, reuniram-se para propor o atual projeto de pesquisa. A equipe proponente será responsável pelo planejamento geral das atividades e articulação entre os grupos de pesquisa, contribuindo também com o modelo de discinesia por L-DOPA no modelo da 6-OHDA, para os ensaios de interferência de RNA. A equipe associada da UnB irá realizar estudos em modelos animais e em pacientes hospitalares sobre a expressão e o papel de microRNAs na Doença de Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador.

• 2015 - Atual

  Terapia gênica do Parkinson experimental via inibidores de miR-34a e miR-134 nanoestruturados em magnetolipossomas., Descrição: Distúrbios neurológicos são doenças de alta complexidade, que há muito desafiam a comunidade científica a entender sua etiologia e a descobrir formas de tratamento eficazes. A doença de Parkinson é uma enfermidade crônico-degenerativa do sistema nervoso, que culmina com prejuízos na atividade motora e impacto na qualidade de vida dos pacientes; trata-se da segunda doença neurodegenerativa mais prevalente e que apresenta sérias limitações quanto à eficácia medicamentosa (Baumann, 2012). Pesquisas concentradas nas últimas décadas revelam que RNAs regulatórios têm papel-chave na fisiopatologia de várias doenças que acometem o homem, incluindo aquelas neurológicas. Neste sentido, alterações na expressão de microRNAs têm sido descritas na doença de Parkinson (Mouradian, 2012; Miñones-Moyano, 2011; Harraz, 2011). Estudos mostram, ainda, que a degeneração de neurônios dopaminérgicos no Parkinson esporádico ocorre particularmente em células que apresentam os denominados corpos de Lewy, que são agregados de proteínas, em particular alfa-sinucleína e ubiquitina (Dauer & Przedborski, 2003). Dentre os vários modelos animais válidos para estudo desta doença, apenas o que utiliza a rotenona resulta na formação deste achado neuropatológico clássico do Parkinson (Uversky, 2004; Bove, 2005). Retomando a temática dos microRNAs, nosso grupo já verificou que a inibição específica de miR-34a, via oligonucleotídeos sintéticos antisense, causa efeito neuroprotetor em células dopaminérgicas SH-SY5Y lesadas pela rotenona. A inibição deste mesmo microRNA também causou neuroproteção nos modelos de epilepsia por ácido caínico e lítio-pilocarpina (Hu et al., 2012; Sano et al., 2012). Estudo anterior também mostrou efeito neuroprotetor mediante a inibição de um outro microRNA, miR-134, em modelo de epilepsia (Jimenez-Mateos et al., 2012). Até onde nosso conhecimento alcança, antagomirs para miR-34a e para miR-134 ainda não foram testados em modelos animais de Parkinson. Com base no exposto, o presente estudo visa avaliar a eficácia da injeção intracerebral e endovenosa de inibidores de miR-34a e miR-134 no controle da neurodegeneração dopaminérgica causada pela rotenona no estriado, hipocampo e córtex préfrontal de ratos. Os resultados deste estudo servirão para elucidar o potencial biotecnológico de antagomirs sintéticos na terapêutica do Parkinson. O atual projeto contribuirá, também, para avaliar se o uso de campos magnéticos próximos às regiões cerebrais de interesse é estratégia eficaz para vetorização de magnetolipossomas carreadores dos antagomirs sintéticos.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante.

• 2011 - 2015

  Desenvolvimento tecnológico de vetores reguláveis para expressão de hairpins de RNA direcionados às variantes de splicing nNOS-alfa, nNOS-beta e nNOS-gama, visando a terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto visa elucidar o papel de variantes de splicing da enzima nNOS (nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama) na proliferação tumoral do glioma. Apresenta duas metas principais, sendo a primeira o desenvolvimento e teste de seqüências de RNA em dupla fita para RNAi sobre cada variante de splicing de nNOS de gliomas humanos e de rato em cultura, avaliando assim os níveis de expressão da enzima nNOS e a atividade proliferativa celular. A segunda meta é desenvolver e testar vetores de expressão de hairpins de RNAi, para alvos que apresentem atividade antiproliferativa. Pretende-se, desta forma, gerar novos conhecimentos sobre o papel da NO sintase e seus variantes de splicing no desenvolvimento tumoral do glioma e, paralelamente, desenvolver vetores de expressão com potencial uso em plataformas tecnológicas de expressão de RNAi para terapêutica do câncer.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (3) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 2

• 2011 - Atual

  Interferência de RNA sobre a enzima NO sintase neuronal (nNOS) para terapia gênica do glioma., Descrição: O atual projeto situa-se na área prioritária de doenças crônico-degenerativas e visa desenvolver uma terapia gênica para o glioma, baseada em interferência de RNA sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. O câncer uma doença responsável por 7,1 milhões de mortes anuais, o que corresponde a 12,6% do total de óbitos. Os tumores cerebrais malignos, por sua vez, apresentam altas taxas de morbidade e mortalidade - em particular os gliomas malignos em adultos e os meduloblastomas em crianças, havendo tempos de sobrevida muito baixos (ex. 15 meses) para as formas mais agressivas como o glioblastoma. Estudos anteriores mostram correlação entre a expressão da enzima nNOS e o desenvolvimento tumoral e, neste sentido, o uso de inibidores desta mesma enzima pode reduzir o crescimento de alguns tipos de tumores. Desta forma, o silenciamento gênico da enzima nNOS via RNAi poderá reduzir o desenvolvimento tumoral, gerando uma terapia gênica efetiva para o glioma.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Elaine Aparecida Del Bel - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 2

• 2009 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? estudo comparativo da farmacocinética e toxicologia do antifúngico Anfotericina B estruturado em nanocápsulas de PLGA-DMSA (Nanoanf, patente PI 0700446-0, 2007) e em lipossomas (Ambisome®)., Descrição: A atual proposta é uma pesquisa tecnológica e de inovação, com componente científico, representando a continuidade do projeto ?Desenvolvimento tecnológico de medicamentos nanoestruturados ? farmacocinética da anfotericina B com ácido dimercaptosuccínico nanoencapsulada em polímero de ácido polilático-poliglicólico (AMB-PLGA)?, aprovado no edital MCT/CNPq 15/2007 - Universal - Faixa A - Até R$ 20.000,00. O projeto está em andamento, tendo concluído as etapas de validação do método de HPLC e da padronização da extração da anfotericina B da nanopartícula e dos tecidos; estudos de farmacocinética estão planejados para outubro de 2008. No entanto, a caracterização desta preparação de anfotericina B (NanoAnf) patenteada por nosso grupo (PI 220708667. 2007) exige estudos complementares que mostrem as reais vantagens de farmacocinética (ex. maior intervalo posológico, aumento da concentração pulmonar do fármaco) e de segurança (redução da nefrotoxicidade), em relação a um produto comercial disponível (ex. anfotericina lipossomal, Ambisome®). Assim, o atual projeto objetiva gerar dados complementares sobre farmacocinética e toxicidade da NanoAnf em comparação com dois medicamentos comerciais, anfotericina B e aquele estruturado em lipossomas (Ambisome®). Serão determinados, comparativamente para os três medicamentos, os parâmetros de biodisponibilidade Cmax, Tmax e AUC, bem como a meia-vida, o volume de distribuição, o clearence, e as taxas de excreção urinária e fecal. Será também definida a dose máxima tolerada, mediante administração de doses progressivas dos fármacos, visando determinar a maior dose de NanoAnf que não cause alterações renais, hepáticas ou mortalidade. Quanto aos produtos gerados, a execução do atual projeto permitirá o depósito de uma nova patente contendo os resultados do presente estudo, somados a resultados de outro projeto voltado ao scaling up para produção em escala industrial. Serão publicados dois artigos científicos, um com foco nas met. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 2

• 2008 - Atual

  Nanotecnologia aplicada à terapia gênica via RNAi no Parkinson experimental, Descrição: O atual projeto situa-se no campo da terapia gênica do Parkinson experimental, com foco na interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima sintase do óxido nítrico neuronal - nNOS. Estudos anteriores mostram que esta enzima tem papel nos eventos celulares que levam à morte neuronal e, conseqüentemente, à neurodegeneração. O óxido nítrico é molécula gasosa produzida como radical livre no processo de conversão da L-arginina em citrulina, pela enzima nNOS. A nNOS apresenta 4 variantes de splicing funcionais: nNOS-alfa, nNOS-beta, nNOS-gama e nNOS-mu, que serviram de base para desenho de estruturas genéticas de RNAi. No sentido biotecnológico, e de acordo com o objetivo do atual projeto, pode-se observar uma crescente demanda de mercado por novos produtos farmacêuticos baseados em terapia gênica. Neste mesmo ramo da terapia gênica, torna-se altamente promissora a metodologia da interferência de RNA (RNAi), recentemente descrita para silenciamento de genes específicos, e que tem revolucionado trabalhos científicos e de desenvolvimento tecnológico. Com base no acima exposto, o atual projeto tem como objetivo o desenho e teste de estruturas genéticas para interferência de RNA (RNAi) sobre a enzima nNOS, visando a terapia gênica do Parkinson experimental. Desta forma, visa atender às seguintes demandas biotecnológicas: 1. Sistemas de expressão gênica eficazes para terapia do Parkinson experimental, com foco em interferência de RNA. 2. Sistemas de liberação de material genético baseados em lipossomas funcionalizados ou em nanocápsulas poliméricas (PLGA), ambos capazes de ultrapassar a barreira hematoencefálica e liberar DNA plasmidial em áreas cerebrais afetadas pelo Parkinson.. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Elaine Aparecida Del Bel - Coordenador / Walter Stuhmer - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa., Número de produções C, T & A: 4

• 2008 - Atual

  Desenvolvimento tecnológico de nanopartículas de PLGA-DMSA carreadoras de anfotericina B: caracterização das partículas (físico-química, morfologia, biodistribuição, farmacocinética) e análise de parâmetros de scaling up para produção em escala industrial, Descrição: O atual projeto objetiva realizar a caracterização físico-química e morfológica de nanopartículas de poli ácido (lático-co-glicólico), PLGA, com ácido dimercaptosuccínico - DMSA, carreadoras de anfotericina B. Serão também investigados parâmetros de farmacocinética, biodistribuição e condições de scaling up para produção em escala industrial. O desenvolvimento de formulações de medicamentos estruturadas em nanopartículas é uma área de inovação tecnológica muito promissora, tendo recebido investimentos da indústria farmacêutica e citações de prioridade em políticas de ciência e tecnologia, como a PITCE. Estas novas formulações permitiriam vários avanços terapêuticos, incluindo liberação controlada, redução de toxicidade e vetorização para órgãos de interesse. Este conjunto de vantagens é particularmente importante para medicamentos eficazes, mas que apresentam toxicidade elevada, como é o caso do antifúngico anfotericina B. Assim, foram desenvolvidas preparações comerciais baseadas em lipossomas ou lipídeos, por exemplo, mas que apresentam limitações farmacocinéticas e são de custo elevado. Neste sentido, nosso grupo de pesquisa desenvolveu uma nova formulação de anfotericina B estruturada em polímero de PLGA, contendo DMSA para vetorização ao pulmão. O sistema mostrou eficácia terapêutica em modelo de micose sistêmica, sem efeitos colaterais importantes, e com melhor intervalo posológico, resultando no depósito de uma patente e na preparação de um artigo científico. O atual projeto pretende melhor caracterizar esta preparação, realizando testes físico-químicos, ensaios de farmacocinética e de biodistribuição, visando a futura transferência de tecnologia para o setor produtivo. Assim, serão também realizados experimentos de scaling up para definição de parâmetros visando a produção em escala industrial. O projeto apresenta alto grau de alinhamento com as políticas de ciência e tecnologia do País, sendo encaminhado por equipe qualificada, com infra-estrutura laborato. , Situação: Em andamento; Natureza: Desenvolvimento. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) Doutorado: (1) . , Integrantes: Ricardo Titze de Almeida - Integrante / Maria Sueli Soares Felipe - Coordenador / Anamélia Bocca - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Bolsa., Número de produções C, T & A: 1

Prêmios