Annabel Quinet de Andrade

Pós-doutorado

Formação complementar

Idiomas

Áreas de atuação

Participação em eventos

Orientou

Produções bibliográficas

• 2017 LERNER, LETICIA K. ; FRANCISCO, GUILHERME ; SOLTYS, DANIELA T. ; ROCHA, CLARISSA R.R. ; QUINET, ANNABEL ; VESSONI, ALEXANDRE T. ; CASTRO, LIGIA P. ; DAVID, TAYNAH I.P. ; BUSTOS, SILVINA O. ; STRAUSS, BRYAN E. ; GOTTIFREDI, VANESA ; Stary, Anne ; Sarasin, Alain ; CHAMMAS, ROGER ; Menck, Carlos F.M. . Predominant role of DNA polymerase eta and p53-dependent translesion synthesis in the survival of ultraviolet-irradiated human cells. Nucleic Acids Research , v. 45, p. 1270-1280, 2017.

• LEMAÇON, DELPHINE ; JACKSON, JESSICA ; QUINET, ANNABEL ; BRICKNER, JOSHUA R. ; LI, SHAN ; YAZINSKI, STEPHANIE ; YOU, ZHONGSHENG ; IRA, GRZEGORZ ; ZOU, LEE ; MOSAMMAPARAST, NIMA ; VINDIGNI, ALESSANDRO . MRE11 and EXO1 nucleases degrade reversed forks and elicit MUS81-dependent fork rescue in BRCA2-deficient cells. Nature Communications , v. 8, p. 860, 2017.

• DE OLIVEIRA ALVES, NILMARA ; VESSONI, ALEXANDRE TEIXEIRA ; QUINET, ANNABEL ; FORTUNATO, RODRIGO SOARES ; KAJITANI, GUSTAVO SATORU ; PEIXOTO, MILENA SIMÕES ; HACON, SANDRA DE SOUZA ; ARTAXO, PAULO ; SALDIVA, PAULO ; MENCK, CARLOS FREDERICO MARTINS ; BATISTUZZO DE MEDEIROS, SILVIA REGINA . Biomass burning in the Amazon region causes DNA damage and cell death in human lung cells. Scientific Reports , v. 7, p. 1-13, 2017.

• QUINET, ANNABEL ; LEMAÇON, DELPHINE ; VINDIGNI, ALESSANDRO . Replication Fork Reversal: Players and Guardians. MOLECULAR CELL , v. 68, p. 830-833, 2017.

• 2016 QUINET, ANNABEL ; MARTINS, DAVI JARDIM ; VESSONI, ALEXANDRE TEIXEIRA ; BIARD, DENIS ; Sarasin, Alain ; Stary, Anne ; MENCK, CARLOS FREDERICO MARTINS . Translesion synthesis mechanisms depend on the nature of DNA damage in UV-irradiated human cells. Nucleic Acids Research , v. 44, p. gkw280, 2016.

• 2016 VESSONI, ALEXANDRE T. ; HERAI, ROBERTO H. ; KARPIAK, JEROME V. ; LEAL, ANGELICA M. S. ; TRUJILLO, CLEBER A. ; QUINET, ANNABEL ; AGNEZ LIMA, LUCYMARA F. ; MENCK, CARLOS F. M. ; MUOTRI, ALYSSON R. . Cockayne syndrome-derived neurons display reduced synapse density and altered neural network synchrony. Human Molecular Genetics (Print) , v. 25, p. ddw008, 2016.

• 2016 RIBEIRO REILY ROCHA, CLARISSA ; SATORU KAJITANI, GUSTAVO ; Andrade, Annabel Quinet de ; SOARES FORTUNATO, RODRIGO ; MENCK CF . NRF2 and glutathione are key resistance mediators to temozolomide in glioma and melanoma cells. OncoTarget , v. 07, p. 48081-48092, 2016.

• 2015 VESSONI, ALEXANDRE TEIXEIRA ; QUINET, ANNABEL ; DE ANDRADE-LIMA, LEONARDO CARMO ; MARTINS, DAVI JARDIM ; GARCIA, CAMILA CARRIÃO MACHADO ; ROCHA, CLARISSA RIBEIRO REILY ; VIEIRA, DEBORA BRAGA ; MENCK, CARLOS FREDERICO MARTINS . Chloroquine-induced glioma cells death is associated with mitochondrial membrane potential loss, but not oxidative stress. Free Radical Biology & Medicine , v. 90, p. 91/100, 2015.

• 2014 ROCHA, C R R ; GARCIA, C C M ; VIEIRA, D B ; Quinet, A ; DE ANDRADE-LIMA, L C ; MUNFORD, V ; BELIZÁRIO, J E ; MENCK, C F M . Glutathione depletion sensitizes cisplatin- and temozolomide-resistant glioma cells in vitro and in vivo. Cell Death & Disease , v. 5, p. e1505, 2014.

• 2013 CORTAT, BARBARA ; GARCIA, CAMILA CARRIÃO MACHADO ; QUINET, ANNABEL ; SCHUCH, ANDRÉ PASSAGLIA ; DE LIMA-BESSA, KERONNINN MORENO ; MENCK, CARLOS FREDERICO MARTINS . The relative roles of DNA damage induced by UVA irradiation in human cells. Photochemical & Photobiological Sciences (Print) , v. 12, p. 10.1039/c3pp500, 2013.

• 2013 QUINET, ANNABEL ; VESSONI, ALEXANDRE T. ; ROCHA, CLARISSA R.R. ; GOTTIFREDI, VANESA ; BIARD, DENIS ; Sarasin, Alain ; Menck, Carlos F.M. ; Stary, Anne . Gap-filling and bypass at the replication fork are both active mechanisms for tolerance of low-dose ultraviolet-induced DNA damage in the human genome. DNA Repair (Print) , v. 14, p. 27-38, 2013.

• 2012 Moraes, Maria Carolina S. ; Andrade, Annabel Quinet de ; Carvalho, Helotonio ; Guecheva, Temenouga ; Agnoletto, Mateus H. ; Henriques, João A.P. ; Sarasin, Alain ; Stary, Anne ; Saffid, Jenifer Saffid ; Menck, Carlos F.M. . Both XPA and DNA polymerase eta are necessary for the repair of doxorubicin-induced DNA lesions. Cancer Letters (Print) , v. 314, p. 108-118, 2012.

• QUINET, ANNABEL ; Carvajal-Maldonado, Denisse ; Lemacon, Delphine ; VINDIGNI, ALESSANDRO . DNA Fiber Analysis: Mind the Gap!. Methods in Enzymology. 591ed.: Elsevier, 2017, v. , p. 55-82.

• QUINET, ANNABEL ; Martins, D.J. ; VESSONI, ALEXANDRE T. ; MENCK, C F M . Translesion synthesis mechanisms depend on the nature of the DNA damage in UV-irradiated human cells. 2015. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• Quinet, A ; VESSONI, A. T. ; BIARD, D. ; Sarasin, A ; MENCK, C. F. M. ; Stary, A . Sintese translesão de danos provocados por irradiação ultravioleta no genoma de células humanas. 2013. (Apresentação de Trabalho/Conferência ou palestra).

• Quinet, A ; VESSONI, A. T. ; ROCHA, C. R. R. ; BIARD, D. ; Sarasin, A ; MENCK, C. F. M. ; Stary, A . Tolerance of damage induced by low-dose ultraviotet irradiation in the human genome. 2013. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• Quinet, A ; VESSONI, A. T. ; BIARD, D. ; MENCK, C. F. M. ; Sarasin, A ; Stary, A . DNA Polymerase eta is critical in human Xeroderma Pigmentosum group C cells irradiated with a low UVC dose. 2012. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• Quinet, A ; BIARD, D. ; MENCK, C. F. M. ; Sarasin, A ; Stary, A . A new cellular model to study response pathways to ultraviolet irradiation. 2011. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• Quinet, A ; BIARD, D. ; MENCK, C. F. M. ; Sarasin, A ; Stary, A . A new cellular model to study response pathways to ultraviolet irradiation. 2011. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• Quinet, A ; BIARD, D. ; Menck, CFM ; Sarasin, A ; Stary, A . Alternative response pathways to ultraviolet irradiation in the lack of Nucleotide Excision Repair. 2011. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

Outras produções

Projetos de pesquisa

• 2016 - Atual

  Redefinindo as vias de resposta a estresse replicativo em células de câncer deficientes em BRCA1, Descrição: Agentes que bloqueiam ou danificam as forquilhas de replicação de DNA são amplamente utilizados para a quimioterapia, na tentativa de atingir de forma seletiva células cancerosas. Pacientes com câncer de ovário portadoras de mutações no gene BRCA1 são frequentemente tratadas com medicamentos baseados em platina (como a cisplatina) para criar lesões bloqueadoras de replicação. As forquilhas de replicação paralisadas são degradadas massivamente por nucleases em células deficientes em Brca1 após tratamento com cisplatina. No entanto, desconhecem-se os mecanismos exatos que levam à sensibilidade à cisplatina em células deficientes em Brca1. A maioria dos estudos até o momento centrou-se na análise de perturbações de replicação após um tratamento com dose única de um determinado agente, negligenciando o fato de os pacientes serem tratados com doses múltiplas em um ambiente clínico. Para melhor mimetizar a quimioterapia em pacientes, nesse projeto, decidimos investigar as perturbações das forquilhas de replicação em células de câncer de ovário com deficiência de Brca1 tratadas com cisplatina um dia após a pré-exposição a este medicamento. Descobrimos que o efeito da cisplatina na estabilidade da forquilha de replicação é drasticamente diferente 24 horas após a pré-exposição em comparação com o tratamento com dose única. Em particular, quando as células são pré-expostas a este fármaco, a cisplatina não causa o fenótipo de degradação da cadeia de DNA nascente amplamente descrito observado após um único pulso. Este efeito depende da indução gênica de PrimPol, uma proteína com atividades primase e polimerase. Este projeto tem assim dois objetivos principais: (1) entender o mecanismo molecular envolvido na proteção do DNA nascente pelo aumento de expressão de PrimPol em células cancerosas deficientes em Brca1; (2) avaliar o impacto da indução de PrimPol sobre a instabilidade genômica e a viabilidade celular de câncer com deficiência de Brca1 após a cisplatina. Isso será alcançado usando uma combinação de ensaio de fibras de DNA, microscopia eletrônica e ensaios de biologia molecular e celular disponíveis no laboratório. Combinados, esses dois objetivos permitirão a compreensão de como a via de resposta a estresse replicativo dependente de PrimPol lida com lesões de DNA induzidas por cisplatina, além da caracterização de uma nova via de resposta a estresse replicativo em células deficientes em Brca1. A conclusão desse projeto apresentará a ideia de que doses múltiplas de drogas precisam ser usadas para entender completamente como a replicação responde a insultos quimioterapêuticos.. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Annabel Quinet de Andrade - Integrante / VINDIGNI, ALESSANDRO - Coordenador., Número de produções C, T & A: 1

• 2013 - 2015

  Síntese translesão de danos provocados por irradiação ultravioleta no genoma de células humanas, Descrição: Lesões no DNA provocados após exposição à radiação UV causam distorções na dupla hélice do DNA, levando assim à parada da progressão das polimerases replicativas. Mecanismos de tolerância permitem que a replicação do DNA possa ocorrer normalmente, mesmo que ao preço de mutações. Um dos mecanismos de tolerância mais estudado é a síntese de translesão (TLS, do inglês translesion DNA synthesis). Esta é assumida por polimerases especializadas, as polimerases de translesão, que são capazes de replicar o DNA através da lesão. Este processo pode ocorrer diretamente na forquilha de replicação ou de maneira independente da replicação. Neste caso, após o bloqueio da polimerase por uma lesão no DNA, a replicação recomeça após este dano, deixando assim uma lacuna de DNA simples fita para trás, que será preenchida posteriormente de forma independente da fase de síntese de DNA. Esse mecanismo é chamado de gap-filling (do inglês, preenchimento de lacunas) ou post-replication repair (do inglês, reparo pos-replicativo). Nesse contexto, esse projeto teve três objetivos principais: 1. Investigar como danos provocados por UV podem ser tolerados no genoma de células humanas; 2. Avaliar o papel das principais polimerases de TLS (Pol η, Rev1 e Pol ζ) nos mecanismos de tolerância na forquilha ou por gap-filling; 3. Investigar se a natureza do dano (dímeros de pirimidina ciclobutano, CPD, ou fotoprodutos 6-4, 6-4PP) provocado por radiação UV tem um papel na escolha do mecanismo de tolerância. Nesse intuito, utilizamos uma combinação de estratégias como o uso de fotoliases, enzimas capazes de reparar de forma específica CPD ou 6-4PP, e ensaio de crescimento de cadeia (ou DNA fiber assay) que permite a avaliação do processo de replicação a nivel molecular. Os dados obtidos demonstraram que 6-4PP e não CPD são tolerados pelo mecanismo de gap-filling, enquanto que CPD são tolerados diretamente na forquilha. Ademais, 6-4PP também são replicados por Polη e Rev1 diretamente na forquilha bloqueada. Assim, o modelo proposto é que Polη e Rev1 iniciam a tolerância de 6-4PP diretamente na forquilha bloqueada, porém como estas são incapazes de concluir a TLS, a replicação recomeça abaixo da lesão formando lacunas de DNA simples fita que são preenchidas por Polζ.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Annabel Quinet de Andrade - Integrante / Carlos Frederico Martins Menck - Coordenador., Número de produções C, T & A: 2

• 2013 - 2015

  Estudo da formação de DNA simples fita em função do ciclo celular em células humanas expostas a doses baixas de luz ultravioleta C, Descrição: A luz ultravioleta (UV) provoca ligações intra-fita no DNA entre duas pirimidinas adjacentes, danos que bloqueiam a replicação e a transcrição dessa molécula, podendo resultar em morte celular ou instabilidade genética. Essas lesões são normalmente removidas pelo mecanismo de reparo por excisão de nucleotídeos. Quando não reparados, dímeros de pirimidina podem ser tolerados por síntese translesão (translesion DNA synthesis, TLS) realizada por DNA polimerases especializadas. A TLS pode ocorrer diretamente na forquilha de replicação bloqueada pela lesão ou através de um mecanismo pós-replicativo de preenchimento de lacunas (em inglês, gap-filling), sendo esses os dois modelos propostos atualmente. No primeiro modelo, a polimerase replicativa parada pela lesão é substituída por uma polimerase de translesão que insere nucleotídeos em frente da lesão. Após a síntese de DNA através da lesão, a DNA polimerase replicativa é novamente recrutada e assume a continuação da replicação. Se a TLS não ocorre, nesse contexto, há desacoplamento entre a polimerase replicativa bloqueada e a helicase que prossegue abrindo as duas fitas do DNA, formando assim uma região de DNA simples fita (DNAsf) durante a replicação do DNA. Já no segundo modelo, a replicação bloqueada é reiniciada após cada lesão, graças à ação da DNA primase, formando assim lacunas de DNAsf frente às lesões. Lacunas de DNAsf são então geradas durante a replicação e persistem durante a fase de síntese (S) de DNA ou após essa, em fase G2 do ciclo celular até serem preenchidas por polimerases de translesão. Os dois modelos de TLS prevêem a formação de DNAsf, porém essa deve variar conforme cada hipótese: no caso da TLS diretamente na forquilha bloqueada, essa parada da polimerase deve conduzir à formação de uma região de DNAsf durante a fase S, enquanto que de acordo com o modelo de gap-filling, as regiões de DNAsf (lacunas) formadas durante a replicação continuariam presentes na fase G2. Atualmente ainda está em discussão se a TLS ocorre de acordo com um desses dois modelos ou ambos. Nesse contexto, nós visamos estabelecer uma técnica que permita a avalição específica da formação de regiões de DNAsf e isto, em função do ciclo celular. Nós utilizaremos duas estratégias de marcação específica de DNAsf. A 1ª será baseada na clivagem específica de DNAsf pela endonuclease S1 de Aspergillus oryzae gerando quebras detectadas pelo ensaio do cometa e a 2ª será através da marcação direta de DNAsf por anticorpo específico em paralelo à marcação do conteúdo em DNA por iodeto de propídio para obter a marcação de DNAsf em função do ciclo celular por citometria de fluxo.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (1) . , Integrantes: Annabel Quinet de Andrade - Integrante / Carlos Frederico Martins Menck - Coordenador / Davi Jardim Martins - Integrante.

• 2009 - 2012

  Implicação da DNA polimerase eta na resposta a danos no DNA em células deficientes em reparo por excisão de nucleotídeos, Descrição: Os danos do DNA interferem com a sua replicação e transcrição. Eles são normalmente removidos por mecanismos de reparo, como o reparo por excisão de nucleotídeos (NER). Lesões não removidas também podem ser toleradas por processos específicos de síntese translesão (TLS). Durante este trabalho de tese de doutorado, estudamos a implicação da via NER e da DNA polimerase η (Polη), associada à TLS, na resposta aos danos no DNA provocados pela irradiação ultravioleta (UV) e por um agente quimioterápico, a doxorrubicina. As principais lesões provocadas pela luz UV são os dímeros de pirimidina ciclobutano (CPDs) e as pirimidinas (6-4) pirimidonas (6-4PPs) que são removidas pelo NER. Os resultados obtidos sobre a formação de regiões de DNA simples fita e os dados de ciclo celular indicam que as lesões 6-4PPs são toleradas por un mecanismo de reparo pós-replicativo em células XP-C deficientes em NER (xeroderma pigmentosum do grupo C). Em seguida, buscamos determinar a contribuição da Polη na tolerância de lesões UV em células XP-C. De fato, é conhecido que a Polη é responsável pela replicação dos CPDs, porém a ausência dessa em células proficientes em NER não as torna hypersensíveis à irradiação UV. Além disso, foi sugerido que Polη poderia estar envolvida na TLS dos 6-4PPs. A expressão do gene POLH, que codifica Polη, foi silenciada através de shRNA em células XP-C, sendo assim estabelecida a primeira linhagem estável de fibroblastos humanos deficientes em ambas proteínas XPC e Polη. Essa redução funcional da expressão de Polη em células XP-C provocou, em células irradiadas com doses baixas de luz UV, uma parada irreversível no ciclo celular, a formação de quebras no DNA (incluindo quebras simples e dupla fita) e morte celular. Esses resultados revelam um papel crucial da Polη na sobrevida das células deficientes em NER após irradiação UV e sugerem que Polη possa também participar da TLS de lesões tipo 6-4PP. Por outro lado, participei de trabalho no qual demonstramos que células deficientes em NER ou em Polη são sensibilizadas pelo tratamento com doxorrubicina, o que indica que o NER e a Polη participam da resposta aos danos induzidos por esse agente. Em conclusão, ao longo do meu trabalho de tese, colocamos em evidência interconexões complexas entre a Polη e o NER em resposta a diferentes agentes genotóxicos.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Doutorado: (1) . , Integrantes: Annabel Quinet de Andrade - Integrante / Anne Stary - Coordenador / Alain Sarasin - Integrante / Carlos Frederico Martins Menck - Integrante., Número de produções C, T & A: 6

• 2009 - 2009

  Do xeroderma pigmentosum ao câncer: implicação da recombinação homóloga, Descrição: A síndrome xeroderma pigmentoso (XP) é caracterizada pela hipersensibilidade à luz ultravioleta (UV) com desenvolvimento precoce de cancer da pele em partes do corpo expostas ao sol. Os raios UV são altamente mutagênico e induzem ligações intra-fita no DNA que bloqueiam a progressão das polimerases replicativas. Estas lesões são normalmente corrigidas pelo mecanismo de reparo por excisão de nucleótidos (NER), ou tolerados por DNA polimerases especializadas (TLS, síntese translesional). Deficiência em uma dessas formas é a causa desta doença rara, que representa um bom modelo para o estudo da carcinogênese induzida por UV. Nos seres humanos, a TLS é o principal mecanismo conhecido de tolerância a danos induzidos pelos raios UV, mas em outros organismos, a recombinação homóloga (RH), também está envolvida. A RH é um mecanismo de reparo de quebras de dupla fitado DNA (DSB, do inglês double-strand breaks) e de acordo com a nossa hipótese, também permitiria a replicação de células humanas lesionadas por UV. Nós estudamos o envolvimento da RH em fibroblastos XP do grupo de complementação C (XP-C) deficiente em NER. Nós mostramos que, em comparação com as células proficientes em NER, a irradiação de células XP-C com baixa dose de UVC provoca um bloqueio na fase G2 / M do ciclo celular e induz um aumento significativo no nível de fosforilação da histona H2AX (γ -H2AX), marcador clássico de DSB. Vinte e quatro horas após o tratamento, apenas as células XP-C permanecem positivas para γ-H2AX e estas estão predominantemente nas fases S e G2 / M. Estudamos também a cinética de recrutamento da proteína chave da RH, Rad51, aos focos de γ-H2AX em células XP-C e selvagens. Os nossos resultados são consistentes com a hipótese de que o bloqueio da forquilha de replicação por lesões não reparadas em fibroblastos XP-C gera a formação de DSB. A formação de DSB é seguida pelo recrutamento significativo de Rad51, sugerindo um envolvimento da RH na sobrevivência das células XP-C irradiadas com UVC. A tolerância de lesões induzidas por UV permite a sobrevivência de células lesionadas que acumulam mutações, o que pode desencadear o processo de tumorigênese. O estudo de via (s) alternativa (s) de tolerância destas lesões permite a compreensão da etiologia do câncer de pele em pacientes XP, assim como na população em geral.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) . , Integrantes: Annabel Quinet de Andrade - Integrante / Anne Stary - Coordenador / Alain Sarasin - Integrante.

• 2008 - 2008

  Implicação do fator de transcriçao NFAT no processo inflamatório nas células brónquicas de pacientes com fibrose cística, Descrição: A fibrose cística (FC) é uma doença associada à mutação de um gene que codifica o canal de cloro CFTR. No paciente, essa doença pulmonar é caracterizada principalmente por uma inflamação crônica com uma elevada concentração de interleucina-8 (IL-8). Esta desregulação está associada com a ativação constitutiva de vias de sinalização que envolvem o cálcio intracelular (Ca2 + i). Quando Ca2 + i é mobilizado, ele pode ativar o fator de transcrição NFAT e também ter um papel pró-inflamatório. O objetivo deste estudo foi analisar o papel de NFAT em ​​processos inflamatórios, utilizando células epiteliais brônquicas humanas CF e não-CF. Foi estudado o efeito de inibidores de NFAT sobre a expressão e secreção de IL-8, bem como a atividade transcricional de NFAT.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) . , Integrantes: Annabel Quinet de Andrade - Integrante / Olivier Tabary - Coordenador / Vinciane Saint-Criq - Integrante.

• 2007 - 2007

  Fisiologia dos eritrócitos: desenvolvimento de um novo teste celular baseado na fragilidade osmotica das células, Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (1) . , Integrantes: Annabel Quinet de Andrade - Integrante / Stéphane Egée - Coordenador / Serge Thomas - Integrante.

Prêmios