Fernanda Alvarenga Lima Barroso

Formação complementar

Idiomas

Áreas de atuação

Participação em eventos

Produções bibliográficas

• BATISTA, VIVIANE LIMA ; DE JESUS, LUÍS CLÁUDIO LIMA ; TAVARES, LAÍSA MACEDO ; Barroso, Fernanda Lima Alvarenga ; FERNANDES, LUCAS JORGE DA SILVA ; FREITAS, ANDRIA DOS SANTOS ; AMERICO, MONIQUE FERRARY ; DRUMOND, MARIANA MARTINS ; Mancha-Agresti, Pamela ; FERREIRA, ENIO ; LAGUNA, JULIANA GUIMARÃES ; ALCANTARA, LUIZ CARLOS JÚNIOR ; AZEVEDO, VASCO . Paraprobiotics and Postbiotics of Lactobacillus delbrueckii CIDCA 133 Mitigate 5-FU-Induced Intestinal Inflammation. Microorganisms , v. 10, p. 1418, 2022.

• COELHO-ROCHA, NINA DIAS ; DE JESUS, LUÍS CLÁUDIO LIMA ; BARROSO, FERNANDA ALVARENGA LIMA ; DA SILVA, TALES FERNANDO ; FERREIRA, ENIO ; GONÇALVES, JOSÉ EDUARDO ; DOS SANTOS MARTINS, FLAVIANO ; DE OLIVEIRA CARVALHO, RODRIGO DIAS ; BARH, DEBMALYA ; AZEVEDO, VASCO ARISTON DE CARVALHO . Evaluation of Probiotic Properties of Novel Brazilian Lactiplantibacillus plantarum Strains. Probiotics and Antimicrobial Proteins , v. 14, p. 1, 2022.

• BARROSO, FERNANDA ALVARENGA LIMA ; DE JESUS, LUÍS CLÁUDIO LIMA ; DA SILVA, TALES FERNANDO ; BATISTA, VIVIANE LIMA ; LAGUNA, JULIANA ; COELHO-ROCHA, NINA DIAS ; VITAL, KÁTIA DUARTE ; FERNANDES, SIMONE ODÍLIA ANTUNES ; CARDOSO, VALBERT NASCIMENTO ; FERREIRA, ENIO ; MARTINS, FLAVIANO SANTOS ; DRUMOND, MARIANA MARTINS ; Mancha-Agresti, Pamela ; BIRBRAIR, ALEXANDER ; BARH, DEBMALYA ; AZEVEDO, VASCO . Lactobacillus delbrueckii CIDCA 133 Ameliorates Chemotherapy-Induced Mucositis by Modulating Epithelial Barrier and TLR2/4/Myd88/NF-κB Signaling Pathway. Frontiers in Microbiology , v. 13, p. 1-14, 2022.

• BARROSO, FERNANDA ALVARENGA LIMA ; DE JESUS, LUÍS CLÁUDIO LIMA ; DE CASTRO, CAMILA PROSPERI ; BATISTA, VIVIANE LIMA ; FERREIRA, ÊNIO ; FERNANDES, RENATA SALGADO ; DE BARROS, ANDRÉ LUÍS BRANCO ; LECLERQ, SOPHIE YVETTE ; AZEVEDO, VASCO ; Mancha-Agresti, Pamela ; DRUMOND, MARIANA MARTINS . Intake of Lactobacillus delbrueckii (pExu:hsp65) Prevents the Inflammation and the Disorganization of the Intestinal Mucosa in a Mouse Model of Mucositis. Microorganisms , v. 9, p. 107, 2021.

• DE JESUS, LUÍS CLÁUDIO LIMA ; DE JESUS SOUSA, THIAGO ; COELHO-ROCHA, NINA DIAS ; PROFETA, RODRIGO ; BARROSO, FERNANDA ALVARENGA LIMA ; DRUMOND, MARIANA MARTINS ; Mancha-Agresti, Pamela ; FERREIRA, ÊNIO ; BRENIG, BERTRAM ; ABURJAILE, FLÁVIA FIGUEIRA ; AZEVEDO, VASCO . Safety Evaluation of Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis CIDCA 133: a Health-Promoting Bacteria. Probiotics and Antimicrobial Proteins , v. 13, p. 1, 2021.

• BATISTA, VIVIANE LIMA ; DA SILVA, TALES FERNANDO ; DE JESUS, LUÍS CLÁUDIO LIMA ; COELHO-ROCHA, NINA DIAS ; BARROSO, FERNANDA ALVARENGA LIMA ; TAVARES, LAISA MACEDO ; AZEVEDO, VASCO ; Mancha-Agresti, Pamela ; DRUMOND, MARIANA MARTINS . Probiotics, Prebiotics, Synbiotics, and Paraprobiotics as a Therapeutic Alternative for Intestinal Mucositis. Frontiers in Microbiology , v. 11, p. 2246, 2020.

• TAVARES, LAÍSA M. ; DE JESUS, LUÍS C. L. ; DA SILVA, TALES F. ; BARROSO, FERNANDA A. L. ; BATISTA, VIVIANE L. ; COELHO-ROCHA, NINA D. ; AZEVEDO, VASCO ; DRUMOND, MARIANA M. ; Mancha-Agresti, Pamela . Novel Strategies for Efficient Production and Delivery of Live Biotherapeutics and Biotechnological Uses of Lactococcus lactis: The Lactic Acid Bacterium Model. FRONTIERS IN BIOENGINEERING AND BIOTECHNOLOGY , v. 8, p. 1, 2020.

• PEREIRA, VANESSA BASTOS ; ZURITA-TURK, MERITXELL ; SARAIVA, TESSÁLIA DINIZ LUERCE ; DE CASTRO, CAMILA PRÓSPERI ; SOUZA, BIANCA MENDES ; MANCHA AGRESTI, PAMELA ; LIMA, FERNANDA Alvarenga ; PFEIFFER, VANESSA NATHALIE ; AZEVEDO, MARCELA SANTIAGO PACHECO ; ROCHA, CLARISSA SANTOS ; PONTES, DANIELA SANTOS ; AZEVEDO, VASCO ; MIYOSHI, ANDERSON . DNA Vaccines Approach: From Concepts to Applications. WORLD JOURNAL OF VACCINES , v. 04, p. 50-71, 2014.

• DEL CARMEN, S. ; ZURITA-TURK, M. ; LIMA, F. ALVARENGA ; DOS SANTOS, J.S. COELHO ; LECLERCQ, S.Y. ; CHATEL, J.-M. ; AZEVEDO, V. ; DE MORENO DE LEBLANC, A. ; MIYOSHI, A. ; LEBLANC, J.G. . A Novel Interleukin-10 Dna Mucosal Delivery System Attenuates Intestinal Inflammation in a Mouse Model. European Journal of Inflammation , v. 11, p. 641-654, 2013.

• LEBLANC, JEAN ; CARMEN, SILVINA ; TURK, MERITXELL ; LIMA, FERNANDA ; PONTES, DANIELA ; MIYOSHI, ANDERSON ; AZEVEDO, VASCO ; DE LEBLANC, ALEJANDRA . Mechanisms Involved in the Anti-Inflammatory Properties of Native and Genetically Engineered Lactic Acid Bacteria. Anti-Infective Agents , v. 11, p. 59-69, 2012.

• AMERICO, M. F. ; Andria dos Santos Freitas ; Tales Fernando da Silva ; Luís Lima de Jesus ; Fernanda Alvarenga Lima Barroso ; Rodrigo Dias de Oliveira Carvalho ; Vasco Ariston De Carvalho . Uso de Bactérias Lácticas como Vetores de Entrega de Vacinas Recombinates.. In: Monique Ferrary Américo, Andria Dos Santos Freitas, Tales Fernando Da Silva, Luís Lima De Jesus, Fernanda Alvarenga Lima, Rodrigo Dias De Oliveira Carvalho, Vasco Ariston De Carvalho Azevedo. (Org.). Uso de Bactérias Lácticas como Vetores de Entrega de Vacinas Recombinates.. 1ed.: , 2022, v. 1, p. 102-120.

• Cláudio Lima de Jesus, Luís ; Alvarenga Lima, Fernanda ; Dias Coelho-Rocha, Nina ; Fernando da Silva, Tales ; Paz, Júlia ; AZEVEDO, VASCO ; Mancha-Agresti, Pamela ; Martins Drumond, Mariana . Recombinant Probiotics and Microbiota Modulation as a Good Therapy for Diseases Related to the GIT. The Health Benefits of Foods - Current Knowledge and Further Development. 1ed.: IntechOpen, 2020, v. , p. 1-30.

• Fernanda Alvarenga Lima ; Luís Cláudio Lima de Jesus ; Viviane Lima Batista ; Laísa Macedo Tavares ; Rafael Assis ; Mariana Martins Drumond ; AZEVEDO, V. ; MANCHA-AGREST, P. . The Gastrointestinal Disease to the Microbiota Treatment: From the Present to the Future. The Gastrointestinal Disease to the Microbiota Treatment: From the Present to the Future. 01ed.Las Vegas: Open Access eBooks, 2019, v. 2, p. 1-32.

• Vanessa Bastos Pereira ; Marcela Santiago Pacheco Azevedo ; Saraiva, T. D. L. S ; Bianca Mendes Souza ; Meritxell Zurita Turk ; Camila Prósperi De Castro ; Pamela Mancha Agresti ; Fernanda Alvarenga Lima ; AZEVEDO, V. ; Daniela Santos Pontes ; MIYOSHI, A. . Use of bacteria in DNA vaccine delivery. http://www.formatex.info/microbiology4/vol3/1993-2003.pdf. 1ed.Espanha: Formatex, 2013, v. 3, p. 1993-2003.

• Jean Guy LeBlanc ; Silvina del Carmen ; Fernanda Alvarenga Lima ; Meritxell Zurita Turk ; MIYOSHI, A. ; AZEVEDO, V. ; Alejandra de Moreno de LeBlanc . Prospective Uses of Genetically Engineered Lactic Acid Bacteria for the Prevention of Inflammatory Bowel Diseases. Prospective Uses of Genetically Engineered Lactic Acid Bacteria for the Prevention of Inflammatory Bowel Diseases. 1ed.Londres: IntechOpen, 2012, v. 1, p. 223-238.

• LIMA, F. A. ; Castro, C.P ; SOUZA, B.M ; Saraiva, T. D. L. S ; PEREIRA, V. B. ; MANCHA-AGREST, P. ; ZURITA-TURK, M. ; ROCHA, C. ; PFEIFFER, V. N. ; AZEVEDO, V. ; MIYOSHI, A. . Bactérias Lácticas: aplicações e perspectivas biotecnológicas. Microbiologia in foco, São Paulo, p. 4 - 12, 02 out. 2011.

• MANCHA-AGREST, P. ; PROSPERI, C.C ; Santos, J. S. C dos ; LIMA, F. A. ; ZURITA-TURK, M. ; PEREIRA, V. B. ; Saraiva, T. D. L. S ; AZEVEDO, VASCO ; LECLERCQ, S.Y. ; MIYOSHI, A. . Desenvolvimento de uma nova estratégia vacinal contra tuberculose utilizando Lactococus Lactis invasivas como veículos para a entrega do plasmídeo vacinal codificando o antígeno Ag85A de Mycobacterium Tuberculosis a células mamíferas. In: XXI Congresso Latinoamericano de Microbiología, 2012, Santos. XXI Congresso Latinoamericano de Microbiología, 2012, Santos Brasil, 2012.

• PROSPERI, C.C ; Santos, J. S. C dos ; MANCHA-AGREST, P. ; LIMA, F. A. ; ZURITA-TURK, M. ; Saraiva, T. D. L. S ; PEREIRA, V. B. ; AZEVEDO, V. ; LECLERCQ, S.Y. ; MIYOSHI, A. . Otimização de um plasmídeo vacinal, a ser veiculado por linhagens invasivas de Lactococcus lactis, por introdução da Sequência de Endereçamento Nuclear do vírus SV40. In: XXI Congresso Latinoamericano de Microbiología, 2012, Santos. XXI Congresso Latinoamericano de Microbiología, 2012, Santos Brasil, 2012.

• ZURITA-TURK, M. ; LIMA, F. A. ; DEL CARMEN, S. ; Santos, J. S. C dos ; PROSPERI, C.C ; MANCHA-AGREST, P. ; PEREIRA, V. B. ; AZEVEDO, V. ; LECLERCQ, S.Y. ; DE MORENO DE LEBLANC, A. ; LEBLANC, J.G. ; MIYOSHI, A. . Anti inflamatory effect of a fibronectin-binding protein expressing Lactococcus lactis containing a eukaryotic DNA vector coding for interleukin 10 using a murine model of Crohn´s disease.. In: XXXVII Congress of Brazilian Society of Immunology, 2012, Campos do Jordão. XXXVII Congress of Brazilian Society of Immunology, 2012, Campos do Jordão, Brasil, 2012.

• LIMA, F. A. ; ZURITA-TURK, M. ; COSTA, K. M. ; PROSPERI, C.C ; MANCHA-AGREST, P. ; PEREIRA, V. B. ; Saraiva, T. D. L. S ; PFEIFFER, V. N. ; Le Loir, Y. ; AZEVEDO, V. ; MIYOSHI, A. . Clonagem, expressão e endereçamento protéico da enterotoxina B de Staphylococcus aureus em Lactococcus lactis. In: 26 Congresso de Microbiologia, 2011, Foz do Iguaçu. 26 Congresso de Microbiologia, 2011.

• ZURITA-TURK, M. ; LIMA, F. A. ; SANTOS, J. ; PROSPERI, C.C ; MANCHA-AGREST, P. ; Saraiva, T. D. L. S ; PEREIRA, V. B. ; PFEIFFER, V. N. ; AZEVEDO, V. ; LECLERCQ, S. Y. ; MIYOSHI, A. . Desenvolvimento de uma nova estratégia para tratamento de doenças inflamatórias intestinais utilizando Lactococcus lactis invasivas para entrega, em células mamíferas, de um plasmídeo terapêutico codificando a Interleucina-10 (IL-10) de Mus musculus.. In: 26 Congresso de Microbiologia, 2011, Foz do Iguaçu. 26 Congresso de Microbiologia, 2011.

• PEREIRA, V. B. ; MANCHA-AGREST, P. ; SANTOS, J. ; Saraiva, T. D. L. S ; ZURITA-TURK, M. ; PROSPERI, C.C ; LIMA, F. A. ; AZEVEDO, V. ; LECLERCQ, S. Y. ; MIYOSHI, A. . Construction and functional evaluation of a DNA vaccine for expression of the antigen ESAT-6 of Mycobacterium tuberculosis in mammalian cells, using an invasive lactic bacterium as a carrier vehicle.. In: 26 Congresso de Microbiologia, 2011, Foz do Iguaçu. 26 Congresso de Microbiologia, 2011.

• MANCHA-AGREST, P. ; SANTOS, J. ; PFEIFFER, V. N. ; PEREIRA, V. B. ; LIMA, F. A. ; ZURITA-TURK, M. ; PROSPERI, C.C ; Saraiva, T. D. L. S ; AZEVEDO, V. ; LECLERCQ, S. Y. ; MIYOSHI, A. . Construção e avaliação funcional do plasmídeo vacinal pValac:Ag85A: Desenvolvimento de uma nova estratégia vacinal contra a tuberculose.. In: 26 Congresso de Microbiologia, 2011, Foz do Iguaçu. 26 Congresso de Microbiologia, 2011.

• PROSPERI, C.C ; SANTOS, J. ; LIMA, F. A. ; ZURITA-TURK, M. ; MANCHA-AGREST, P. ; PEREIRA, V. B. ; PFEIFFER, V. N. ; Saraiva, T. D. L. S ; AZEVEDO, V. ; LECLERCQ, S. Y. ; MIYOSHI, A. . Otimização de instrumentos genéticos para utilização de Lactococcus lactis como veículos carreadores de vacinas gênicas.. In: 26 Congresso de Microbiologia, 2011, Foz do Iguaçu. 26 Congresso de Microbiologia, 2011.

• LIMA, F. A. ; AZEVEDO, V. ; MIYOSHI, A. . Expressão heteróloga e endereçamento protéico em Lactococcus lactis da proteína hipotética Rv1419p de Mycobacterium tuberculosis: desenvolvimento de vacina alternativa contra a tuberculose experimental. In: 55º Congresso Brasileiro de Genética, 2009, Águas de Lindóia. Anais do 55º Congresso Brasileiro de Genética, 2009.

• LIMA, F. A. ; Coimbra, M.M.B ; Souza, A.M ; COSTA, K. M. ; AZEVEDO, V. ; MIYOSHI, A. . Clonagem, expressão heteróloga e endereçamento protéico em Lactococcus lactis da proteína hipotética Rv1419p de Mycobacterium tuberculosis. 2009. (Apresentação de Trabalho/Outra).

• LIMA, F. A. ; COSTA, K. M. ; AZEVEDO, M. S. P ; ALMEIDA, M. O. ; Viguetti, S.C.Z ; Saraiva, T. D. L. S ; AZEVEDO, V. ; MIYOSHI, A. . Clonagem, expressão e endereçamento protéico em Lactococcus lactis da proteína de invasão IpaC de Shigella sp: desenvolvimento de nova estratégia vacinal contra a shiguelose. 2008. (Apresentação de Trabalho/Outra).

Projetos de pesquisa

• 2011 - 2014

  Bactérias lácticas e a imunidade de mucosas: construção de instrumentos genéticos para utilização de bactérias lácticas como veículos carreadores de vacinas gênicas, Descrição: CAPES-COFECUB 720/11; Diversos agentes infecciosos invadem o hospedeiro através das superfícies das mucosas. Assim, o uso de bactérias como veículos carreadores de plasmídeos vacinais, por via oral, constitui uma promissora estratégia de vacinação. Bactérias patogênicas atenuadas dos gêneros Shigella, Yersinia, Listeria e Salmonella têm sido utilizadas para a entrega de vacinas de DNA em células mamíferas. Contudo, esses organismos apresentam riscos de reversão, não sendo totalmente seguros para uso humano, especialmente em crianças e pacientes imunocomprometidos. Tal problema poderia ser solucionado através da utilização de bactérias não patogênicas e comensais, tal como as bactérias lácticas (BL). As BL compõem um grupo de microrganismos Gram-positivos que são utilizados há séculos em processos de fermentação e preservação de alimentos e, por isso, são consideradas seguras. Neste contexto, a utilização de BL como veículos carreadores de vacinas gênicas poderia ser considerada a próxima fronteira a ser quebrada na área. Nosso grupo, desde 1998, vem implementando novas utilizações biotecnológicas para as BL; e dentre estas novas utilizações, nós também vislumbramos novas estratégias vacinais utilizando estas bactérias. Nesse sentido, nós, recentemente, conseguimos um feito inédito na área: nós desenvolvemos linhagens invasivas de Lactococcus lactis, uma bactéria láctica modelo, capazes de entregar plasmídeos, contendo uma unidade de expressão eucariótica, para células epiteliais humanas. Foi demonstrado que L. lactis expressando a internalina A (InlA) de Listeria monocytogenes foi internalizada por células epiteliais in vitro e por enterócitos in vivo após administração oral em porcos-da-índia; o que promoveu a entrega de plasmídeos contendo a ORF GFP levando à produção da mesma nos animais. Nesse contexto, nós acreditamos que a utilização de linhagens invasivas de L. lactis para a entrega de vacinas gênicas tem impacto no estudo da imunidade de mucosas.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Fernanda Alvarenga Lima Barroso - Integrante / Anderson Miyoshi - Coordenador / Vasco Azevedo - Integrante.

• 2011 - 2014

  Construção de linhagens invasivas de Lactococcus lactis para a entrega e expressão da citocina IL-10 em células mamíferas: desenvolvimento de uma estratégia alternativa para tratamento de doenças inflamatórias intestinais, Descrição: A mucosa intestinal é uma das primeiras linhas de defesa do organismo e por isso é um alvo atraente para a entrega de drogas biológicas que regulam o delicado equilíbrio entre o controle de infecções e prevenção de doenças inflamatórias e autoimunes. Assim, o uso de bactérias como carreadoras de plasmídeos vacinais e/ou terapêuticos pela rota oral constitui uma estratégia de vacinação promissora. Bactérias patogênicas atenuadas tais como Shigella flexneri, Yersinia enterocolitica, Listeria monocytogenesis e Salmonella thiphymurium vêm sendo utilizadas para tais fins, ainda que as mesmas apresentem risco de reversão ao fenótipo selvagem, não sendo totalmente seguros para uso humano, especialmente em crianças e pacientes imunocomprometidos. Sendo assim, a utilização de bactérias não patogênicas e comensais, tal como as bactérias lácticas (BL), constitui uma alternativa mais atraente e segura. As BL compõem um grupo bastante heterogêneo de microrganismos Gram-positivos que são utilizados há séculos em processos de fermentação e preservação de alimentos e, por isso, são considerados seguros. Lactococcus lactis é uma das bactérias lácticas mais bem estudas, figurando como microrganismo modelo no estudo das mesmas, é considerada GRAS (do inglês, Generally Regarded As Safe) por não ser patogênica e vem sendo extensivamente utilizada para a produção e entrega de antígenos e citocinas ao nível de mucosas. Dessa maneira, o uso de L. lactis como veículos para a terapia de DNA é bastante promissor. Neste contexto, foram desenvolvidas linhagens invasivas de L. lactis além de um novo plasmídeo capaz de se replicar em L. lactis, contendo um cassete de expressão eucariótica. Assim, a utilização de uma linhagem invasiva de L. lactis capaz de entregar o vetor de expressão eucariótico pValac codificando a Interleucina 10 (IL-10) de Mus musculus, uma potente citocina anti-inflamatória, representaria uma nova estratégia para o desenvolvimento de uma terapêutica alternativa contra as doe. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Fernanda Alvarenga Lima Barroso - Integrante / Anderson Miyoshi - Coordenador / Vasco Azevedo - Integrante / Meritxell ZURITA-TURK - Integrante / Jean Guy LeBlanc - Integrante.

• 2009 - 2010

  Clonagem, expressão e endereçamento protéico em Lactococcus lactis da proteína hipotética Rv1419p de Mycobacterium tuberculosis, Descrição: A tuberculose, causada pelo bacilo Mycobacterium tuberculosis, é uma das doenças infecciosas mais graves no mundo e, apesar da vacinação com Mycobacterium bovis (BCG), é responsável por milhões de mortes anuais. Devido ao alto impacto na saúde pública acarretada pela tuberculose, a ausência de uma vacina preventiva eficaz e o aumento de problemas terapêuticos decorrentes da resistência a fármacos, existe uma clara necessidade de um melhor entendimento dos mecanismos da imunopatogênese da doença e desenvolvimento de novas estratégias profiláticas. Neste contexto, esse trabalho propõe-se a construir linhagens de Lactococcus lactis produtoras da proteína hipotética Rv1419p de M. tuberculosis H37Rv e avaliar o potencial biotecnológico e imuno-terapêutico dessas linhagens na geração de respostas imunes eficazes contra a tuberculose.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Fernanda Alvarenga Lima Barroso - Integrante / Anderson Miyoshi - Coordenador / Vasco Azevedo - Integrante., Financiador(es): Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - Bolsa.

• 2008 - 2011

  Construção de linhagens de Lactococcus lactis produtoras do antígeno Hsp65 de Mycobacterium leprae: desenvolvimento tecnológico do processo de obtenção da proteína recombinante livre de LPS e avaliação das linhagens na profilaxia contra a TB experimental, Descrição: A tuberculose (TB), ainda hoje, permanece como um dos principais problemas de saúde pública do mundo. Foi estimado que, cerca de um terço da população mundial, está infectada com o M. tuberculosis e três milhões de mortes são atribuídas, anualmente, à doença. A única vacina atualmente disponível contra a tuberculose é a BCG (Bacilo Calmette-Guérin) e, no entanto, esta possui eficácia bastante variável, de 0 a 80%, especialmente em países endêmicos. Diante disso, o desenvolvimento de novas vacinas contra a tuberculose tornou-se uma prioridade global. Uma das estratégias vacinais propostas e utilizadas para burlar esta situação é a utilização de antígenos candidatos provenientes de organismos filogeneticamente próximos. O antígeno Hsp65 de Mycobacterium leprae é bem caracterizado e possui propriedades imunogênicas capazes de gerar respostas imunes potentes contra diferentes agentes infecciosos. Entretanto, o maior inconveniente da utilização deste antígeno, seja na sua forma nativa ou recombinante, está relacionado à inexistência de um produto livre de contaminação por lipopolissacarídeo (LPS), contaminação seguramente proveniente dos processos de obtenção da molécula; o que pode gerar resultados falso-positivos e também comprometer sua utilização clínica. Neste contexto, este projeto propõe-se (i) a construir linhagens de Lactococcus lactis produtoras da forma citoplasmática e secretada do antígeno Hsp65 de M. leprae, (ii) avaliar a capacidade produtiva destas linhagens em relação à quantidade, qualidade e teor de LPS do antígeno recombinante, e (iii) caracterizar e avaliar o potencial vacinal das linhagens contra a tuberculose experimental; o que, por sua vez, propiciará o desenvolvimento tecnológico do processo de obtenção da proteína recombinante livre de LPS, e também contribuirá com a pesquisa e o desenvolvimento de uma nova estratégia vacinal não só contra a TB, mas também contra microrganismos filogeneticamente relacionados, como, por exemplo, M. leprae.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Fernanda Alvarenga Lima Barroso - Integrante / Anderson Miyoshi - Coordenador / Vasco Azevedo - Integrante / Marcela Santiago Pacheco de Azevedo - Integrante / Kátia Moraes Costa - Integrante / Tessália Diniz Luerce Saraiva - Integrante / Sarah Caroline Zanetti e Viguetti - Integrante / Aracelle Maria de Souza - Integrante.

• 2007 - 2008

  Clonagem e Expressão do gene IpaC de Shigella sp em L. lactis, Descrição: As espécies do gênero Shigella causam uma infecção intestinal grave de transmissão via fecal-oral, denominada shiguelose. Essa doença é de incidência significativa principalmente em países em desenvolvimento. A alta incidência nesses países é geralmente atribuída à falta de saneamento básico, condições de higiene inadequadas, sub-nutrição, comportamento de risco e alto custo dos antibióticos. Após o sequenciamento do genoma de Shigella, vários genes de virulência foram identificados, sendo a maioria encontrada em um plasmídio (pINV) de 220 Kb. O pINV codifica 2 loci cruciais para seu fenótipo invasivo: o locus mxi-sp e o locus ipa. O operon mxi-spa codifica os componentes do sistema de secreção tipo III, importante por carrear proteínas do citoplasma bacteriano para a membrana citoplasmática ou para o citoplasma da célula hospedeira. O operon ipa codifica os antígenos plasmidiais de invasão denominados IpaA, IpaB, IpaC e IpaD, os quais são efetores para o processo de invasão bacteriana. Sabendo que essas proteínas podem ser altamente imunogênicas, principalmente a proteína IpaC, esses antígenos plasmidiais de invasão poderiam ser utilizados na construção de uma vacina, sendo carreados e secretados por uma outra bactéria não-patogênica. O presente trabalho tem como objetivo clonar o gene que codifica a proteína IpaC em um vetor xilose-induzido (pXies) e expressar essa proteína em bactérias da espécie Lactococcus lactis, a bactéria láctica modelo.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Fernanda Alvarenga Lima Barroso - Integrante / Anderson Miyoshi - Coordenador / Vasco Azevedo - Integrante.

Projetos de desenvolvimento

• 2005 - Atual

  Construção de um sistema food-grade de expressão gênica e endereçamento protéico para Lactococcus lactis, Descrição: As bactérias lácticas (BL) constituem um grupo de microrganismos Gram-positivos e anaeróbios facultativos capazes de converter açúcares em ácido láctico. Lactococcus lactis, a mais bem caracterizada bactéria láctica é um microrganismo amplamente utilizado na indústria alimentícia para a produção e preservação de produtos lácteos fermentados. Isso fez com que essa bactéria tenha sido extensivamente estudada para o uso na produção de proteínas de interesse biotecnológico com alto valor agregado, como por exemplo, enzimas e antígenos. Dentre os mais promissores sistemas de expressão gênica já desenvolvidos, encontra-se o sistema NICE (nisin controlled expression system), já utilizado para a produção de diversas proteínas heterólogas em diferentes BL; contudo, esse sistema é induzido pela presença de nisina, a qual pode inviabilizar a sua utilização extralaboratorial. Assim, foi desenvolvido em nosso laboratório um sistema de expressão gênica e endereçamento protéico para L. lactis denominado XIES, o qual combina o forte promotor PxylT, elementos genéticos (RBS e SP) da proteína Usp45 de L. lactis e o gene repórter nuc de Staphylococcus aureus. Esse sistema demonstrou ser capaz de produzir elevados níveis da proteína, além de corretamente endereçar o produto final para o citoplasma ou meio extracelular. No entanto, o sistema XIES não pode ser classificado como food grade , uma vez que utiliza como marcador de seleção um gene de resistência a antibióticos. Dessa forma, é extremamente interessante que a realização de uma construção na qual os genes responsáveis pelo metabolismo da xilose, fenótipo variável em linhagens de L. lactis, funcionassem como marcadores de seleção. Assim, em um meio de cultivo bacteriano suplementado com xilose como única fonte de carbono, apenas as bactérias que contivessem os genes xylRAB (responsáveis pelo metabolismo de xilose) poderiam se proliferar e desempenhar a função desejada: a produção de proteínas de interesse.. , Situação: Concluído; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Fernanda Alvarenga Lima Barroso - Integrante / Anderson Miyoshi - Coordenador / Vasco Azevedo - Integrante / Marcelle Oliveira de Almeida - Integrante., Financiador(es): Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - Bolsa / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - Auxílio financeiro.

• 2005 - 2010

  Construção de um sistema food-grade de expressão gênica e endereçamento protéico para Lactococcus lactis, Descrição: As bactérias lácticas (BL) constituem um grupo de microrganismos Gram-positivos e anaeróbios facultativos capazes de converter açúcares em ácido láctico. Lactococcus lactis, a mais bem caracterizada bactéria láctica é um microrganismo amplamente utilizado na indústria alimentícia para a produção e preservação de produtos lácteos fermentados. Isso fez com que essa bactéria tenha sido extensivamente estudada para o uso na produção de proteínas de interesse biotecnológico com alto valor agregado, como por exemplo, enzimas e antígenos. Dentre os mais promissores sistemas de expressão gênica já desenvolvidos, encontra-se o sistema NICE (nisin controlled expression system), já utilizado para a produção de diversas proteínas heterólogas em diferentes BL; contudo, esse sistema é induzido pela presença de nisina, a qual pode inviabilizar a sua utilização extralaboratorial. Assim, foi desenvolvido em nosso laboratório um sistema de expressão gênica e endereçamento protéico para L. lactis denominado XIES, o qual combina o forte promotor PxylT, elementos genéticos (RBS e SP) da proteína Usp45 de L. lactis e o gene repórter nuc de Staphylococcus aureus. Esse sistema demonstrou ser capaz de produzir elevados níveis da proteína, além de corretamente endereçar o produto final para o citoplasma ou meio extracelular. No entanto, o sistema XIES não pode ser classificado como ?food grade?, uma vez que utiliza como marcador de seleção um gene de resistência a antibióticos. Dessa forma, é extremamente interessante que a realização de uma construção na qual os genes responsáveis pelo metabolismo da xilose, fenótipo variável em linhagens de L. lactis, funcionassem como marcadores de seleção. Assim, em um meio de cultivo bacteriano suplementado com xilose como única fonte de carbono, apenas as bactérias que contivessem os genes xylRAB (responsáveis pelo metabolismo de xilose) poderiam se proliferar e desempenhar a função desejada: a produção de proteínas de interesse.. , Situação: Concluído; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Fernanda Alvarenga Lima Barroso - Integrante / Anderson Miyoshi - Coordenador / Vasco Azevedo - Integrante / Marcelle Oliveira de Almeida - Integrante., Financiador(es): Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - Bolsa / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - Auxílio financeiro.

• 2005 - 2010

  Construção de um sistema food-grade de expressão gênica e endereçamento protéico para Lactococcus lactis, Descrição: As bactérias lácticas (BL) constituem um grupo de microrganismos Gram-positivos e anaeróbios facultativos capazes de converter açúcares em ácido láctico. Lactococcus lactis, a mais bem caracterizada bactéria láctica é um microrganismo amplamente utilizado na indústria alimentícia para a produção e preservação de produtos lácteos fermentados. Isso fez com que essa bactéria tenha sido extensivamente estudada para o uso na produção de proteínas de interesse biotecnológico com alto valor agregado, como por exemplo, enzimas e antígenos. Dentre os mais promissores sistemas de expressão gênica já desenvolvidos, encontra-se o sistema NICE (nisin controlled expression system), já utilizado para a produção de diversas proteínas heterólogas em diferentes BL; contudo, esse sistema é induzido pela presença de nisina, a qual pode inviabilizar a sua utilização extralaboratorial. Assim, foi desenvolvido em nosso laboratório um sistema de expressão gênica e endereçamento protéico para L. lactis denominado XIES, o qual combina o forte promotor PxylT, elementos genéticos (RBS e SP) da proteína Usp45 de L. lactis e o gene repórter nuc de Staphylococcus aureus. Esse sistema demonstrou ser capaz de produzir elevados níveis da proteína, além de corretamente endereçar o produto final para o citoplasma ou meio extracelular. No entanto, o sistema XIES não pode ser classificado como ?food grade?, uma vez que utiliza como marcador de seleção um gene de resistência a antibióticos. Dessa forma, é extremamente interessante que a realização de uma construção na qual os genes responsáveis pelo metabolismo da xilose, fenótipo variável em linhagens de L. lactis, funcionassem como marcadores de seleção. Assim, em um meio de cultivo bacteriano suplementado com xilose como única fonte de carbono, apenas as bactérias que contivessem os genes xylRAB (responsáveis pelo metabolismo de xilose) poderiam se proliferar e desempenhar a função desejada: a produção de proteínas de interesse.. , Situação: Concluído; Natureza: Desenvolvimento.

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  Construção de um sistema food-grade de expressão gênica e endereçamento protéico para Lactococcus lactis, Descrição: As bactérias lácticas (BL) constituem um grupo de microrganismos Gram-positivos e anaeróbios facultativos capazes de converter açúcares em ácido láctico. Lactococcus lactis, a mais bem caracterizada bactéria láctica é um microrganismo amplamente utilizado na indústria alimentícia para a produção e preservação de produtos lácteos fermentados. Isso fez com que essa bactéria tenha sido extensivamente estudada para o uso na produção de proteínas de interesse biotecnológico com alto valor agregado, como por exemplo, enzimas e antígenos. Dentre os mais promissores sistemas de expressão gênica já desenvolvidos, encontra-se o sistema NICE (nisin controlled expression system), já utilizado para a produção de diversas proteínas heterólogas em diferentes BL; contudo, esse sistema é induzido pela presença de nisina, a qual pode inviabilizar a sua utilização extralaboratorial. Assim, foi desenvolvido em nosso laboratório um sistema de expressão gênica e endereçamento protéico para L. lactis denominado XIES, o qual combina o forte promotor PxylT, elementos genéticos (RBS e SP) da proteína Usp45 de L. lactis e o gene repórter nuc de Staphylococcus aureus. Esse sistema demonstrou ser capaz de produzir elevados níveis da proteína, além de corretamente endereçar o produto final para o citoplasma ou meio extracelular. No entanto, o sistema XIES não pode ser classificado como ?food grade?, uma vez que utiliza como marcador de seleção um gene de resistência a antibióticos. Dessa forma, é extremamente interessante que a realização de uma construção na qual os genes responsáveis pelo metabolismo da xilose, fenótipo variável em linhagens de L. lactis, funcionassem como marcadores de seleção. Assim, em um meio de cultivo bacteriano suplementado com xilose como única fonte de carbono, apenas as bactérias que contivessem os genes xylRAB (responsáveis pelo metabolismo de xilose) poderiam se proliferar e desempenhar a função desejada: a produção de proteínas de interesse.. , Situação: Concluído; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Fernanda Alvarenga Lima Barroso - Integrante / Anderson Miyoshi - Coordenador / Vasco Azevedo - Integrante / Marcelle Oliveira de Almeida - Integrante., Financiador(es): Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - Auxílio financeiro / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - Bolsa.

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  Construção de um sistema food-grade de expressão gênica e endereçamento protéico para Lactococcus lactis, Descrição: As bactérias lácticas (BL) constituem um grupo de microrganismos Gram-positivos e anaeróbios facultativos capazes de converter açúcares em ácido láctico. Lactococcus lactis, a mais bem caracterizada bactéria láctica é um microrganismo amplamente utilizado na indústria alimentícia para a produção e preservação de produtos lácteos fermentados. Isso fez com que essa bactéria tenha sido extensivamente estudada para o uso na produção de proteínas de interesse biotecnológico com alto valor agregado, como por exemplo, enzimas e antígenos. Dentre os mais promissores sistemas de expressão gênica já desenvolvidos, encontra-se o sistema NICE (nisin controlled expression system), já utilizado para a produção de diversas proteínas heterólogas em diferentes BL; contudo, esse sistema é induzido pela presença de nisina, a qual pode inviabilizar a sua utilização extralaboratorial. Assim, foi desenvolvido em nosso laboratório um sistema de expressão gênica e endereçamento protéico para L. lactis denominado XIES, o qual combina o forte promotor PxylT, elementos genéticos (RBS e SP) da proteína Usp45 de L. lactis e o gene repórter nuc de Staphylococcus aureus. Esse sistema demonstrou ser capaz de produzir elevados níveis da proteína, além de corretamente endereçar o produto final para o citoplasma ou meio extracelular. No entanto, o sistema XIES não pode ser classificado como ?food grade?, uma vez que utiliza como marcador de seleção um gene de resistência a antibióticos. Dessa forma, é extremamente interessante que a realização de uma construção na qual os genes responsáveis pelo metabolismo da xilose, fenótipo variável em linhagens de L. lactis, funcionassem como marcadores de seleção. Assim, em um meio de cultivo bacteriano suplementado com xilose como única fonte de carbono, apenas as bactérias que contivessem os genes xylRAB (responsáveis pelo metabolismo de xilose) poderiam se proliferar e desempenhar a função desejada: a produção de proteínas de interesse.. , Situação: Concluído; Natureza: Desenvolvimento. , Integrantes: Fernanda Alvarenga Lima Barroso - Integrante / Anderson Miyoshi - Coordenador / Vasco Azevedo - Integrante / Marcelle Oliveira de Almeida - Integrante., Financiador(es): Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - Auxílio financeiro / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - Bolsa.

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