Letícia Schefer

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Produções bibliográficas

• SCHEFER, L. ; Schwarz K. ; Paschoal D. M. ; CASTRO, F. C. ; FERNANDES, H. ; BOTIGELLI, R. C. ; Leal, C. L. V. . Effects of different stimulators of cGMP synthesis on lipid content in bovine oocytes matured in vitro. ANIMAL REPRODUCTION , v. 18, p. 1-13, 2021.

• Katia Lancelloti Schwarz ; CASTRO, F. C. ; SCHEFER, L. ; Ramon Cesar Botigelli ; Paschoal D. M. ; FERNANDES, H. ; Leal, C. L. V. . The role of cGMP as a mediator of lipolysis in bovine oocytes and its effects on embryo development and cryopreservation.. PLoS One , v. 13, p. 1-20, 2018.

• SCHEFER, L. ; NAVES, L. M. ; FERREIRA, C. R. ; SILVA, E. P. ; SOBREIRA, T. J. ; MARCHIORETTO, P. V. ; LEAL, C. L. V. ; RUBESSA, M. ; WHEELER, M. B. . Lipid profiling of bovine blastocysts produced in vitro with and without a stimulator of cyclic guanosine monophosphate synthesis by multiple reaction monitoring profiling. Reproduction, Fertility and Development, Estados Unidos, p. 158 - 159, 02 dez. 2019.

• SCHEFER, L. ; NAVES, L. M. ; FERREIRA, C. R. ; SILVA, E. P. ; SOBREIRA, T. J. ; MARCHIORETTO, P. V. ; Leal, C. L. V. ; RUBESSA, M. ; WHEELER, M. B. . Lipid profiling of bovine oocytes matured with different stimulation of cyclic GMP synthesis by multiple reaction monitoring profiling. Reproduction, Fertility and Development, Estados Unidos, p. 226 - 226, 02 dez. 2019.

• FERNANDES, H. ; CASTRO, F. C. ; SCHEFER, L. ; Paschoal D. M. ; Leal, C. L. V. . Effect of melatonin and its receptors on bovine oocyte maturation and cumulus cell gene expression after heat shock in vitro: preliminary results. Reproduction, Fertility and Development, Estados Unidos, p. 206 - 207, 03 dez. 2018.

• SCHEFER, L. ; Schwarz K. ; FERNANDES, H. ; Paschoal D. M. ; CASTRO, F. C. ; Leal, C. L. V. . Evaluation of the lipid content of in vitro-matured bovine cumulus?oocyte complexes in the presence of natriuretic peptides A, B, and C types. Reproduction, Fertility and Development, Estados Unidos, p. 207 - 207, 03 dez. 2018.

• FERNANDES, H. ; SCHEFER, L. ; CASTRO, F. C. ; Paschoal D. M. ; BOTIGELLI, R. C. ; Leal, C. L. V. . Effect of melatonin on meiosis progression and lipid content in bovine oocytes matured. Reproduction, Fertility and Development, Estados Unidos, p. 225 - 226, 04 dez. 2017.

• CASTRO, F. C. ; SCHEFER, L. ; Schwarz K. ; FERNANDES, H. ; BOTIGELLI, R. C. ; Paschoal D. M. ; LEAL, C. L. V. . Effects of Melatonin on In Vitro Maturation of Bovine Oocytes and Gene Expression in Cumulus Cells: Preliminary Results. Reproduction, Fertility and Development, Estados Unidos, p. 226 - 227, 04 dez. 2017.

• FERNANDES, H. ; SCHEFER, L. ; CASTRO, F. C. ; Leal, C. L. V. . MELATONIN ON IN VIVO AND IN VITRO MATURATION OF MOUSE OOCYTES. Reproduction, Fertility and Development, Estados Unidos, p. 246 - 246, 04 dez. 2014.

• FERNANDES, H. ; SCHEFER, L. ; Paschoal D. M. ; CASTRO, F. C. ; Leal, C. L. V. . Effect of melatonin on MPF protein amount and cAMP levels during bovine oocyte in vitro maturation.. In: 52nd Annual Meeting - Society for the Study of Reproduction, 2019, San Jose - California. 52nd Annual Meeting - Society for the Study of Reproduction Abstracts, 2019. p. 296-296.

• SCHEFER, L. ; Paschoal D. M. ; FERNANDES, H. ; CASTRO, F. C. ; Katia Lancelloti Schwarz ; Leal, C. L. V. . Influence of type-B natriuretic peptide (NPPB) on the lipid content of in vitro matured bovine oocytes.. In: 32ª Reunião da sociedade Brasileira de tecnologia de embriões, 2018, Florianópolis. Anais da 32ª Reunião da sociedade Brasileira de tecnologia de embriões, 2018.

• Paschoal D. M. ; SCHEFER, L. ; FERNANDES, H. ; CASTRO, F. C. ; Katia Lancelloti Schwarz ; Mateus José Sudano ; Alício Martins Junior ; Leal, C. L. V. . Effect of forskolin exposure to induced lipolysis in vitro matured bovine oocytes. In: 32ª Reunião da sociedade Brasileira de tecnologia de embriões, 2018, Florianópolis. Anais da 32ª Reunião da sociedade Brasileira de tecnologia de embriões, 2018.

• FERNANDES, H. ; SCHEFER, L. ; Paschoal D. M. ; CASTRO, F. C. ; Leal, C. L. V. . Effect of melatonin on gene expression of bovine cumulus cells.. In: 32ª Reunião da sociedade Brasileira de tecnologia de embriões, 2018, Florianópolis. Anais da 32ª Reunião da sociedade Brasileira de tecnologia de embriões, 2018.

• Paschoal D. M. ; Katia Lancelloti Schwarz ; Fernanda Cavallari Castro ; FERNANDES, H. ; SCHEFER, L. ; Mateus José Sudano ; Alício Martins Junior ; Fernanda Cruz Landim Alvarenga ; Leal, C. L. V. . Efeito de diferentes tempos de exposição ao forskolin na indução de lipólise em oócitos bovinos maturados in vitro. In: 31º Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Tecnologia de Embriões, 2017, Cabo de Santo Agostinho - PE. Anais da XXXI Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Tecnologia de Embriões, 2017. p. 106-107.

• FERNANDES, H. ; SCHEFER, L. ; Fernanda Cavallari Castro ; Paschoal D. M. ; Katia Lancelloti Schwarz ; Ramon Cesar Botigelli ; Leal, C. L. V. . Efeito de Diferentes Concentrações de Melatonina na retomada da meiose e no conteúdo lipídico de oócitos bovinos maturados in vitro: resultados preliminares.. In: 31º Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Tecnologia de Embriões, 2017, Cabo de Santo Agostinho - PE. Anais da XXXI Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Tecnologia de Embriões, 2017. p. 147-148.

• CASTRO, F. C. ; Schwarz K. ; SCHEFER, L. ; FERNANDES, H. ; Paschoal D. M. ; Ramon Cesar Botigelli ; LEAL, C. L. V. . Effects of Different Melatonin Concentrations on In vitro Maturation of Bovine Oocytes: Preliminary Results.. In: XXXI Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Tecnologia de Embriões, 2017, Cabo de Santo Agostinho - PE. Anais da XXXI Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Tecnologia de Embriões, 2017.

• SCHEFER, L. ; CASTRO, F. C. ; FERNANDES, H. ; Paschoal D. M. ; LEAL, C. L. V. . Influência do segundo mensageiro GMPc e suas vias de sinalização no conteúdo lipídico de complexos cumulus-oocitos bovinos maturados in vitro.. In: IV Simpósio de Biociência Animal, 2017, Pirassununga. Anais do IV Simpósio de Biociência Animal, 2017.

• Schwarz K. ; SCHEFER, L. ; Paschoal D. M. ; CASTRO, F. C. ; FERNANDES, H. ; Leal, C. L. V. . Semi-quantitative assessment of lipid contents in vitro matured bovine oocytes stained with Nile Red, BODIPY or Sudan Black B. In: 18th International Congress on Animal Reproduction - ICAR, 2016, Tours. Reproductive physiology, pathology and biotechnologies in domestic and wild animal species., 2016. p. 278.

• SCHEFER, L. ; Schwarz K. ; Leal, C. L. V. . Procedimentos para produção in Vitro de Embriões Bovinos. In: IV Semana de Biologia da Universidade Federal de São Carlos, 2016, Araras - SP. Anais da IV Semana de Biologia da Universidade Federal de São Carlos, 2016.

• SCHEFER, L. ; Schwarz K. ; Paschoal D. M. ; FERNANDES, H. ; CASTRO, F. C. ; Leal, C. L. V. . Influência da via GMPc no conteúdo lipídico de oócitos bovinos maturados in vitro. In: XXX Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Tecnologia de Embriões, 2016, Foz do Iguaçu. Biotecnologias de suporte: criopreservacão, criobiologia, biologia molecular e ?ômicas?, 2016. p. 334-335.

• SCHEFER, L. ; NAVES, L. M. ; FERREIRA, C. R. ; Leal, C. L. V. ; RUBESSA, M. ; WHEELER, M. B. . PERFIL LIPÍDICO DE OÓCITOS E EMBRIÕES BOVINOS PRODUZIDOS IN VITRO SOB EFEITO DA MANIPULAÇÃO DA VIA GMPc.. 2019. (Apresentação de Trabalho/Simpósio).

• SCHEFER, L. ; Paschoal D. M. ; FERNANDES, H. ; CASTRO, F. C. ; Leal, C. L. V. . Influência do segundo mensageiro GMPc e suas vias de sinalização no conteúdo lipídico de complexos cumulus-oócitos bovinos maturados in vitro.. 2018. (Apresentação de Trabalho/Simpósio).

• SCHEFER, L. ; CASTRO, F. C. ; FERNANDES, H. ; Paschoal D. M. ; LEAL, C. L. V. . Influência do segundo mensageiro GMPc e suas vias de sinalização no conteúdo lipídico de complexos cumulus-oocitos bovinos maturados in vitro.. 2017. (Apresentação de Trabalho/Simpósio).

Projetos de pesquisa

• 2019 - 2019

  Influence of cGMP on the lipid profile of bovine oocytes, cumulus cells and embryos produced in vitro., Descrição: Previous studies have shown that bovine cumulus-oocyte complexes (COCs), express transcripts for several enzymes of the cGMP pathway including those for its synthesis (GUCY1B3), degradation (PDE5A) and signaling (PKG1 and PKG2), and that FCS in IVM medium affects the expression of some of these transcripts, as well as decreases cGMP levels. Inhibition of cGMP hydrolysis with PE% inhibitor sildenafil during IVM, decreased lipid contents in oocytes, while FCS increased; association of sildenafil in presence of FCS decreased lipids and such effect was reversed by PKG inhibition. Taken together, these results suggested that the cGMP-PKG pathway in involved, at least in part, in the control of lipid metabolism in bovine COCs. Synthesis of cGMP may be stimulated through activation of GUCY (soluble guanylyl cyclase) or natriuretic peptides receptors (NPR1 and NPR2, membrane guanylyl cyclase), which are also expressed in bovine COCs. Natriuretic peptides NPPA and NPPB activate NPR1, while NPPC activates NPR2. The use of Protoporphyrin IX (activator of GUCY) and of NPPB reduced lipid contents in oocytes, while NPPA and NPPC had no effect. None of the stimulators of cGMP synthesis affected oocyte maturation. In order to further investigate the role of the cGMP pathway on lipid metabolism in bovine COCs, we propose to analyze the effects of stimulation of cGMP synthesizing enzymes during IVM on the lipid profiles of bovine oocytes, cumulus cells and resulting embryos produced in vitro. In experiment 1, bovine COCs will be submitted to IVM with Protoporphyrin IX, NPPB or no stimulators (control) and assessed for lipid profiles in oocytes and cumulus cells by mass spectrometry (MS). In experiment 2, the same groups will be evaluated regarding effects on embryo development (cleavage and blastocyst rates), lipid contents and crytolerance to vitrification. In experiment 3, the same groups will be assessed for lipid profile of resulting embryos by MS.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Letícia Schefer - Coordenador / Claudia Lima Verde Leal - Integrante / Matthew B. Wheeler - Integrante.

• 2017 - 2020

  Influência do Segundo Mensageiro GMPc e suas vias de sinalização no conteúdo lipídico de complexos cumulus-oócitos bovinos maturados in vitro., Descrição: Embora a obtenção de embriões produzidos in vitro (PIV) seja uma biotecnologia animal amplamente utilizada em pesquisa e para fins comerciais no Brasil e no mundo, tais embriões ainda são de qualidade inferior em comparação aos produzidos in vivo. O maior acúmulo de lipídios em embriões produzidos in vitro tem sido sugerido como uma das causas dessa menor qualidade. Classicamente, a lipólise celular é mediada através do AMPc/PKA, porém, em adipócitos de humanos foi observado que a via GMPc/PKG também pode estar envolvida nesse processo. Para melhor compreender a interferência dessa via na lipólise em oócitos bovinos investigamos a interferência do GMPc através da via de sinalização dependente de PKG (Iniciação Científica, Processo Fapesp 2015/19888-7). Os resultados sugerem que embora o GMPc e a PKG possam de fato estar envolvidos na lipólise oocitária, essa ação parece ser dar de forma distinta dependendo do tipo de estímulo usado para elevar os níveis de GMPc (SCHEFER et al, 2017, em fase final de preparação para submissão). O GMPc pode ser produzido por diferentes estímulos que incluem ativação da guanilato ciclase de membrana (GCm ou NPR1 e 2) ou solúvel (GCs). Assim sendo, o objetivo desse estudo é investigar a interferência do segundo mensageiro GMPc, cuja síntese será estimulada por diferentes vias (GCs ou GSm), sobre o conteúdo lipídico de CCOs bovinos em continuidade e complementação à pesquisa anterior. Além disso, propomos investigar se tais efeitos do GMPc de diferentes estímulos se dão através da PKG, sobre diferentes parâmetros relativos à lipólise. No experimento 1, CCOs serão submetidos à maturação in vitro (MIV) com diferentes concentrações de NPPB (estimulador de NPR1) e posteriormente os oócitos serão avaliados em relação ao conteúdo lipídico e as células do cumulus em relação à expressão de transcritos de NPR1. No experimento 2, CCOs serão maturados in vitro com NPPB (concentração selecionada no experimento anterior) e Protoporfirina IX (estimulador de GCs, utilizado no trabalho anterior) para comparar o efeito dos diferentes estímulos à síntese de GMPc sobre o conteúdo lipídico de oócitos e células do cumulus. No terceiro experimento será avaliada a participação da PKG nas vias estimuladas por GMPc gerado a partir de diferentes estímulos (NPPB e Protoporfirina IX) associados ou não à inibição da PKG com KT5823 3 durante a MIV dos CCOs. Este experimento será dividido em três etapas para avaliar diferentes parâmetros relacionados à lipólise. Na primeira, será analisado o conteúdo lipídico das células (oócitos e células do cumulus), já na segunda será realizada quantificação da proteína HSL fosforilada (ativa, proteína efetora alvo da PKG) e, por fim, na terceira fase será avaliada a expressão gênica da PLIN1 e PLIN2 em células do cumulus e oócitos. Além disso, o meio de maturação utilizado no 3º experimento será coletado para quantificação de glicerol resultante da lipólise dos CCOs. Desta forma, buscamos obter novos conhecimentos relativos ao processo de lipólise em CCOs bovinos, que poderão embasar estudos futuros para melhorar as condições de cultivo para gerar embriões PIV com menor acúmulo lipídico.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Letícia Schefer - Coordenador / Claudia Lima Verde Leal - Integrante.

• 2015 - 2016

  Avaliação semi-quantitativa do conteúdo lipídico de oócitos bovino maturados in vitro sob efeito da via GMPc, Descrição: Oócitos e blastocistos de bovinos produzidos in vitro apresentam citoplasma mais escuro, como consequência de acúmulo de lipídios mais elevado em relação aos embriões produzidos in vivo. Tal característica tem sido associada com a qualidade inferior do embrião produzido in vitro e por consequência, sua elevada sensibilidade à criopreservação. Maior conhecimento sobre o controle do metabolismo lipídico em oócitos poderá ocasionar modificações na própria célula oocitária, para torná-la capaz de originar embriões mais criopreserváveis, contribuindo para a disseminação da técnica de produção in vitro (PIV). Em adipócitos de humanos, além da via clássica mediada pelo AMPc sobre a lipólise celular, foi observado que a via GMPc, através da proteína cinase dependente de GMPc (PKG), ativa enzimas importantes no processo. Portanto, níveis intracelulares de ambos os nucleotídeos estão envolvidos na regulação da taxa de lipólise. Como uma série de enzimas de síntese e degradação do GMPc, já foram detectadas no complexo cumulus oócitos (CCOs) de bovino, é possível que a manipulação dessa via sinalizadora durante a maturação possa exercer influência sobre o metabolismo lipídico de oócitos, da mesma maneira que exercem em adipócitos. O objetivo desse trabalho é intervir na via GMPc por diferentes estímulos, buscando o aumento desse nucleotídeo durante a maturação oocitária e sua interferência no metabolismo lipídico. Vias diferentes de síntese e degradação do GMPc serão estimuladas por drogas adicionadas aos meios de cultivo, tais como a Protopophirin IX e peptídeo natriurético atrial (NPPA), que estimulam as enzimas de síntese de GMPc, guanilato ciclase (GC) e OQD, inibidor da GC. Já a interferência na degradação será dada com sildenafil, inibidor seletivo da PDE5 e da PDE6 (enzimas de degradação específicas do GMPc), associado ao KT5823, inibidor seletivo da PKG que também inibe a fosforilação da PDE5 e sua atividade. Para a avaliação lipídica, será realizado um estudo comparativo entre os corantes mais utilizados para detecção de lipídios intracelulares, Nile red, BODIPY e Sudan Black B. A técnica mais eficiente no sistema, será selecionada para mensuração do teor lipídico dos oócitos, oriundos dos CCOs submetidos aos tratamentos. Já as células do cumulus desses CCOs, serão destinados a analises de expressão gênica para PLIN2, proteína que faz parte do proteoma das gotas lipídicas, avaliadas mediante a técnica de qPCR-TR.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Letícia Schefer - Integrante / Cládia Lima Verde Leal - Integrante / Kátia Schwarz - Coordenador., Financiador(es): Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - Bolsa.