Cayuan Tadeu Brandão Pinto

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Produções bibliográficas

• PINTO, CAYUAN TADEU BRANDÃO . MONITORAMENTO DE PROTOZOÁRIOS PERTECENTES A FAMÍLIA SARCOCYSTIDAE COM POTENCIAL ZOONÓTICO EM AMOSTRAS COMERCIAIS DE CORAÇÃO BOVINO DESTINADAS AO CONSUMO HUMANO. In: III Congresso Brasileiro de Parasitologia Humana Online, 2023, Fortaleza. Anais do III Congresso Brasileiro de Parasitologia Humana On-line, 2023. v. 4.

• PINTO, C. T. B. ; EKMAN, L. R. M. J. . Segurança Alimentar: métodos para monitoramento de protozoários zoonóticos em amostras de carne bovina. 2024. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• PINTO, C. T. B. ; EKMAN, L. R. M. J. . Monitoramento de protozoários pertencentes à família Sarcocystidae com potencial zoonótico em amostras comerciais de coração bovino destinadas ao consumo humano. 2019. (Apresentação de Trabalho/Outra).

Projetos de pesquisa

• 2022 - Atual

  Pesquisa de Sarcocystis spp. e Toxoplasma gondii em cortes comerciais de carne bovina e produtos cárneos destinados ao consumo humano, Descrição: As doenças de transmissão alimentar (DTAs) vêm se tornando cada vez mais difundidas mundialmente devido à globalização do comércio de produtos de origem animal, em especial, da carne bovina e seus subprodutos. Isto reforça a importância do monitoramento sanitário da carne, já que este alimento é uma importante fonte de transmissão de zoonoses, como a toxoplasmose e a sarcocistose, que além de serem responsáveis por problemas recorrentes de Saúde Pública, também, ocasionam grandes prejuízos à pecuária e à indústria de alimentos. O controle destas doenças é complexo, uma vez que o ciclo biológico de seus agentes envolve o homem e vários outros hospedeiros animais, com interferência direta do ambiente na manutenção de formas parasitárias infectantes presentes na natureza. Geralmente atribuídas como negligenciadas, estas zoonoses podem causar quadros graves e potencialmente fatais em indivíduos imunossuprimidos e fetos acometidos pela toxoplasmose congênita. O Brasil não possui um programa nacional de monitoramento laboratorial da carne bovina para identificação destas parasitoses. Em um estudo prévio realizado por nosso grupo, avaliamos técnicas parasitológicas, histológicas e moleculares (PCR) para pesquisa de Sarcocystis spp. e Toxoplasma gondii em amostras de tecido cardíaco bovino demonstrando uma alta frequência de amostras positivas para Sarcocystis spp., sobretudo, S. cruzi. Neste projeto, propomos estender a pesquisa de Sarcocystis spp. e T. gondii em diferentes cortes comerciais de carne bovina e produtos cárneos obtidos no mercado varejista e charcutarias artesanais da cidade de São Paulo, utilizando métodos já padronizados pelo nosso grupo, além da caracterização genotípica por PCR - RFLP e sequenciamento genômico. Os dados advindos deste estudo podem trazer inúmeras contribuições fornecendo, não somente, uma abordagem diagnóstica para o monitoramento da qualidade da carne e segurança alimentar, mas também um panorama epidemiológico com identificação de cepas de T. gondii e espécies de Sarcocystis de potencial zoonótico circulantes em nosso meio. Além disso, pode trazer informações genéticas relevantes sobre a virulência dos agentes, permitindo uma melhor compreensão da evolução clínica e prognóstico destas doenças. Da mesma forma, o estudo é importante para a Saúde Única, já que pode auxiliar nas medidas de prevenção e mitigação de zoonoses transmitidas por alimentos, contribuindo com a segurança alimentar e prevenção da doença humana.. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Doutorado: (1) . , Integrantes: Cayuan Tadeu Brandão Pinto - Integrante / Luciana Regina Meireles Jaguaribe Ekman - Coordenador.

• 2019 - 2022

  Monitoramento de protozoários pertencentes à família Sarcocystidae com potencial zoonótico em amostras comerciais de coração bovino destinadas ao consumo humano, Descrição: As zoonoses parasitárias transmitidas por alimentos vêm se tornando cada vez mais difundidas mundialmente devido à globalização do comércio de produtos de origem animal, em especial, da carne bovina e seus subprodutos. Isto reforça a importância do monitoramento sanitário da carne, já que este alimento é uma importante fonte de transmissão de protozooses, como a toxoplasmose e a sarcocistose, que além de serem responsáveis por problemas recorrentes de Saúde Pública, também, ocasionam grandes prejuízos à pecuária bovina e à indústria de alimentos. O Brasil carece de um programa nacional de monitoramento laboratorial da carne bovina para identificação destas parasitoses. Neste projeto, visamos a identificação de Toxoplasma gondii e Sarcocystis spp. pelo uso de diferentes abordagens laboratoriais, tais como métodos parasitológicos, histológicos, sorológicos e moleculares em 40 amostras de coração bovino obtidos do comércio varejista da cidade de São Paulo. A pesquisa parasitológica para detecção de cistos foi realizada por microscopia óptica convencional e microscopia invertida de contraste após trituração do tecido cardíaco por processamento mecânico. Amostras de tecido cardíaco (n=10) com alta quantidade de cistos detectáveis no exame parasitológico foram inoculadas em camundongos para isolamento dos parasitas. A pesquisa histológica de cistos foi realizada em fragmentos de tecido cardíaco bovino corados por hematoxilina - eosina e a detecção de ácidos nucleicos foi realizada por PCR, utilizando-se iniciadores específicos para o gene COX1 de Sarcocystis spp. e gene B1 de T. gondii. A pesquisa sorológica para detecção de anticorpos IgG foi feita por ELISA, utilizando o exsudato cárneo como material biológico. Nossos dados demonstraram a presença de S. cruzi em 100% das amostras analisadas, porém T. gondii não foi detectado em nenhuma amostra de carne avaliada pelas diferentes abordagens diagnósticas. Foi possível realizar o isolamento de S. cruzi em 20% (2/10) das amostras submetidas ao bioensaio. A sorologia foi a abordagem diagnóstica de menor sensibilidade, apresentando resultados falso-negativos. Os métodos parasitológicos e histológicos foram eficientes na detecção de cistos teciduais, porém apresentaram limitações para diferenciação dos protozoários. Os métodos moleculares apresentaram maior sensibilidade e especificidade, permitindo a identificação das espécies de Sarcocystis spp. e o diagnóstico diferencial com T. gondii. Estes achados fornecem contribuições promissoras para o monitoramento e controle sanitário da carne bovina, fornecendo ferramentas importantes de diagnóstico que poderão auxiliar não só nas tomadas de decisões políticas e alocação de recursos voltados para Segurança Alimentar, mas também na prevenção e controle dessas doenças no homem.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) . , Integrantes: Cayuan Tadeu Brandão Pinto - Integrante / Luciana Regina Meireles Jaguaribe Ekman - Coordenador.

• 2016 - 2017

  Modelos de cultivo in vitro de Toxoplasma gondii, Descrição: Sistemas de cultivo in vitro de T.gondii são extremamente importantes porque fornecem taquizoítos ativos, viáveis e com alto grau de pureza. Várias linhagens celulares e métodos de cultivo têm sido propostos, porém não há um consenso na literatura especializada sobre o modelo mais adequado para produção in vitro de T.gondii. Neste estudo, foram avaliadas duas linhagens celulares (LLCMK2 e VERO), provenientes de tecido e pitelial renal de mamíferos e dois meios de cultura com diferentes composições e concentrações de nutrientes (DMEM e RPMI-1640) a fim de obter uma fonte consistente de parasitas com máximo rendimento e viabilidade. Para inóculo inicial dos cultivos foi padronizada como ideal a relação célula -parasita (1:4), independentemente da linhagem celular e meio de cultivo utilizados. Todas as culturas foram suplementadas com 10% de soro fetal bovino e mantidas em estufa a 37ºC com atmosfera de 5% de CO2. O rendimento e a viabilidade dos taquizoítos foram avaliados por microscopia convencional, em câmara de Neubauer, após coloração com azul de tripano e por citometria de fluxo utilizando o sistema Muse. Cultura com células VERO resultaram em maior rendimento de parasitas, cerca de três vezes mais, quando comparadas às culturas com células LLCMK2. Cultivos em meio DMEM e RPMI –1640 apresentaram parâmetros semelhantes de rendimento e viabilidade de taquizoítos, independentemente da linhagem celular utilizada, mostrando que não houve interferência da composição dos meios no crescimento in vitro de T.gondii. Nossos modelos de cultivo in vitro resultaram em porcentagem de viabilidade de taquizoítos superior a 90%,tanto por microscopia convencional como por citometria de fluxo. Os parâmetros de rendimento e viabilidade de taquizoítos de T.gondii foram viáveis nas três primeiras passagens,com rendimento em torno de 4x107 parasitas. Este estudo otimizou com sucesso modelo de cultivo in vitro de taquizoítos de T. gondii que produziram parasitas com alto rendimento, pureza e viabilidade, fornecendo subsídios para o aprimoramento da rotina de laboratórios de cultivo celular. Palavras-chave: Toxoplasma gondii, células VERO, células LLCMK2, Cultivo celular, meio DMEM, meio RPMI -1640. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Cayuan Tadeu Brandão Pinto - Integrante / Luciana Regina Meireles Jaguaribe Ekman - Coordenador., Financiador(es): Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - Bolsa.

• 2014 - 2014

  Padronização de um ensaio imunoenzimático utilizando peptídeos sintéticos derivados de grânulos densos GRA6 e GRA7 de Toxoplasma gondii, Descrição: Resumo: A toxoplasmose é uma zoonose cosmopolita de grande importância na área médica e veterinária, acometendo mais de um bilhão de indivíduos no mundo e 70% da população brasileira adulta. Embora possua uma alta prevalência sorológica, muitas vezes a ausência dos sinais clínicos da doença acaba dificultando a identificação do parasita. No Brasil, estudos de genotipagem por PCR multilocus têm demonstrado alta diversidade genética de isolados humanos e animais, o que explicaria o maior potencial de virulência das cepas circulantes em nosso meio. Contudo, os métodos moleculares utilizados na maioria destes estudos necessitam de isolamento prévio do agente em camundongos, podendo induzir seleção de cepas virulentas. Uma alternativa seria a abordagem sorológica, utilizando peptídeos polimórficos sintéticos específicos para cada genótipo. Isto permitiria a identificação da cepa infectante a partir da resposta imune do hospedeiro. Neste projeto, avaliamos a viabilidade da tipagem das cepas de T. gondii por ELISA com peptídeos sintéticos em amostras de soros de felinos domésticos. O ensaio apresentou bons resultados, sugerindo que a infecção destes animais ocorreu por cepas do tipo III, embora algumas amostras também tenham apresentado reatividade para peptídeos do tipo II. Nossos dados mostram que a sorotipagem é uma ferramenta útil para estudos epidemiológicos, porém o método de ELISA precisa de refinamentos, principalmente em relação à seleção dos peptídeos específicos para as cepas brasileiras. Palavras chave: Toxoplasma gondii, Sorotipagem, Peptídeos, Toxoplasmose.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Cayuan Tadeu Brandão Pinto - Integrante / Luciana Regina Meireles Jaguaribe Ekman - Coordenador., Financiador(es): Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológo - Bolsa.