Sérgio Daishi Sasaki

Pós-doutorado

Formação complementar

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Áreas de atuação

Organização de eventos

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Participação em bancas

Orientou

Produções bibliográficas

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• SASAKI, S. D. ; MENDES, C. R. ; Oliva, M.L.V. ; SAMPAIO, C. A. M. . PURIFICAÇÃO DE UM NOVO TIPO DE INIBIDOR DE TRIPSINA PRESENTE NAS SEMENTES DE Bauhinia bauhinoides. In: VI Congresso de Iniciação Científica da Universidade Federal de São Paulo, 1998, São Paulo. Anais do V congresso de iniciação científica, 1998. p. 229.

• MENDES, C. R. ; SASAKI, S. D. ; TORQUATO, R. J. S. ; SAMPAIO, M. U. ; SAMPAIO, C. A. M. ; Oliva, M.L.V. . Purification and Characterization of a New Kunitz type Inhibitor Isolated from Bauhinia bauhinoides seeds. In: XXVII Reunião anual da SBBq, 1998, Caxambu. Livro de Resumos, 1998. p. 150.

• SASAKI, S. D. ; TORQUATO, R. J. S. ; Souza, M. T. ; Oliva, M.L.V. ; SAMPAIO, C. A. M. . ESTUDOS DA RELAÇÃO ENTRE A ESTRUTURA E FUNÇÃO DE INIBIDORES DE SERINO PROTEINASES DE SEMENTES DE LEGUMINOSAS BRASILEIRAS. In: V congresso de Iniciação Científica da Universidade Federal de São Paulo, 1997, São Paulo. Anais do V congresso de iniciação científica, 1997. p. 207.

• BATISTA, I. F. C. ; SASAKI, S. D. ; SAMPAIO, C. A. M. . Plant Kunitz Inhibitors - structure and inhibitory activity studies. In: XXVI Reunião Anual da SBBq, 1997, Caxambu. Livro de Resumos, 1997.

• Bomediano-Camillo L.M. ; FERREIRA, G. C. ; DURAN, A. ; da Silva, F. R.S. ; GARCIA, W. ; SCOTT, A. L. ; SASAKI, S. D. . Structural modelling and thermostability of a serine protease inhibitor belonging to the Kunitz-BPTI family from the Rhipicephalus microplus tick. BIOCHIMIE , 2020.

• SASAKI SD . Inibidores de proteases no enfisema pulmonar. 2022. (Apresentação de Trabalho/Conferência ou palestra).

• SASAKI SD . Conhecendo a Pós-graduação em Biossistemas. 2019. (Apresentação de Trabalho/Conferência ou palestra).

• SASAKI SD . Inibidores de serinoproteases no enfisema pulmonar. 2018. (Apresentação de Trabalho/Seminário).

• SASAKI SD . Inibidores de serinoproteases, do carrapato ao enfisema pulmonar. 2016. (Apresentação de Trabalho/Seminário).

• SASAKI, S. D. . Inibidores de serinoproteases no enfisema pulmonar.. 2012. (Apresentação de Trabalho/Conferência ou palestra).

• BOMEDIANO, LIVIA DE MORAES ; FERREIRA, GRAZIELE CRISTINA ; DURAN, ADRIANA F. ; DA SILVA, FLAVIA RIBEIRO SANTOS ; GARCIA, W. ; SCOTT, A. L. ; SASAKI, S. D. . Structural modeling and thermostability of a serine protease inhibitor belonging to the Kunitz family from the tick Rhipicephalus microplus. Cold Spring Harbor: Cold Spring Harbor Laboratory, 2020 (Artigo postado na forma de Pré-print).

• SASAKI, S. D. . Proteínas recombinantes. 2022. (Curso de curta duração ministrado/Extensão).

• SASAKI, S. D. . Proteínas recombinantes. 2012. (Curso de curta duração ministrado/Outra).

Projetos de pesquisa

• 2021 - Atual

  Estudo da interação entre os inibidores de serinoproteases rBmTI-A e rBmTI-6 com TMPRSS2, uma serinoprotease transmembranar envolvida na entrada de SARSCoV- 2 em células humanas, Descrição: A doença causada por SARS-CoV-2, novo coronavírus descoberto na China, em dezembro de 2019, coloca em primeiro plano o desafio do desenvolvimento de um tratamento e de uma nova vacina que seja capaz de conter o avanço dos casos. Estudos anteriores com o coronavírus SARS-CoV elucidaram a forma com que este é capaz de entrar nas células, interagindo com o receptor ACE2 humano após clivagem de sua proteína S por uma serinoprotease humana chamada TMPRSS2.Devido à porcentagem de identidade de resíduos compartilhada entre SARS-CoV e SARS-CoV-2, acredita-se que os dois coronavírus compartilham também o mesmo mecanismo de entrada na célula hospedeira. Estudos com o medicamento inibidor de serinoproteases camostat mesylate mostraram que este foi capaz de bloquear a ação da TMPRSS2 e prevenir a entrada de SARS-CoV-2 nas células humanas.Diante disso, este projeto objetiva investigar o potencial inibitório de dos inibidores de serinoproteases, rBmTI-A e rBmTI-6 sobre a protease TMPRSS2, são dois inibidores protéicos, da família Kunitz-BPTI. Os inibidores já foram2estudados pelo nosso grupo de pesquisa e testados inclusive sobre modelo de enfisema pulmonar, com resultados promissores.Os inibidores serão produzidos na forma recombinante, expressos em sistema de expressão em levedura Pichia pastoris e purificados. Posteriormente serão realizados ensaios sobre a protease TMPRSS2 para identificação de atividade inibitória e determinação da constante de dissociação (Ki) que nos fornecerá informação sobre o potencial inibitório de rBmTI-A e rBmTI-6 sobre TMPRSS2.Além disso, realizaremos estudos de interação molecular de rBmTI-A e rBmTI-6 e TMPRSS2 por meio de modelagem das estruturas dos inibidores e da serinoprotease e por ensaios de docking das estruturas, com aplicação também de ensaios de dinâmica molecular, com o objetivo de avaliar as interações importantes para a inibição da TMPRSS2 pelos inibidores recombinantes.Este estudo visa buscar uma estratégia terapêutica para a COVID-19.O projeto foi financiado pela pró reitoria de pesquisa da UFABC entre 2021 e 2022.. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Sergio Daishi Sasaki - Coordenador., Financiador(es): Universidade Federal do ABC - Auxílio financeiro.

• 2018 - Atual

  Desenvolvimento de novos fármacos e novas abordagens farmacoterapêuticas para o tratamento de patologias humanas e animais, Descrição: Limitações apresentadas por fármacos tradicionais, com relação às propriedades físico-químicas e farmacológicas, têm direcionado a busca por novos análogos estruturais destas moléculas e por novos alvos moleculares, capazes de estabelecer mecanismos de ação alternativos, aumentando a eficácia terapêutica destes compostos. Abordagens deste tipo envolvem conceitos de Bioinformática e Tecnologia Farmacêutica, que vêm revolucionando diversas áreas da Medicina, com destaque para estudos envolvendo modelagem e dinâmica molecular, capazes de simular estruturas moleculares e analisar as interações entre fármacos e seus alvos moleculares, com vistas ao planejamento de novas moléculas candidatas a fármacos. Outra estratégia crescentemente utilizada para contornar limitações biofarmacêuticas de novas moléculas, bem como daquelas tradicionalmente utilizadas na prática clínica, envolve o uso e desenvolvimento de novos sistemas carreadores de fármacos. Integrando estas duas vertentes, as propostas de pesquisa que integram este projeto buscam devolver e aprimorar novasmoléculas e abordagens farmacoterapêuticas, bem como avaliar sua aplicação no tratamento de diversas patologias, tanto de origem humana, como veterinária. Objetivos específicos do projeto envolverão: (i) a execução de estudos de modelagem/dinâmica molecular, docking proteína-proteína e virtual screening para o desenvolvimento de novos inibidores e identificação de seus alvos terapêuticos; (ii) síntese biogênica e desenvolvimento de nanopartículas de prata (doadoras de óxido nítrico) e de cobre para aplicações biomédicas, ambientais e agrícolas; (iii) desenvolvimento e avaliação farmacológica de hidrogéis termossensíveis como sistemas carreadores de fármacos. Projeto CAPES PRINT - FINANCIAMENTO - 88887.310347/2018-00. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Doutorado: (4) . , Integrantes: Sergio Daishi Sasaki - Coordenador., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Outra.

• 2018 - Atual

  Inibidores de serinoproteases em células pulmonares e em enfisema pulmonar., Descrição: A DPOC (doença pulmonar obstrutiva crônica) é uma das maiores causas de morbidade e mortalidade no mundo, ainda não há tratamento que reverta os danos fisiopatológicos observados em pacientes acometidos por esta doença. Uma das causas atribuídas para o aparecimento da doença é o tabagismo, no entanto, causas genéticas e a contaminação ambiental também estão envolvidas com o aparecimento da doença em humanos. O enfisema pulmonar (caracterizado pela destruição do tecido alveolar) apresenta-se como uma das manifestações da DPOC. Algumas enzimas estão envolvidas com o processo de instalação do enfisema como as metaloproteases 9 e 12 e as serinoproteases, especificamente a elastase de neutrófilos humana. Em projeto anterior financiado pela FAPESP (2011/07001-1), os inibidores de serinoproteases rBmTI-A e rBmTI-6 foram testados em modelo de enfisema pulmonar em camundongos, mostrando efeito protetor contra a doença e atividade anti-inflamatória. Os inibidores rBmTI-A e rBmTI-6 são originários do carrapato Rhipicephalus Boophilus microplus, pertencentes à família Kunitiz- BPTI, no presente projeto objetivamos clonar, produzir e investigar o efeito dos domínios inibitórios do rBmTI-A (domínios 1 e 2), separadamente, no modelo de enfisema pulmonar em camundongos. Avaliaremos o potencial de cada um dos domínios na resposta contra a doença. Investigaremos também o efeito (anti-inflamatório) de rBmTI-A e rBmTI-6 sobre células epiteliais pulmonares humanas A549 que serão induzidas à resposta inflamatória utilizando a elastase pancreática porcina. Projeto com financiamento do PROCESSO FAPESP 2018/11874-5.. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (2) / Doutorado: (1) . , Integrantes: Sergio Daishi Sasaki - Coordenador / Milton de Arruda Martins - Integrante / Graziele Cristina Ferreira - Integrante / Fernanda Deggobi Tenório Quirino dos Santos Lopes - Integrante / ERIKA SUZUKI - Integrante / Lívia de Moraes Bomediano-Camillo - Integrante / Gilmara Barros de Lima - Integrante., Financiador(es): Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 3

• 2015 - 2016

  Variabilidade Genética da Mieloperoxidase humana e aspergilose, Descrição: Neutrófilos são células fagocíticas profissionais que desempenham um papel crucial na imunidade contra Aspergillus fumigatus. Dentre os possíveis mecanismos antifúngicos, neutrófilos são essenciais no controle dos primeiros estágios da infecção fúngica. Estes mecanismos vão desde a produção de espécies reativas de oxigênio (ERO) até a secreção de enzimas antimicrobianas para a formação dos complexos moleculares conhecidos como neutrophil extracellular traps (NETs) que auxiliam na eliminação do fungo. Sua importância na imunidade antifúngica é também fortalecida pelo fato de que pacientes com deficiência primária (e.g. doença granulomatosa) ou adquirida (e.g. devido à terapia imunosupressiva) de neutrófilos possuem extrema susceptibilidade a infecção por Aspergillus. Mais recentemente, têm sido descritas variantes genéticas que afetam a capacidade antifúngica de neutrófilos e discute-se que estas variações sejam um fator primordial para o desenvolvimento da aspergilose em pacientes em condições de imunodeficiência generalizada. A enzima mieloperoxidase (MPO) medeia um dos mais importantes mecanismos efetores utilizados pelos neutrófilos. Esta enzima depende da presença de um ambiente oxidativo para realizar a sua função e, quando liberada em um contexto de burst oxidativo, a mesma produz um potente antimicrobiano, o ácido hipocloroso, a partir do peróxido de hidrogênio e do anion cloreto. Além disso, recentemente tem sido mostrado que MPO medeia a formação de NETs. Desta forma camundongos deficientes em MPO são suscetíveis a aspergilose invasiva. De um recente estudo de associação de genomas com alvo em variações totais do genoma e susceptibilidade à aspergilose invasiva em pacientes que receberam transplante de células tronco alogênicas, encontramos que variantes genéticas nos genes de MPO estão associados com o risco à infecção por Aspergillus. (AspIRS, não publicado). Entretanto, não há muito conhecimento sobre a relevância funcional destes variantes e assim, este projeto tem o objetivo de caracterizar o papel das variantes genéticas de MPO e a susceptibilidade à aspergilose in vitro. Bolsa de pesquisa CNPq - Processo: 206780/2014-1.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Sergio Daishi Sasaki - Integrante / CUNHA, CRISTINA - Integrante / CARVALHO, AGOSTINHO - Coordenador., Financiador(es): Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - Bolsa.

• 2015 - Atual

  PTX3 regulates granulomatous inflammation in sarcoidosis by controlling macrophage-mediated T cell dynamics, Descrição: Sarcoidosis is a systemic inflammatory disease of unknown etiology with lung involvement in almost all cases. Immunopathologic hallmarks include noncaseating granulomas in involved organs, characterized by activated T cells and macrophages, highly polarized Th1 and Th17 cytokine expression consistent with persistent antigen stimulation, and local production of immunoregulatory cytokines. Sarcoidosis represents therefore an unmet condition for which a better understanding of the cellular and molecular basis associated to granulomatous inflammation is essential to design immune-based therapies. The long pentraxin 3 (PTX3) is a soluble pattern-recognition receptor and an essential component of the humoral arm of innate immunity. PTX3 is produced by phagocytes and other non-immune cells at sites of inflammation and is known to play a nonredundant role in resistance against selected microbial pathogens. Furthermore, a regulatory role for PTX3 in inflammation has long been recognized, but the underlying mechanisms remain unclear. Here, we identified PTX3 as an integral component of pulmonary granulomas and a pivotal factor controlling inflammation in sarcoidosis. Using a mouse model of pulmonary granulomatous inflammation, we demonstrated the formation of significantly larger foreign-body granulomas in the lungs from PTX3-deficient mice compared to their wild-type counterparts, a phenotype that was associated with enhanced cellular infiltration and increased levels of proinflammatory cytokines in the pulmonary microenvironment. These susceptibility hallmarks were completely abolished following treatment with recombinant PTX3. Most importantly, the genetic deficiency of PTX3 in humans was confirmed as a critical factor controlling leukocyte recruitment and inflammation in human sarcoidosis. Accordingly, PTX3-deficient sarcoidosis patients exhibit enhanced leukocyte recruitment in the lung. Taken together, these findings reveal a previously unanticipated role for PTX3 during granulomatous inflammation in murine and human sarcoidosis and disclose PTX3 as a promising immunotherapeutic target in the clinical management of sarcoidosis.. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Sergio Daishi Sasaki - Integrante / CUNHA, CRISTINA - Integrante / CARVALHO, AGOSTINHO - Coordenador.

• 2014 - Atual

  INVESTIGAÇÃO DOS INIBIDORES DE ELASTASE DE NEUTRÓFILOS PRESENTES NO FEIJÃO-CAUPI, Descrição: O Feijão Caupi (Vigna unguiculata (L.) Walp) é uma leguminosa com importante representatividade econômica e nutricional, especialmente no Brasil. Inibidores de serinoproteases, como a Tripsina, já foram descritos na espécie, assim como em outras plantas. No entanto, ainda não foram identificados inibidores que apresentem atividade sobre a elastase de neutrófilos (HNE), protease envolvida em muitos processos patológicos, como na instalação e progressão da doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC). Nesse estudo, purificamos um inibidor a partir do extrato proteico de Vigna vinculata que apresenta atividade sobre HNE. Inicialmente, foi realizado o processo de extração alcalina de proteínas seguido de três passos cromatográficos distintos, utilizando as colunas HitrapQ (Troca-iônica), Source15RPC (Fase-Reversa) e ACE18 (HPLC). Essas etapas foram acompanhadas por testes de atividade inibitória, utilizando os substratos fluorogênicos Meo-Suc-Ala-Ala-Pro-Val MCA (Elastase) e Z-Phe-Arg MCA (Tripsina), além de ensaios de quantificação de concentração de proteínas. Para estimar o tamanho da molécula, foram utilizadas as técnicas de espectrometria de massa por Maldi-Tof e eletroforese em gel SDS-Page. O inibidor apresenta massa molecular estimada entre 4,5 e 10 KDa, de acordo com os resultados de Maldi-Tof e SDS-Page. Após a purificação, a molécula não apresentou atividade inibitória sobre Tripsina, indicando que essa é uma molécula ainda não caracterizada no Feijão Caupi. A identificação de um inibidor de elastase poderá contribuir para ampliar a descrição de moléculas presentes na espécie, além de seu possível uso em modelos experimentais.. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Sergio Daishi Sasaki - Coordenador / Aparecida S. Tanaka - Integrante / Adriana Feliciano Alves Durán - Integrante / Graziele Cristina Ferreira - Integrante.

• 2012 - 2016

  Estudos da atividade de inibidores de serinoproteases originários do carrapato Rhipicephalus Boophilus microplus em modelo de enfisema pulmonar em camundongos e caracterização molecular das atividades de serinoproteases presentes no modelo., Descrição: Neste projeto estamos realizando a instilação de camundongos com o tratamento pelas moléculas BmTI-A e BmTI-6, dois inibidores de serinoproteases, em modelo de enfisema de camundongos, os lavados bronco alveolares e pulmões estão sendo investigados quanto à presença de proteases, animais tratados aparentemente adquirem proteção contra o desenvolvimento do enfisema pulmonar. Financiamento Processo FAPESP 2011/07001-7 .. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (1) / Especialização: (0) / Mestrado acadêmico: (2) / Mestrado profissional: (0) / Doutorado: (1) . , Integrantes: Sergio Daishi Sasaki - Coordenador / Aparecida S. Tanaka - Integrante / Fernanda Degobbi T. Q. S. Lopes - Integrante / Milton de Arruda Martins - Integrante., Financiador(es): Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 9

• 2011 - 2014

  EXPLORANDO A MULTIFATORIEDADE DA RESISTÊNCIA A MÚLTIPLAS DROGAS (MDR) EM CÉLULAS TUMORAIS: AVALIAÇÃO DO PAPEL DESEMPENHADO POR PROTEÍNAS TIROSINA FOSFATASES E ALTERAÇÕES DO METABOLISMO ENERGÉTICO, Descrição: O presente projeto visa contribuir para um maior entendimento do estabelecimento e manutenção do fenótipo MDR em células tumorais e determinação de potenciais alvos moleculares voltados para o desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas de combate ao câncer e a resistência tumoral. Nesse sentido, o presente projeto está focado em dois objetivos principais: 1) Dar continuidade aos estudos iniciados em meu pós-doutoramento visando, nesta nova fase, a determinação do exato mecanismo molecular de ação das LMWPTPs em células tumorais e no processo de aquisição do fenótipo MDR em células leucêmicas. Nesse sentido, os experimentos realizados estarão voltados para a determinação das contribuições relativas da atividade catalítica e adaptadora/scaffold de LMWPTPs no estabelecimento do fenótipo MDR, investigação das bases moleculares responsáveis pelo aumento da expressão e atividade de LMWPTPs em células MDR e estudo dos padrões de distribuição intracelular de LMWPTPs; 2) Dar início, dentro da nossa linha de pesquisa, aos estudos voltados para a análise do metabolismo energético em células tumorais MDR, área de estudo da biologia tumoral ainda pouco explorada. Nesse sentido, cabe aqui destacar o pioneirismo do projeto no que diz respeito ao estudo do metabolismo tumoral no Brasil. Financiamento Processo FAPESP 2010/16050-9.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Sergio Daishi Sasaki - Integrante / Ana Carolina Santos de Souza Galvão - Coordenador / Giselle Zenker Justo - Integrante., Financiador(es): Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de SP - Auxílio financeiro.

• 2007 - 2008

  Programa Primeiros Projetos - FAPESP. Estudos genômicos e proteômicos do trato digestivo do carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus e determinação de antígenos imuno-responsivos ao antissoro de bovinos infestados, Descrição: Neste projeto será realizada a construção de uma biblioteca de cDNA do trato digestivo do carrapato Boophilus microplus que lera os clones de fragmentos de cDNA sequenciados. Extratos do trato digestivo do carrapato B. microplus serão preparados e utilizados em análise por géis bidimensionais de proteína. Os "spots" protéicos serão selecionados, as proteínas serão extraídas do gel de poliacrilamida e terão suas massas moleculares e as seqüências das porções N-terminais determinadas, a análise dos dados obtidos será realizada utilizando o programa BLAST. Complementando os objetivos desse projeto, realizaremos a seleção de candidatos a antígenos identificados no carrapato B. microplus, utilizando o anti-soro de bovinos infestados e western-blottings dos géis bidimensionais do extrato de trato digestivo do carrapato. Finalmente, realizaremos a imunização de bovinos utilizando como antígeno recombinante o inibidor de protease BmTI-6, avaliaremos o potencial protetor desse antígeno contra a infestação do B. microplus. (AU). Financiamento Processo FAPESP 2006/60003-0.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Sergio Daishi Sasaki - Coordenador., Financiador(es): Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - Auxílio financeiro / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - Auxílio financeiro.

Prêmios