Patrícia Camacho Mazzonetto

Pós-doutorado

Formação complementar

Idiomas

Áreas de atuação

Organização de eventos

Participação em eventos

Orientou

Produções bibliográficas

• MAZZONETTO, PATRICIA ; MILANEZI, FERNANDA ; D?ANDREA, MARIANA ; MARTINS, SILVIA ; MONFREDINI, PRISCILLA M. ; DOS SANTOS SILVA, JULIANA ; PERRONE, EDUARDO ; VILLELA, DARINE ; SCHNABEL, BEATRIZ ; NAKANO, VIVIANE ; PALMERO, EDENIR INEZ ; BRAGGIO, ESTEBAN ; CAVALCANTI, THEREZA L. ; GUIDA, GUSTAVO ; MIGLIAVACCA, MICHELE P. ; SCAPULATEMPO-NETO, CRISTOVAM ; ZALCBERG, ILANA . BRCA1 and BRCA2 germline mutation analysis from a cohort of 1267 patients at high risk for breast cancer in Brazil. BREAST CANCER RESEARCH AND TREATMENT , v. 199, p. 127-136, 2023.

• MOSINI, A.C. ; MAZZONETTO, P.C. ; CALIÓ, M.L. ; POMPEU, C. ; MASSINHANI, F.H. ; NAKAMURA, T.K.E. ; PIRES, J.M. ; SILVA, C.S. ; PORCIONATTO, M.A. ; MELLO, L.E. . Temporal pattern of Fos and Jun families expression after mitogenic stimulation with FGF-2 in rat neural stem cells and fibroblasts. Brazilian Journal of Medical and Biological Research (on line) , v. 56, p. e12546, 2023.

• MAZZONETTO, PATRICIA C. ; VILLELA, DARINE ; DA COSTA, SILVIA SOUZA ; KREPISCHI, ANA C. V. ; MILANEZI, FERNANDA ; MIGLIAVACCA, MICHELE P. ; PIERRY, PAULO M. ; BONALDI, ADRIANO ; ALMEIDA, LUIZ GUSTAVO D. ; DE SOUZA, CAMILA ALVES ; KROLL, JOSÉ EDUARDO ; PAULA, MARCELO G. ; GUARISCHI'SOUSA, RODRIGO ; SCAPULATEMPO'NETO, CRISTOVAM ; ROSENBERG, CARLA . Low-pass whole genome sequencing is a reliable and cost-effective approach for copy number variant analysis in the clinical setting. ANNALS OF HUMAN GENETICS , v. 13, p. 21719, 2023.

• KREPISCHI, A. C. V. ; VILLELA, D. ; COSTA, S. S. ; MAZZONETTO, P.C. ; MIGLIAVACCA, MICHELE P. ; MILANEZI, MARIA FERNANDA G. ; SANTOS, J. G. ; GUARISCHI-SOUSA, R. ; CAMPANA, G. ; KOK, F. ; SCHLESINGER, D. ; KITAJIMA, J. P. ; CAMPAGNARI, F. ; VIANNA-MORGANTE, A. M. ; PEARSON, P. L. ; SCHAUREN, J. ; ROSENBERG, CARLA . Chromosomal microarray analyses from 5,778 patients with neurodevelopmental disorders and congenital anomalies in Brazil. Scientific Reports , v. 12, p. 10.1038, 2022.

• VILLELA, DARINE ; MAZZONETTO, PATRICIA C. ; MIGLIAVACCA, MICHELE P. ; PERRONE, EDUARDO ; GUIDA, GUSTAVO ; MILANEZI, MARIA FERNANDA G. ; JORGE, ALEXANDER A. L. ; RIBEIRO'BICUDO, LUCILENE A. ; KOK, FERNANDO ; CAMPAGNARI, FRANCINE ; ROSSO'GIULIANI, LIANE ; COSTA, SILVIA SOUZA ; VIANNA'MORGANTE, ANGELA M. ; PEARSON, PETER L. ; KREPISCHI, ANA C. V. ; ROSENBERG, CARLA . Congenital chromoanagenesis in the routine postnatal chromosomal microarray analyses. American Journal of Medical Genetics Part A , v. 1, p. 1-10, 2021.

• MAZZONETTO, P.C. ; ARIZA, C.B. ; OCANHA, S.G. ; DE SOUZA, T.A. ; KO, G.M. ; MENCK, C.F.M. ; MASSIRONI, S.M.G. ; PORCIONATTO, M.A. . Mutation in NADPH oxidase 3 (NOX3) impairs SHH signaling and increases cerebellar neural stem/progenitor cell proliferation. BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA-MOLECULAR BASIS OF DISEASE , v. 1865, p. 1502-1515, 2019.

• SALOMONE, RAQUEL ; BENTO, RICARDO F. ; COSTA, HELOISA J. Z. R. ; AZZI-NOGUEIRA, DEBORAH ; OVANDO, PATRÍCIA C. ; DA-SILVA, CIRO F. ; ZANATTA, DANIELA B. ; STRAUSS, BRYAN E. ; HADDAD, LUCIANA A. . Bone marrow stem cells in the facial nerve regeneration from isolated stumps. MUSCLE & NERVE , v. 1, p. n/a-n/a, 2012.

• SALOMONE, RAQUEL ; COSTA, H. J. Z. R. ; RODRIGUES, J. R. F. ; SILVA, S. M. R. ; OVANDO, PATRÍCIA C. ; BENTO, RICARDO F. . Assessment of a Neurophysiological Model of the Mandibular Branch of the Facial Nerve in Rats by Electromyography. Annals of Otology, Rhinology & Laryngology , v. 121, p. 179-84, 2012.

• SALOMONE, R. ; BENTO, R. F. ; COSTA, H. J. Z. R. ; SILVA, C. F. ; OVANDO, P. C. ; ZANATTA, D. B. ; STRAUSS, B. E. ; AZZI-NOGUEIRA, D. ; HADDAD, L. A. . Células-Tronco Mesenquimais na Regeneração de Neurotmeses do Nervo Facial.. In: 43 Congresso Brasileiro de Otorrinolaringologia & Cirurgia Cérvico Facial, 2013, São Paulo. Brazilian Journal of Otorhinolaryngology, 2013. v. 79. p. 8.

• SALOMONE, R. ; BENTO, R. F. ; COSTA, H. J. Z. R. ; SILVA, C. F. ; OVANDO, P. C. ; ZANATTA, D. B. ; STRAUSS, B. E. ; AZZI-NOGUEIRA, D. ; HADDAD, L. A. . Células-Tronco Mesenquimais na Regeneração de Neurotmeses do Nervo Facial. In: 43 Congresso Brasileiro de Otorrinolaringologia & Cirurgia Cérvico Facial,, 2013, São Paulo. Brazilian Journal of Otorhinolaryngology, 2013. v. 79. p. 8.

• SALOMONE, RAQUEL ; BENTO, RICARDO F. ; COSTA, HELOISA J. Z. R. ; AZZI-NOGUEIRA, D. ; OVANDO, P. C. ; DA-SILVA, CIRO F. ; ZANATTA, DANIELA B. ; STRAUSS, BRYAN E. ; HADDAD, L. A. . Bone marrow stem cells in the facial nerve regeneration from isolated stumps.. In: ., 2013, Nice. 2nd Meeting of European Academy of ORL-HNS and CE ORL-HNS Otorhinolaryngology and Head and Neck Surgery, 2013.

• COSTA, H. J. Z. R. ; SALOMONE, R. ; COSTA M.P ; OVANDO, P. C. ; HADDAD, L. A. ; BENTO, R. F. . Histomorphometric analysis of the mandibular branch of the facial nerve in rats. In: 11th ESPRAS Congress, 2009, Rhodes. Histomorphometric analysis of the mandibular branch of the facial nerve in rats., 2009. p. 259-259.

• COSTA, H. J. Z. R. ; SALOMONE, R. ; OVANDO, P. C. ; HADDAD, L. A. ; BENTO, R. F. . Schwann-Like Cell Differentiation From Rat Bone Marrow Stem Cells: Potential Therapeutic Applications in an Experimental Model. In: XIX World Congress - IFOS Brazil/ XIX World Congress of Oto-Rhino-Laryngology., 2009, São Paulo. Schwann-Like Cell Differentiation From Rat Bone Marrow Stem Cells: Potential Therapeutic Applications in an Experimental Model., 2009.

• COSTA, H. J. Z. R. ; SALOMONE, R. ; OVANDO, P. C. ; COSTA M.P ; BENTO, R. F. . Schwann-Like Cell Differentiation From Rat Bone Marrow Stem Cells: Potential Therapeutic Applications in an Experimental Model of Facial Nerve Injury. In: XI International Facial Nerve Symposium, 2009, Roma. The Journal of International Advanced Otology, 2009.

• COSTA, H. J. Z. R. ; SALOMONE, R. ; COSTA M.P ; OVANDO, P. C. ; HADDAD, L. A. ; BENTO, R. F. . Schwann-like cell differentiation from rat bone marrow stem cells: potential therapeutic applications in an experimental model of facial nerve injury.. In: 11th ESPRAS Congress, 2009, Rhodes. Book of Abstracts, 2009.

• PONTES, L. B. ; MAZZONETTO, P. ; ROSENBERG, CARLA ; VIEIRA, T. P. ; STEINER, C. E. . EXPANDINDO O FENÓTIPO DE MICRODUPLICAÇÃO 17Q11.2: UM RELATO DE CASO. 2023. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• MAZZONETTO, PATRICIA C. ; VILLELA, D. ; COSTA, SILVIA SOUZA ; KREPISCHI, ANA C. V. ; MILANEZI, FERNANDA ; PAULA, M. G. ; PIERRY, PAULO M. ; BONALDI, ADRIANO ; ALMEIDA, LUIZ GUSTAVO D. ; ROSENBERG, CARLA . LOW-PASS WHOLE-GENOME SEQUENCING AS A COST-EFFECTIVE ALTERNATIVE TO CHROMOSOME MICROARRAY ANALYSES IN THE DETECTION OF CHROMOSOME IMBALANCES. 2023. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• MAZZONETTO, P. C. ; OCANHA, S. G. ; ARIZA, C. B. ; de SOUSA, T. A. ; KO, G. M. ; MENCK, C. F. M. ; MASSIRONI, S. M. G. ; PORCIONATTO, M. A. . Nox3 mouse mutation influence the SHH signaling pathway in the control of cerebellar progenitor and neural stem cell proliferation. 2018. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• MAZZONETTO, P. C. ; OCANHA, S. G. ; ARIZA, C. B. ; de SOUSA, T. A. ; KO, G. M. ; MENCK, C. F. M. ; MASSIRONI, S. M. G. ; PORCIONATTO, M. A. . Mutated NOX3 increases ROS production, stimulates SHH signaling and increases cerebellar progenitor proliferation. 2018. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• MAZZONETTO, P. C. ; OCANHA, S. G. ; ARIZA, C. B. ; de SOUSA, T. A. ; KO, G. M. ; GALINDO, L. T. ; MASSIRONI, S. M. G. ; PORCIONATTO, M. A. . N64Y mutation in Nox3 gene causes excessive proliferation of mouse cerebellar progenitor and neural stem cell. 2017. (Apresentação de Trabalho/Simpósio).

• MAZZONETTO, P. C. ; OCANHA, S. G. ; ARIZA, C. B. ; de SOUSA, T. A. ; KO, G. M. ; MASSIRONI, S. M. G. ; PORCIONATTO, M. A. . Mutação em Nox3 influencia a via de Sinalização SHH causando proliferação excessiva dos precursores de células granulares. 2017. (Apresentação de Trabalho/Outra).

• GARCÍA, L. M. D. ; CHIARANTIN, G. M. D. ; MAZZONETTO, P. C. ; PORCIONATTO, M. A. . Astrocytes response to reactive oxygen species (ROS) activity in a NOX3 mouse mutant. 2017. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• NAKAMURA, T. K. E. ; MAZZONETTO, P. C. ; PORCIONATTO, M. A. . miRNAs expression related to proliferation of neuronal precursors during cerebelar development. 2017. (Apresentação de Trabalho/Conferência ou palestra).

• MAZZONETTO, P. C. ; ARIZA, C. B. ; de SOUSA, T. A. ; KO, G. M. ; GALINDO, L. T. ; MASSIRONI, S. M. G. ; PORCIONATTO, M. A. . Mutated Nox3 causes excessive cerebellar granule cells progenitors proliferation. 2016. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• OCANHA, S. G. ; MAZZONETTO, P. C. ; PORCIONATTO, M. A. . Inibição de NOX causa redução da espessura da camada granular externa do cerebelo em desenvolvimento. 2016. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• MAZZONETTO, P. C. ; ARIZA, C. B. ; de SOUSA, T. A. ; KO, G. M. ; GALINDO, L. T. ; VIEIRA-MUNDIM, M. T. V. ; MASSIRONI, S. M. G. ; PORCIONATTO, M. A. . Mutated Nox3 Causes Excessive Cerebellar Neuronal Precursors Proliferation. 2015. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• GARCÍA, L. M. D. ; MAZZONETTO, P. C. ; GALINDO, L. T. ; AMORIM, R. M. ; PORCIONATTO, M. A. . Neural stem cells sources in the mouse brain. 2015. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• GARCÍA, L. M. D. ; MAZZONETTO, P. C. ; GALINDO, L. T. ; PORCIONATTO, M. A. ; AMORIM, R. M. . Progenitores neurais para terapia celular em transtornos do desenvolvimento.. 2015. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• MAZZONETTO, P. C. ; ARIZA, C. B. ; de SOUSA, T. A. ; KO, G. M. ; GALINDO, L. T. ; MASSIRONI, S. M. G. ; PORCIONATTO, M. A. . Mutated Nox3 causes excessive cerebellar neuronal precursors proliferation. 2015. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• GARCÍA, L. M. D. ; MAZZONETTO, P. C. ; PORCIONATTO, M. A. ; AMORIM, R. M. . Estudo morfologico e imunofenotipico dos precursores neurais do sistema nervoso pós-natal de camundongos. 2015. (Apresentação de Trabalho/Conferência ou palestra).

• MAZZONETTO, P. C. ; ARIZA, C. B. ; KO, G. M. ; GALINDO, L. T. ; PESQUERO, J. B. ; MASSIRONI, S. M. G. ; PORCIONATTO, M. A. . Nox3 mutation affects mouse cerebellar granule cell precursors. 2014. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• OVANDO, P. C. ; MASSIRONI, S. M. G. ; GALINDO, L. T. ; VIEIRA-MUNDIM, M. T. V. ; ARIZA, C. B. ; KO, G. M. ; PORCIONATTO, M. A. . Identificação de genes envolvidos no controle da proliferação de precursores neuronais e de células-tronco neurais utilizando o camundongo atáxico eqlb. 2013. (Apresentação de Trabalho/Outra).

• SALOMONE, R. ; BENTO, R. F. ; COSTA, H. J. Z. R. ; AZZI-NOGUEIRA, D. ; OVANDO, P. C. ; SILVA, C. F. ; ZANATTA, D. B. ; STRAUSS, B. E. ; HADDAD, L. A. . Bone marrow stem cells in the facial nerve regeneration from isolated stumps.. 2013. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• SALOMONE, R. ; COSTA, H. J. Z. R. ; RODRIGUES, J. R. F. ; SILVA, S. M. R. ; OVANDO, P. C. ; BENTO, RICARDO F. . Assessment of a Neurophysiological Model of the Mandibular Branch of the Facial Nerve in Rats by Eletromyography.. 2013. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• COSTA, H. J. Z. R. ; SALOMONE, R. ; COSTA M.P ; OVANDO, P. C. ; HADDAD, L. A. ; BENTO, R. F. . Schwann-like cell differentiation from rat bone marrow stem cells: potential therapeutic applications in an experimental model of facial nerve injury.. 2010. (Apresentação de Trabalho/Simpósio).

• COSTA, H. J. Z. R. ; SALOMONE, R. ; COSTA M.P ; OVANDO, P. C. ; HADDAD, L. A. ; BENTO, R. F. . Histomorphometric analysis of the mandibular branch of the facial nerve in rats.. 2010. (Apresentação de Trabalho/Simpósio).

• COSTA, H. J. Z. R. ; SALOMONE, R. ; OVANDO, P. C. ; HADDAD, L. A. ; BENTO, R. F. . Schwann-like cell differentiation from rat bone marrow stem cells: potential therapeutic applications in an experimental model of facial nerve injury.. 2009. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• COSTA, H. J. Z. R. ; SALOMONE, R. ; OVANDO, P. C. ; HADDAD, L. A. ; BENTO, R. F. . Schwann-Like cell defferentiation from rat bone marrow stem cells: Potential therapeutic applications in an experimental model of facial nerve injury.. 2009. (Apresentação de Trabalho/Seminário).

• ARANTES-TSUZUKI, P. M. ; MAZZONETTO, P.C. ; LO TURCO, E. G. . Treatment for Canine Corneal Ulcer using Adipose Tissue-derived Mesenchymal Stem Cell Therapy - Case Report 2019 (Preprint).

Projetos de pesquisa

• 2017 - 2020

  Papel de ROS produzido por NOX na ativação da via de SHH durante o desenvolvimento do cerebelo, Descrição: Nosso grupo descreveu o camundongo mutante Nox3eqlb cuja principal característica fenotípica é a falta de coordenação motora causada por excesso de produção de espécies reativas de oxigênio (ROS, reactive oxygen species). Por sequenciamento de nova geração identificamos a mutação pontual no gene da NADPH oxidase 3 (NOX3), que ocasiona aumento da proliferação de precursores de células granulares e arborização anormal dos dendritos das células de Purkinje. Sendo as células granulares o tipo neuronal majoritário e as células de Purkinje a única via eferente do cerebelo, defeitos na geração, proliferação e/ou maturação dessas células ocasionam defeitos na coordenação motora, ou ataxia, como observamos para Nox3eqlb. O desenvolvimento do cerebelo inicia-se durante a fase embrionária e é finalizado no período pós-natal com a proliferação dos precursores de células granulares induzida pelo fator morfogênico sonic hedgehog (SHH), que é produzido e secretado pelas células de Purkinje. A superexpressão de genes da via de sinalização de SHH, principalmente os fatores de transcrição da família GLI, está relacionada à formação de meduloblastomas, tumor cerebelar cuja origem celular ainda não está totalmente esclarecida. Nossos estudos com Nox3eqlb revelam que a mutação na NOX3 que descrevemos causa aumento na produção de ROS pelos precursores de células granulares. Nós descrevemos que a via de SHH está estimulada no cerebelo de Nox3eqlb, pois encontramos aumento da expressão de dos fatores de transcrição GLI1, GLI2 e GLI3, além de ciclina D1 e AKT1, todos alvos diretos da sinalização por SHH. Neste projeto buscamos avaliar se ROS produzido em excesso afeta a produção de SHH, bem como de outras proteínas importantes no controle da proliferação celular e maturação dos neurônios cerebelares. Adicionalmente, buscaremos microRNAs (miRNAs) importantes para o controle da proliferação e maturação neuronal, e que estejam com expressão alterada no camundongo mutante. Esperamos, com esse projeto, identificar a relação entre ROS produzido por NOX (ROS-NOX) no controle da proliferação de precursores de células granulares por SHH, com implicações para o entendimento do desenvolvimento normal e patológico do cerebelo, no surgimento das ataxias cerebelares e tumores.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Patricia Camacho Mazzonetto - Integrante / Silvia Maria Gomes Massironi - Integrante / Marimélia Aparecida Porcionatto - Coordenador / Sarah Gabrielle Ocanha - Integrante / Thábatta Karollynne Estevam Nakamura - Integrante / Giovana Longatti Baptista - Integrante / Alexandre Keiji Tashima - Integrante., Financiador(es): Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - Auxílio financeiro.

• 2016 - 2019

  Crosstalk entre as vias Wnt, SHH e Notch na aquisição de fenótipo de célula-tronco por astrócitos reativos, Descrição: No sistema nervoso central (SNC) adulto, regiões especializadas conhecidas como nichos neurogênicos recapitulam a geração de células neurais que ocorre durante o desenvolvimento. Nesse processo, células-tronco neurais dão origem a células da glia e neurônios e duas regiões do SNC de mamíferos adultos apresentam nichos neurogênicos bem definidos do ponto de vista celular e molecular: a zona subventricular (SVZ) do ventrículo lateral e a zona subgranular (SGZ) do hipocampo. Embora novos neurônios sejam produzidos nos nichos neurogênicos de cérebros adultos, a capacidade dessas células de participarem no processo regenerativo do tecido nervoso é muito limitada. A precária regeneração tecidual do SNC traz consequências, muitas vezes gravíssimas, a indivíduos que têm o cérebro afetado por lesões traumáticas, acidente vascular encefálico (AVE) ou doenças neurodegenerativas. Há cerca de 10 anos estudamos os mecanismos celulares e moleculares envolvidos na resposta das células-tronco neurais a lesões traumáticas no SNC com o intuito de propor possíveis estratégias terapêuticas para o tratamento dessas lesões. Nesse período conseguimos resultados interessantes que, em conjunto com trabalhos na literatura, aumentaram nossa compreensão dos mecanismos celulares e moleculares envolvidos no controle do comportamento das células-tronco neurais em modelo de lesão no córtex. Utilizando modelos animais de lesão traumática e de AVE, testamos estratégias terapêuticas tais como: degradação de condroitim sulfato na lesão para diminuir a inibição da migração e do crescimento axonal; transplante de células-tronco mesenquimais no local da lesão para modular a resposta inflamatória local; e administração de fragmentos de CXCL12 na lesão para aumentar a atração de neuroblastos. No entanto, até o momento, nenhuma das estratégias propostas na literatura e por nós, teve sucesso no sentido de diminuir as perdas funcionais sofridas pelos camundongos submetidos aos modelos de lesão. Diante desse cenário, buscamos uma nova hipótese de trabalho para tentar compreender e, eventualmente, reverter a falta de regeneração do SNC. Trabalhos da literatura têm mostrado que características neuronais são determinadas por mecanismos intrínsecos estabelecidos antes da diferenciação em neurônios maduros. Durante o período embrionário, a exposição das células do neuroepitélio a gradientes de fatores morfogênicos estabelece diferentes territórios de expressão de fatores de transcrição, cada um deles associado com a produção de diferentes tipos de neurônios. Embora as células-tronco presentes no nicho neurogênico da SVZ do adulto aumentem a taxa de proliferação em resposta aos estímulos associados a lesões, os novos neurônios gerados não apresentam capacidade de realizar regeneração tecidual que seja suficiente para evitar perdas funcionais importantes. Similar ao que ocorre com as células-tronco neurais, as células da glia também são afetadas pela lesão. Em particular, os astrócitos, que sofrem a ação de fatores solúveis liberados na lesão levando ao que se conhece por "ativação astrocitária". Os astrócitos ativados, denominados astrócitos reativos, apresentam alterações importantes quando comparados com astrócitos não ativados. Dentre essas alterações, observam-se mudanças na expressão gênica, aumento da proliferação e, eventualmente, desdiferenciação. Mais recentemente alguns trabalhos na literatura têm mostrado que uma pequena parcela dos astrócitos que se tornam reativos após uma lesão adquirem fenótipo de célula-tronco neural como desdobramento do processo de ativação e desdiferenciação astrocitária. A hipótese levantada neste projeto é que, in vivo, os astrócitos reativos seriam uma alternativa aos nichos neurogênicos para produção de células-tronco neurais no cérebro adulto. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Patricia Camacho Mazzonetto - Integrante / Mayara Terra Villela Vieira Mundim - Integrante / Marimélia Aparecida Porcionatto - Coordenador / Isaias Glezer - Integrante / Ieda Longo Maugeri - Integrante / Gabriel Arisi - Integrante / Agnes Sardinha Pinto - Integrante / Fernando Henrique Massinhani - Integrante., Financiador(es): Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - Auxílio financeiro.

• 2015 - 2018

  Envolvimento de Nox3 no controle da proliferação das células-tronco/precursores neurais, Descrição: O cerebelo é a região do sistema nervoso central responsável pela coordenação motora e equilíbrio, tornando-o um excelente modelo para o estudo do desenvolvimento do sistema nervoso, pois reúne importantes eventos celulares como proliferação, migração e diferenciação de precursores neuronais. Uma linhagem de camundongo que apresenta falta de coordenação motora foi selecionada em um projeto de mutagenese por ENU. O camundongo, chamado equilíbrio (eqlb), apresenta aumento na proliferação dos precursores de neurônios cerebelares durante o desenvolvimento pós-natal (até 15 dias de idade), bem como uma camada de células de Purkinje desorganizada. Recentemente, nosso laboratório identificou a mutação causadora do fenótipo como uma transversão A>T na posição 190 (sequência transcrita) no gene Nox3, localizado no cromossomo 17 do camundongo com uma consequente substituição de Asparagina (Asp) por Tirosina (Tyr) na posição 64 da proteína. Por análises in silico, observamos que a substituição de aminoácido leva a alterações nas estruturas primária e secundária da proteína. No camundongo eqlb, Nox3 apresenta apenas uma fita beta, formada pelos aminoácidos nas posições 58-70, ao invés de duas na região 59-61 e 65-70 no BALB/c, além de ter uma Tyr adicional, o que gera um possível novo sitio de fosforilação, segundo predição por análise in silico realizada por nós. Além disso, o camundongo eqlb possui alta expressão de Nox1, indicando uma possível compensação causada pela expressão de Nox3 mutada. Nox3 é membro da família das NADPH oxidases, proteínas transmembrana que têm como função a redução do oxigênio molecular para formar espécies reativas de oxigênio (ERO). As ERO produzidas pelas Nox podem modular a sinalização celular em diversos processos fisiológicos incluindo proliferação. O mitógeno SHH (Sonic Hedhog) secretado pelas células de Purkinje é o principal mitógeno para precursores de neurônios cerebelares durante o desenvolvimento pós-natal. A desregulação da sinalização de SHH é associada com o desenvolvimento anormal do cerebelo e a contínua sinalização de SHH influencia diretamente na proliferação de células granulares, originando, em muitos casos, o meduloblastoma. Além dessa origem, o meduloblastoma pode formar-se pela desregulação das células-tronco neurais cerebelares dependentes de SHH. A formação de tumores também já foi relacionada com as ERO geradas pela ação de Nox. Devido as características acima em relação ao fenótipo do camundongo eqlb, e com a recente localização da mutação, o camundongo eqlb passa a ser um excelente modelo animal para o estudo do controle da proliferação de células-tronco/precursores neurais. Por SHH ser o principal mitógeno dos precursores de células granulares no cerebelo em desenvolvimento, nossa hipótese para este projeto é que as ERO produzidas por Nox possam atuar na via de SHH influenciando a atividade desse mitógeno. O nosso objetivo é estudar a participação de Nox e ERO no controle da proliferação de precursores de células granulares e células-tronco neurais cerebelares pela via de sinalização estimulada por SHH.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Patricia Camacho Mazzonetto - Integrante / Silvia Maria Gomes Massironi - Integrante / Marimélia Aparecida Porcionatto - Coordenador.

• 2012 - 2014

  Mutação no gene Nox3 causa fenótipo de falta de coordenção e proliferação excessiva de precursores de neurônios cerebelares, Descrição: O cerebelo é a região do sistema nervoso central responsável pela coordenação motora e equílibrio. Este órgão é um excelente modelo de estudo do desenvolvimento do sistema nervoso central, pois reúne importantes eventos celulares tais como proliferação, migração e diferenciação de precursores neuronais. Uma linhagem mutante que apresenta perda de coordenação motora e falta de equilíbrio foi selecionada a partir de um projeto de mutagênese induzida por ENU (etil-nitroso-ureia). O camundongo, chamado equílibrio (eqlb), apresenta aumento na taxa de proliferação de precursores neuronais cerebelares durante o desenvolvimento pós-natal precoce (até o dia 15 depois de nascido), bem como desorganização da monocamada de células de Purkinje. O objetivo desse trabalho foi identificar o gene mutado causador do fenótipo eqlb e investigar as vias de sinalização envolvidas no controle da proliferação celular por precursores neuronais cerebelares de camundongo controle BALB/c e eqlb. Utilizando mapeamento genético por análise de microssatélites polimórficos e sequenciamento de nova geração, a mutação foi localizada no gene Nox3 (NADPH oxidase 3), um membro da família das NADPH oxidases (Nox), localizado no cromossomo 17 do camundongo. As NADPH oxidases são proteínas transmembrana com função principal de reduzir oxigênio molecular a espécies reativas de oxigênio (ERO). A produção de ERO por Nox pode modular a sinalização celular em diversos processos fisiológicos incluindo proliferação. O sequenciamento de Nox3 mutado revelou uma transversão A>T com consequente substituição de uma Asp por uma Tyr. A análise preditiva da estrutura secundária da proteína Nos3 expressa pelo camundongo eqlb indicou a formação de apenas uma fita beta ao invés de duas como no camundongo BALB/c. A análise da expressão dos membros da família Nox (Nox1-4, Duox1-2 e Noxo1) revelou aumento na expressão de Nox1 no cerebelo de camundongos eqlb em comparação com camundongos BALB/c selvagens, sugerindo uma possível compensação de função devido a mutação em Nox3.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Patricia Camacho Mazzonetto - Integrante / Silvia Maria Gomes Massironi - Integrante / Marimélia Aparecida Porcionatto - Coordenador.

• 2008 - 2010

  Regeneração do ramo mandibular do nervo facial de ratos após a implantação de células multipotentes do estroma mesenquimal indiferenciadas e diferenciadasin vitro que apresentam fenótipo de células de Schwann, Descrição: O nervo facial desempenha um papel importante em diversas funções fisiológicas no organismo, no entanto, distúrbios funcionais desse nervo podem também afetar a psique do indivíduo, provocando mudanças significativas na autoimagem, interferindo no rendimento profissional e piorando a qualidade de vida. Lesões graves do nervo facial (neurotmeses) mesmo quando tratadas precocemente apresentam resultados funcionais pobres. Com a recente descoberta das células-tronco, as células multipotentes do estroma mesenquimal indiferenciadas (CMEMi) ou diferenciadas em células com fenótipo de células de Schwann (CMEMd) podem ser uma alternativa melhor para o tratamento de lesões graves do nervo facial. OBJETIVOS: Avaliar a melhora funcional e histológica do ramo mandibular do nervo facial após neurotmese e implantação das CMEMi e CMEMd. MÉTODOS: Em 48 ratos Wistar realizou-se a neurotmese do ramo mandibular direito do nervo facial com a formação de um hiato de 3mm e a tubulização (conduíte de silicone) da região do nervo lesada. Foram criados quatro grupos de acordo com o método de reparo: conduíte de silicone vazio (grupo A, grupo controle); conduíte de silicone com gel acelular (grupo B); conduíte de silicone com gel acelular e CMEMi (grupo C), e conduíte de silicone com gel acelular e CMEMd (grupo D). Um quinto grupo, grupo N, foi criado a partir de segmentos do nervo normal para a avaliação histológica. Os resultados funcionais foram avaliados com o estudo de condução nervosa e os histológicos por avaliação qualitativa e quantitativa dos segmentos proximais e distais. RESULTADOS: Na avaliação funcional, após 6 semanas, os grupos C e D apresentaram amplitudes maiores que os grupos A e B (p<0,001). O grupo C apresentou duração menor que os grupos A, B e D (p<0,001). Na avaliação qualitativa dos segmentos proximais, houve pouca diferença entre os grupos, já nos segmentos distais, as diferenças dos grupos A e B em relação aos grupos C e D foram bem evidentes, no entanto, em ambos os segmentos, o grupo C foi o que mais se aproximou do nervo normal. Na avaliação histológica quantitativa do segmento proximal, não houve diferença no número total e na densidade axonal entre os grupos (p0,169), somente nos diâmetros axonais dos grupos A e B quando comparados ao nervo normal (p<0,001). No segmento distal, o número e a densidade axonal do grupo C foram maiores que os do grupo A e B (p=0,001) e iguais as do grupo D (p=0,711), porém, em todos os grupos, número e a densidade axonal foram menores que do grupo N (p0,003). Não houve diferença na média dos diâmetros entre os grupos operados (p0,007), somente quando comparados com o grupo N (p<0,001). CONCLUSÕES: As CMEMi assim como as CMEMd beneficiaram a regeneração do ramo mandibular do nervo facial de ratos Wistar, contudo, as CMEMi apresentaram resultados funcionais e histológicos melhores que as CMEMd.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (1) / Doutorado: (2) . , Integrantes: Patricia Camacho Mazzonetto - Integrante / Heloísa Juliana Zabeu Rossi Costa - Integrante / Raquel Salomone - Coordenador / Luciana Amaral Haddad - Integrante / Ricardo Ferreira Bento - Integrante., Financiador(es): CAPES - Centro Anhanguera de Promoção e Educação Social - Bolsa.

Prêmios