Leonardo Assis da Silva

Pós-doutorado

Formação complementar

Idiomas

Áreas de atuação

Organização de eventos

Participação em eventos

Participação em bancas

Orientou

Produções bibliográficas

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• DOS SANTOS, ETHIANE ROZO ; DE CAMARGO, BRENDA RABELO ; DA SILVA, LEONARDO ASSIS ; LAUMANN, RAUL ALBERTO ; RIBEIRO, Bergmann Morais ; ARDISSON-ARAÚJO, DANIEL M. P. . The multispecies stinkbug iflavirus Halyomorpha halys virus detected in the multispecies stinkbug egg parasitoid microwasp, Telenomus podisi (Ashmead) (Hymenoptera: Platygastridae). BRAZILIAN JOURNAL OF MICROBIOLOGY , v. 1, p. 9, 2024.

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• Silva, Leonardo Assis da ; LIMA, MONIQUE DA ROCHA QUEIROZ ; DE CAMARGO, BRENDA RABELLO ; GUIMARÃES, DYEFERSON KENED DA SILVA COELHO ; BARBASTEFANO, ANABELE AZEVEDO LIMA ; LIMA, RAQUEL CURTINHAS DE ; DAMASCO, PAULO VIEIRA ; CUNHA, RIVALDO VENÂNCIO DA ; DE SOUZA, LUIZ JOSÉ ; DE AZEREDO, ELZINANDES LEAL ; DE-OLIVEIRA-PINTO, LUZIA MARIA ; NAGATA, TATSUYA ; ARDISSON-ARAÚJO, DANIEL M. P. ; DOS SANTOS, FLAVIA BARRETO ; MORAIS RIBEIRO, BERGMANN . A Chikungunya Virus Multiepitope Recombinant Protein Expressed from the Binary System Insect Cell/Recombinant Baculovirus Is Useful for Laboratorial Diagnosis of Chikungunya. Microorganisms , v. 10, p. 1451, 2022.

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• WEIS, SIMONE NARDIN ; SOUZA, JAQUES MIRANDA F. ; HOPPE, JULIANA BENDER ; FIRMINO, MARINA ; AUER, MANFRED ; ATAII, NASSIM N. ; DA SILVA, LEONARDO ASSIS ; GAELZER, MARIANA MAIER ; KLEIN, CAROLINE PERES ; MÓL, ALAN R. ; DE LIMA, CONSUELO M. R. ; SOUZA, DIOGO ONOFRE ; SALBEGO, CHRISTIANNE G. ; RICART, CARLOS ANDRÉ O. ; FONTES, WAGNER ; DE SOUSA, MARCELO VALLE . In-depth quantitative proteomic characterization of organotypic hippocampal slice culture reveals sex-specific differences in biochemical pathways. Scientific Reports , v. 11, p. 1, 2021.

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• SILVA, L. A. . New insect RNA viruses found in Brazil. 2019. (Apresentação de Trabalho/Conferência ou palestra).

• Silva, L.A. . New insect RNA viruses found Brazil. 2018. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

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• SILVA, L. A. . CONTRIBUIÇÃO AO ESTUDO DOS PADRÕES VEGETAIS À ANÁLISE MICROSCÓPICA DE ALIMENTOS Silva. 2009. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

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• SILVA, L. A. . SEMENTE DE AÇAÍ (Euterpe oleracea) COMO FRAUDE NO CAFÉ TORRADO E MOÍDO. 2009. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• SILVA, L. A. . Verificação de Atividade antimicrobiana de óleo essencial de malva (Malva Sylvestre L. ). 2007. (Apresentação de Trabalho/Seminário).

• SILVA, L. A. . Verificação de efeito Biocida e/ou repelente de extratos aquasos sobre pulgão de hortaliça (Brevicoryne Brassicae L.). 2007. (Apresentação de Trabalho/Seminário).

• Silva, L.A. ; EIRAS, M. . Cowpea aphid-borne mosaic virus, CABMV, em Crotalaria spp. São Paulo: Instituto Biológico, 2016 (Boletim Técnico).

• Silva, L.A. ; Nogueira, M.S.R. ; Freire Filho, F.R. ; EIRAS, M. . Cowpea aphid-borne mosaic vírus, CABMV, em feijão-caupi (Vigna unguiculata). São Paulo: Instituto Biológico, 2016 (Boletim Técnico).

• RODRIGUES, LEILANE K. ; Silva, L.A. ; TOMOMITSU, A.T. ; Garcêz, R.M. ; Colariccio, A. ; Chaves, Alexandre Levi Rodrigues ; EIRAS, M. . Cowpea aphid-borne mosaic vírus, CABMV, em maracujá (Passiflora spp.).. São Paulo: Instituto Biológico, 2016 (Boletim Técnico).

• ATUI, M. B. ; NOGUEIRA, R. D. ; SILVA, A. M. ; MARCIANO, M. A. M. ; FIORAVANTI, M. I. A. ; CHASIN, L. B. ; FRANCO, V. P. A. ; Silva, L.A. ; OLIVEIRA, M. M. L. ; CARDOSO-GUSTASON, P. ; HAYASHI, A. H. . Manual de Análise Microscópica em Polpas de Frutas: Açaí (Euterpe oleracea), Goiaba (Psidium guajava), Manga (Mangifera sp), Morango (Fragaria vesca), Tomate (Lycopersicum sp).. São Paulo: ed. São Paulo: Imprensa Oficial, 2012 (Book).

Projetos de pesquisa

• 2023 - Atual

  Explorando soluções potenciais para o controle de arbovírus: triagem e análise antiviral de extratos de plantas, proteínas recombinantes e clones infecciosos., Descrição: Arboviroses são doenças virais transmitidas por vetores artrópodes hematófafos, como mosquitos e carrapatos, que estão aumentando sua disseminação e prevalência em todo o mundo, principalmente em países em desenvolvimento. As arboviroses mais prevalentes no Brasil são a causadas pelos vírus da febre amarela (YFV), zika (ZIKV), dengue (DENV) e chikungunya (CHIKV). Atualmente, não há medicamentos antivirais amplamente disponíveis para o tratamento dessas doenças. As mudanças ambientais, como o desmatamento, as alterações climáticas, a expansão geográfica do vetor e a superpopulação humana, são os principais fatores que contribuem para o surgimento e recorrência dessas arboviroses. Nesse projeto, pretendemos contribuir para o desenvolvimento de estratégias de prevenção e tratamento de doenças virais transmitidas por mosquitos por meio da avaliação do potencial antiviral de extratos de plantas do cerrado e na inibição da atividade das proteases recombinantes dos vírus YFV e CHIKV por meio de análises in vitro; Desenvolvimento de uma tecnologia de detecção diferencial dos sorotipos de DENV por meio da imobilização de antígeno em corpos de oclusão e; Determinação da causa da incapacidade de um CHIKV mutante de não infectar células de mamíferos e de infectar células de mosquitos, o que pode levar ao desenvolvimento de uma potencial vacina.. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Doutorado: (1) . , Integrantes: Leonardo Assis da Silva - Integrante / Bergmann Morais Ribeiro - Coordenador / Fabrício Souza Campos - Integrante / Raimundo Wagner de Souza Aguiar - Integrante / Raquel das Neves Almeida - Integrante / Luis Janssen Maia - Integrante / Bruno Milhomem Pilati Rodrigues - Integrante., Financiador(es): Universidade de Brasília - Remuneração.

• 2020 - Atual

  Análise da diversidade genômica do SARS-CoV-2 e produção de insumos biotecnológicos para sua detecção durante a infecção e inibição de suas proteases in vitro, Descrição: Novas epidemias como a atual crise impõem novos desafios para a sociedade civil e científica. Dessa forma, a produção de soluções rápidas e biotecnologicamente inovadoras são fundamentais nesse momento. Nesse contexto, o projeto pretende produzir proteínas estruturais e não estruturais do SARS-CoV-2 em diferentes sistemas de expressão visando a produção de um kit de diagnóstico rápido com tecnologia nacional e estudo de inibidores de proteases virais e celulares in vitro. Além disso, anticorpos neutralizantes capazes de inativar o vírus serão isolados e a diversidade genética do vírus SARS-CoV-2, circulante no DF e de vírus patogênicos em morcegos da região serão monitoradas por meio do sequenciamento de um grande número de amostras. Os kits de detecção rápido para COVID-19 serão produzidos para detecção do vírus direto da amostra de swab nasal ou oral ou com a detecção de IgM/IgG específico ao vírus utilizando amostra de soro de pacientes. Serão utilizados diferentes sistemas de expressão de proteínas recombinantes para produção dos antígenos estruturais e proteínas não estruturais. As proteases quimiotripsina-like protease (MPro) and papain-like protease (PLpro) e o domínio catalítico da protease TMPRSS2 humana serão expressas e usadas para a prospecção de moléculas inibitórias (naturais e/ou sintéticas) e avaliação da sua atividade antiviral. Pretendemos utilizar anticorpos monoclonais neutralizantes. Será utilizada uma estratégia baseada na seleção de anticorpos monoclonais recombinantes humanos em bibliotecas apresentas em fago (phage-display). Bibliotecas de Fab compostas de VH e VL humanos isolados de linfócitos naïves, e de linfócitos com memória de experiência viral, serão selecionadas com peptídeos miméticos de epitopos neutralizantes. Serão produzidos anticorpos recombinantes contra SARS-CoV-2 que serão testados, in vitro e in vivo quanto às suas capacidades de neutralização da infecção viral, serão apresentados como candidatos para teste clínico em situações de mitigação dos efeitos inflamatórios agudos causados pelas infecções causadas por estes vírus emergentes. O estudo da diversidade genética do vírus SARS-CoV-2 circulantes no DF e a presença de outros vírus patogênicos em morcegos, também será alvo desse projeto, com o sequenciamento de ao menos 100 amostras virais representativas do DF e amostras de fezes e secreções de morcegos da região. Este monitoramento permitirá (i) identificar os padrões de disseminação geográfica viral, (ii) a identificação de cadeias de transmissão, (iii) a correlação de variantes genéticas com parâmetros clínicos dos pacientes, (iv) correlação de variantes genéticas com a capacidade dos linfócitos T CD4+ dos pacientes em reconhecer os epítopos conservados e/ou específicos do vírus e/ou seus variantes, (v) diversidade de vírus em morcegos da região do DF. Todas estas informações são relevantes na implementação e avaliação de estratégias de controle da epidemia a curto, médio e longo prazo.... , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Leonardo Assis da Silva - Integrante / Bergmann Morais Ribeiro - Coordenador / Fabricio da Silva Morgado - Integrante / Tatsuya Nagata - Integrante / Fernando Lucas Melo - Integrante / Anamélia Lorenzetti Bocca - Integrante / Renato Oliveira Resende - Integrante / Sônia Nair Báo - Integrante / Marcelo de Macedo Brígido - Integrante / Ricardo Henrique Kruger - Integrante / Carlos André Ornelas Ricart - Integrante / Marcelo Valle de Souza - Integrante / Izabela Marques Dourado Bastos - Integrante / João Alexandre R. G. Barbosa - Integrante / Jaime Martins de Santana - Integrante / SIMONE GONÇALVES DA FONSECA - Integrante / SONIA MARIA DE FREITAS - Integrante / NAPOLEÃO FONSECA VALADARES - Integrante / JOÃO BATISTA LOPES MARTINS - Integrante / Sébastien Olivier Charneau - Integrante / LUDMILLA MOURA DE SOUZA AGUIAR - Integrante / Alba Cristina Magalhaes Alves de Melo - Integrante / Maria Emilia Machado Telles Walter - Integrante / Maurício Ayala-Rincon - Integrante / Andrea Queiroz Maranhão - Integrante / Kelly Grace Magalhães - Integrante / Genaina Nunes Rodrigues - Integrante / Daniel Sundfeld Lima - Integrante / MARCUS DE MELO TEIXEIRA - Integrante / Camila da Silva Lasse - Integrante / Milene Aparecida Andrade - Integrante / Aisel Valle Garay - Integrante / Romualdo Barroso de Sousa - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro.

• 2020 - Atual

  Geração de insumos biotecnológicos utilizando diferentes sistemas de expressão de proteínas para a geração de kits de diagnóstico de SARS-CoV-2, Descrição: Este projeto de pesquisa visa produzir antígenos virais de SARS-CoV-2 voltados à formulação de kits de detecção rápido para COVID-19 via detecção do vírus direto da amostra de swab nasal ou oral ou com a detecção de IgM/IgG específico ao vírus utilizando amostra de soro. Serão utilizados diferentes sistemas de expressão de proteínas recombinantes usando bactérias, células de inseto e plantas para produção dos antígenos que serão purificados e submetidos a testes de validação utilizando amostras de indivíduos confirmados para SARS-CoV-2. Estes antígenos são insumos essenciais no desenvolvimento de métodos de detecção rápida do vírus em atual dispersão pela população brasileira e poderão ser utilizados por demais laboratórios no desenvolvimento estratégico de novas soluções no combate à COVID-19... , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (1) / Doutorado: (1) . , Integrantes: Leonardo Assis da Silva - Integrante / Bergmann Morais Ribeiro - Coordenador / Fabricio da Silva Morgado - Integrante / Tatsuya Nagata - Integrante / Brenda Rabello de Camargo - Integrante / Leonardo Lopes da Luz - Integrante / Samira Bührer - Integrante / Ikaro Alves de Andrade - Integrante / Fernanda Cortez Roriz Pontes - Integrante / GILDEMAR JOSÉ BEZERRA CRISPIM - Integrante., Financiador(es): Fundação de Apoio a Pesquisa do Distrito Federal - Auxílio financeiro.

• 2019 - Atual

  Caracterização biológica e molecular de novos cypovírus de insetos-praga, Descrição: Cypovirus (CPV) é um gênero de vírus de insetos pertencente a família Reoviridae. Os vírus deste gênero foram isolados apenas de insetos, principalmente das ordens Lepidóptera, Díptera e Himenóptera. Os CPVs são únicos entre os Reoviridae que são morfologicamente similares aos Baculovirus. Seus virions são oclusos por uma matriz proteica chamada poliedrina, formando um cristal, como ocorre nos baculovirus. Diferentemente dos baculovirus, cypovirus possuem o genoma de RNA dupla fita segmentado, codificando entre 10 a 12 proteínas que se replicam no citoplasma. Apesar de ainda não serem usados como agentes de controle biológico, o seu estudo é importante para o entendimento do seu processo de infeção em células e inseto e de sua patologia, o que pode impulsionar o seu desenvolvimento como ferramentas biotecnológicas para o controle de pragas. Nesse projeto, pretendemos sequenciar o genoma de pelo menos 3 novos cypovirus derivados de insetos-praga de diferentes culturas. Além disso, pretendemos analisar funcionalmente alguns genes virais, a sua citopatologia em células de inseto em cultura e a patologia da infecção em insetos. O conhecimento do genoma desses vírus poderá contribuir para um melhor entendimento o seu processo evolutivo e de sua interação com o seu hospedeiro.. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Leonardo Assis da Silva - Coordenador.

• 2017 - Atual

  Zika, Dengue e Chikungunya: abordagem multidisciplinar para desenvolvimento de soluções aplicáveis em saúde pública, Descrição: O vírus Zika é apenas um entre muitos outros arbovírus circulando no Brasil que apresenta grande importância médica. Arbovírus é o termo genérico para vírus que são transmitidos por artrópodes. Bem como os vírus causadores da dengue, febre amarela e febre chikungunya, o vírus Zika é transmitido pelos mosquitos Aedes agypti e A. albopictus. Apesar da introdução recente dos vírus Zika e Chikungunya, o combate contra a dengue e a febre amarela já se tornou rotineiro no Brasil. O vírus da dengue, por exemplo, é responsável por epidemias anuais com quadros clínicos que podem levar a morte. De janeiro a março de 2016, foram registrados 495.266 casos prováveis de dengue e 67 óbitos confirmados, além de 13.676 casos prováveis de febre chikungunya e dois óbitos confirmados de acordo com o Ministério da Saúde. Hoje o diagnóstico destas arboviroses são realizadas por sorologia (ELISA) e PCR. O teste sorológico de captura de IgG e IgM específicos aos vírus baseado em ELISA apresenta uma vantagem em relação à qPCR, uma vez que permite conhecer histórico de infecção natural (anterior) do paciente. Isso é fundamental no caso de ZIKV para prever a imunidade adquirida (soro-conversão) de pessoas pela infecção natural, sabendo que em torno de 80% da infecção por ZIKV é assintomática. A demanda de um teste sorológico para febre Zika é muito alta, por não existir um kit utilizável em larga escala. No Brasil, há uma dificuldade peculiar no desenvolvimento do kit sorológico para ZIKV, devido à presença de outros vírus que pertencem ao mesmo gênero (Flavivirus) da ZIKV, como DENV e o vírus da febre amarela (YFV). Boa parte da população brasileira é vacinada contra YFV, e, consequentemente, carregam os anticorpos do tipo IgG contra YFV. Sabe-se que há epitopos comuns entre os flavivírus. Neste contexto, o antígeno de ZIKV, material chave para o kit diagnóstico sorológico, não deve conter os epítopos comuns de YFV e DENV para evitar a ocorrência de reação cruzada com estes vírus. Nessa proposta, objetiva-se desenvolver os antígenos multiepítopos específicos para cada flavivírus (ZIKV e DENV) e CHIKV utilizando os sistemas de baculovírus e planta. Considerando a alta necessidade de insumos de qualidade, os sistemas de expressão heteróloga surgem a fim de fornecer em larga escala antígenos para o desenvolvimento dos métodos sorológicos. Adicionalmente, objetiva-se a produção de VLPs de ZIKV utilizando o sistema baculovírus e planta. Atualmente, como não se sabe a real associação entre ZIKV e microcefalia, o desenvolvimento de vacina de ZIKV com a estratégia de vírus atenuado representa um alto risco na aplicação em humanos. Portanto a estratégia de utilização de VLPs como vacina de ZIKV é altamente justificada. A parceria com a equipe da Fiocruz irá viabilizar a rápida produção em larga escala na unidade de Bio-Manuinhos/Fiocruz. Esse subprojeto tem como objetivo desenvolver antígenos específicos para DENV, CHIKV e ZIKV utilizando a estratégia de expressão de multiepítopos específicos e vírus-like particles (VLPs) em sistemas de expressão de proteína baseada em baculovírus.. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Leonardo Assis da Silva - Integrante / Bergmann Morais Ribeiro - Integrante / Tatsuya Nagata - Coordenador.

• 2016 - Atual

  Plataforma de expressão de proteínas em células de inseto e plantas, Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Leonardo Assis da Silva - Integrante / Bergmann Morais Ribeiro - Coordenador.

• 2015 - Atual

  Estratégias inovadoras para produção da glicoprotéina do vírus da raiva e análise do potencial para desenvolvimento de uma vacina animal, Descrição: A glicoproteína G do vírus da raiva (GPV), que se encontra na superfície do vírus é responsável pela indução de resposta imunológica protetora, sendo constituinte fundamental das vacinas anti-rábicas. O presente projeto tem como objetivo, a expressão da glicoproteína do vírus da Raiva, ou partes dela, em células de inseto usando baculovirus recombinantes. Em seguida, será realizada a análise do potencial dessas partículas ou antígenos virais recombinantes para o desenvolvimento de uma vacina animal. Para isso, o gene da prteína GPV, ou partes dele, serão fusionados ao gene da principal proteína do envelope (GP64) e ao gene da poliedrina do baculovirus (Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus, AcMNPV). O potencial imunogênico e antigênico das glicoproteínas será avaliado através da sua capacidade em ativar, in vitro, linfócitos B e induzir a produção de anticorpos específicos, bem como ativar linfócitos TCD4+ para a cooperação celular e aumento da produção de anticorpos neutralizantes. Os antígenos serão testadas in vivo, para avaliar o potencial de proteção em camundongos infectados experimentalmente com o vírus da raiva. Entre as células animais que têm sido usadas para expressão de protéinas hetrólogas em geral, encontramos as células de mamíferos, que embora tenham capacidade de incorporar, manter, expressar constitutivamente e processar convenientemente genes heterólogos, exigem condições de cultura delicadas e dispendiosas em laboratório. Células de insetos, como as células de Spodoptera frugiperda (Sf9) têm sido, pelas suas condições facilitadas de cultura, largamente usadas para expressão de genes transportados por baculovírus. Desta forma, nesse projeto, pretendemos obter antígenos recombinantes capazes de induzir uma resposta protetora em camundongos contra o vírus da Raiva, visando o desenvolvimento de uma vacina eficiente para uso animal... , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Doutorado: (1) . , Integrantes: Leonardo Assis da Silva - Integrante / Bergmann Morais Ribeiro - Coordenador / Anamélia Lorenzetti Bocca - Integrante.

Prêmios