Maristela de Freitas Sanches Peres

Pós-doutorado

Formação complementar

Idiomas

Áreas de atuação

Participação em eventos

Participação em bancas

Orientou

Produções bibliográficas

• GATTAS, E. A. L. ; RIBEIRO, M. H. L. ; PERES, MFS. . Improvement of the alcohol dehydrogenase from baker's yeast using polymers and salts for alcohol determinations in beverages. International Journal of Food, Agriculture and Environment (Print) , v. 12, p. 80-83, 2014.

• GATTAS, E. A. L. ; PERES, MFS. . Use of different carbon sources in the cultivation of baker's yeast for production of glycerol-3-phosphate dehydrogenase. International Journal of Food, Agriculture and Environment (Print) , v. 11, p. 246-249, 2013.

• PERES, MFS. ; SILVA, Viviane Cristina ; VALENTINI, S. R. ; GATTAS, E. A. L. . Recombinant expression of glycerol-3-phosphate dehydrogenase using the Pichia pastoris system. Journal of Molecular Catalysis. B, Enzymatic (Print) , v. 65, p. 128-132, 2010.

• SILVA, Viviane Cristina ; PERES, M. F. S. ; GATTÁS, E. A. L . Application of methylotropic yeasts Pichia pastoris in the field of foodindustry. International Journal of Food, Agriculture and Environment (Online) , v. 7, p. 268-273, 2009.

• PERES, MFS. ; LALUCE, Cecilia ; GATTAS, E. A. L. . Colorimetric enzymatic assay of l-malic acid using dehydrogenase from baker´s yeast. Food Technology and Biotechnology , v. 46, p. 227-231, 2008.

• CAMARGO, L. A. ; RIBEIRO, M. H. L. ; PERES, MFS. ; GATTAS, E. A. L. . Kinetic properties of glycerophosphate oxidase isolated from dry baker's yeast. Journal of Molecular Catalysis. B, Enzymatic , v. 52-53, p. 140-145, 2008.

• ARAGON, Caio Casale ; FEREIRA-DIAS, S. ; GATTAS, E. A. L. ; PERES, MFS. . Characterization of glycerol kinase from baker's yeast: Response surface modeling of the enzymatic reaction. Journal of Molecular Catalysis. B, Enzymatic , v. 52-53, p. 113-120, 2008.

• ZANON, J. P ; PERES, MFS. ; GATTÁS, E. A. L . Colorimetric assay of ethanol using alcohol dehydrogenase from dry baker's yeast. Enzyme and Microbial Technology , submetido, v. 40, p. 466-470, 2007.

• CAMARGO, L. A. ; PERES, MFS. ; GATTAS, E. A. L. . Oxidoreductase for bioanalysis and food controls. Alimentos e Nutrição (UNESP) , v. 18, p. 101-109, 2007.

• PERES, MFS. ; SOUZA, Crisla Serra ; T, Daniel ; SOUZA, Adalto Ricardo de ; LALUCE, Cecilia . Partitioning of the glucoamylase activity at the cell surfaces in cultures of Saccharomyces. Process Biochemistry , v. 41, p. 20-27, 2006.

• GATTAS, E. A. L. ; PERES, MFS. . Aspectos toxicológicos do bissulfito e outros agentes tóxicos sobre a síntese de glicerol-3-fosfato desidrogenase citoplasmática de levedura de panificação. Revista de Ciências Farmacêuticas Básica e Aplicada , v. 27, p. 145-150, 2006.

• PERES, MFS. ; T, C. R. S. ; SOUZA, Crisla Serra ; WALKER, G M ; LALUCE, Cecilia . Physiological responses of the pressed baker's yeast cells pre-treated with citric, malic and succinic acids.. World Journal of Microbiology and Biotechnology , v. 21, p. 537-543, 2005.

• BUENO, M.C ; PERES, MFS. ; GATTAS, E. A. L. . Produção de poligalacturonase por três linhagens de Aspergillus isolados do solo. Alimentos e Nutrição (UNESP) , in press, v. 16, p. 253-257, 2005.

• GATTAS, E. A. L. ; PERES, MFS. . Produção de glicerol-3-fosfato desidrogenase de levedura de panificação. Alimentos e Nutrição (UNESP) , Araraquara, v. 14, n.2, p. 205-209, 2003.

• PERES, MFS. ; LALUCE, Cecilia . Ethanol Tolerance of thermotolerant Yeats Cultiveted on Mixtures of Sucrose and Ethanol. Journal Fermentation Bioengineering, Japão, v. 85, p. 388-397, 1998.

• LALUCE, Cecilia ; ABUD, C. L. ; GREENHALF, W. ; PERES, MFS. . Thermotolerance behavior in sugar cane syrup fermentations of wild type yeast strains selected under pressures of temperature, high sugar and added ethanol.. Biotechnology Letters , v. 15, p. 609-614, 1993.

• PERES, MFS. ; SOUSA, Sandro Rogério de ; LALUCE, Cecilia . Obtaining strains of Saccharomyces tolerante of high temperatures and ethanol. In: J F T Spencer; A L Ragout de Spencer. (Org.). Methods in Biotechnology: Food Microbiology Protocols. Totowa: Humana Press, 2001, v. 14, p. 355-367.

• SOUSA, Sandro Rogério de ; PERES, MFS. ; LALUCE, Cecilia . Flotation assay in small volumes of yeast cultures. In: J F T Spencer; A L Ragout de Spencer. (Org.). Methods in Biotechnology: Food Microbiology Protocols. Totowa: Humana Press, 2001, v. 14, p. 349-353.

• SILVA, Viviane Cristina ; PERES, MFS. ; GATTÁS, E. A. L . Otimização das condições de expressão da glicerol 3-fosfato desidrogenase (GPDH) em Pichia pastoris. In: VIII Seminário Brasileiro de Tecnologia Enzimática, 2008, Rio de Janeiro. Enzitec 2008, 2008.

• SOTTO, A. S. ; GATTÁS, E. A. L ; PERES, MFS. . Produção de glicerol-3-fosfato desidrogenase a partir de levedura geneticamente modificada. In: XIX Congresso de Iniciação Científica da UNESP, 2007, Botucatu. Anais do gongresso, 2007.

• PERES, MFS. ; ZANON, J. P ; GATTAS, E. A. L. . Colorimetric assays of the alcohol dehydrogenase from dry baker´s yeast: determination of ethanol in alcoholic beverages. In: International Conference on Enzyme Technology, 2005, Varadero. International Conference on Enzyme Technology, 2005.

• PERES, MFS. ; LALUCE, Cecilia . Tolerancia de leveduras ao etanol adicionado ao meio e ao etanol produzido. In: V Workshop da Pós-Graduação, 1996, São Carlos. Composição Química e Reatividade, 1996.

• PERES, MFS. ; ZANON, J. P ; GATTÁS, E. A. L . Determination of ethanol in alcoholic beverages using alcohol dehydrogenase partially purified. In: 7th European Congress on Biochemical Engineering, ESBES 7, 2008, Faro. Book of abstract, 2008.

• GATTÁS, E. A. L ; BUENO, M.C ; RIBEIRO, M. H. L. ; PERES, MFS. . Enhanced polygalacturonase production by immobilized Aspergillus sp. In: 7th European Congress on Biochemical Engineering, ESBES 7, 2008, Faro. Book of abastract, 2008. p. 240-240.

• NIGOGHOSSIAN, K. ; PERES, MFS. ; PRIMO, F. ; TEDESCO, A. C. ; MESSADEQ, Y. ; RIBEIRO, S. J. L. . Upconversion in Biocellulose-YVO4 Composites for Biological Applications. In: 96h Canadian Chemistry Conference and Exhibition, 2013, Quebec. 96h Canadian Chemistry Conference and Exhibition, 2013.

• NIGOGHOSSIAN, K. ; PERES, MFS. ; PRIMO, F. ; TEDESCO, A. C. ; MESSADEQ, Y. ; RIBEIRO, S. J. L. . Cellulose membranes containing upconverting nanoparticles. In: I Brazilian Winter School Biophotonics, 2012, São José dos Campos. I Brazilian Winter School Biophotonics, 2012.

• NIGOGHOSSIAN, K. ; PERES, MFS. ; TEDESCO, A. C. ; MESSADEQ, Y. ; RIBEIRO, S. J. L. . Conversão ascendente de energia em compósitos biocelulose-YVO4:Yb:Er. In: 5 Encontro Nacional sobre Terras Raras, 2012, João Pessoa. 5 Encontro Nacional sobre Terras Raras, 2012.

• PERES, MFS. ; ZANON, J. P. ; GATTÁS, E. A. L . Optimization of alcohol dehydrogenase activity from dry baker s yeast for determination of ethanol in alcoholic beverages. In: 9th International Symposium on Biocatalysis and Biotransformations, Biotrans 2009, 2009, Bern. Book of Abstract, 2009.

• GATTÁS, E. A. L ; SILVA, Viviane Cristina ; VALENTINI, S. R. ; PERES, MFS. . Determination of glycerol using glycerol kinase and glycerol-3-phosphate dehydrogenase expressed in Pichia pastoris. In: 9th International Symposium on Biocatalysis and Biotransformations, Biotrans 2009, 2009, Bern. Book of abstract, 2009.

• ARAGON, Caio Casale ; CAMARGO, L. A. ; GATTAS, E. A. L. ; PERES, MFS. . Colorimetric Assay of glycerol kinase from basker´s yeast. In: XXXVI Annual meeting of the Brazilian society for Biotechemistry and Molecular Biology and 10 th International Union of Biochemistry and Molecular Biology (IUBMB) Conference Infectious Diseases: Biochemistry of Parasites, Vectors and Hosts, 2007, Salvador. XXXVI Annual meeting of the Brazilian for Biochemistry and Molecular Biology, 2007.

• SILVA, Viviane Cristina ; APPONI, L. H. ; PERES, MFS. ; VALENTINI, S. R. ; GATTAS, E. A. L. . Induction of the expression of glycerol 3-phosphate dehydrogenase in Pichia pastoris. In: XXXVI Annual meeting of the Brazilian society for Biotechemistry and Molecular Biology and 10 th International Union of Biochemistry and Molecular Biology (IUBMB) Conference Infectious Diseases: Biochemistry of Parasites, Vectors and Hosts, 2007. XXXVI Annual Meeting of the Brazilian Society for Biochemistry and Molecular Biology, 2007.

• ARAGON, Caio Casale ; CAMARGO, L. A. ; GATTAS, E. A. L. ; PERES, MFS. . Characterization of glycerol kinase from baker´s yeast. In: 8 th International Symposium on Biocatalysis and Biotransformations, 2007. 8 th Internationa Symposium on Biocatalysis and Biotransformation, 2007.

• CAMARGO, L. A. ; XIMENES, V. F. ; PERES, MFS. ; GATTAS, E. A. L. . Glycerolphosphate oxidase from baker´s yeast. In: 8 th International Symposium on Biocatalysis and Biotransformations, 2007. 8 th International Symposium on Biocatalysis and Biotransformations, 2007.

• PERES, MFS. ; GATTÁS, E. A. L . Enzymatic assay of L-malic using dehydrogenase from baker´s yeast. In: 2nd International Congress on Bioprocesses in Food Industries, 2006, Rio-Patras. 2nd International Congress on Bioprocesses in Food Industries. Rio-Patras: ICBF-2006, 2006. v. 1. p. 157-157.

• CAMARGO, L. A. ; PERES, MFS. ; GATTÁS, E. A. L . Cheap method for determination of glycerol 3-phosphate oxidase from baker´s yeast. In: XXXV Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Bioquímica e Biologia Molecular, 2006, Águas de Lindóia. XXXV Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Bioquímica e Biologia Molecular. Águas de Lindóia: XXXV Reunião Anual da SBBq, 2006. v. 1. p. 9527-9527.

• ZANON, J. P. ; PERES, MFS. ; GATTÁS, E. A. L . Colorimetric assay of ethanol using alcohol dehydrogenase from dry baker´s yeast. In: VI Brazilian Meeting on Chemistry of Food and Beverages, 2006, São José do Rio Preto. VI Brazilian Meeting on Chemistry of Food and Beverages. São José do Rio Preto: VI BMCFB, 2006. v. 1. p. 1-1.

• T, C. R. S. ; PERES, MFS. ; SOUZA, P. A. P. ; LALUCE, Cecilia . Weak organic acids as preservatives for compressed baker´s yeast. In: 5th International Symposium on the Production of Alcohol and Yeasts, 2005, Campos do Jordão. 5th International Symposium on the Production of Alcohol and Yeasts, 2005.

• PERES, MFS. ; ZANON, J. P ; GATTAS, E. A. L. . Colorimetric assays of the alcohol dehydrogenase from dry baker´s yeast: ethanol determination in wines.. In: XXXIV Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Bioquímica e Biologia Molecular, 2005, Águas de Lindóia. XXXIV Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Bioquímica e Biologia Molecular, 2005.

• CAMARGO, L. A. ; PERES, MFS. ; GATTAS, E. A. L. . Glicerol 3-fosfato oxidase extraída de fermento de panificação. In: 6 Simpósio Latino Americano de Ciência de Alimentos: Abrindo Caminhos para o Desenvolvimento Científico, Tecnológico e Industrial, 2005, Campinas. 6 Simpósio Latino Americano de Ciência de Alimentos: Abrindo Caminhos para o Desenvolvimento Científico, Tecnológico e Industrial, 2005.

• ZANON, J. P ; PERES, MFS. ; GATTAS, E. A. L. . Estabilidade da enzima álcool desidrogenase extraída de fermento de panificação. In: 6 Simpósio Latino Americano de Ciência de Alimentos: Abrindo Caminhos para o Desenvolvimento Científico, Tecnológico e Industrial, 2005. 6 Simpósio Latino Americano de Ciência de Alimentos: Abrindo Caminhos para o Desenvolvimento Científico, Tecnológico e Industrial, 2005.

• T, C. R. S. ; SOUZA, P. A. P. ; PERES, MFS. ; LALUCE, Cecilia . Correlations between values of extracellular pH and physiological parameters of pressed baker´s yeast stored in the refrigerator. In: 5 Simpósio Latino Americano de Ciência de Alimentos, 2003. 5 Simpósio Latino Americano de Ciência de Alimentos. Campinas, 2003. v. 1.

• PERES, MFS. ; WALKER, G M ; LALUCE, Cecilia . Physiological responses of baker's yeast to citric and dicarboxylic acids. In: XXXI Reunião anual da sociedade brasileira de bioquímica e biologia molecular, 2002, Caxambu - MG. Programas e Resumos da XXXI Reunião anual, 2002.

• PERES, MFS. ; BELLIN, I. C. ; LALUCE, Cecilia . Physiological responses during storage of baker's yeast. In: XXIX Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Bioquímica e Biologia Molecular, 2000, Caxambú. XXIX Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Bioquímica e Biologia Molecular, 2000.

• PERES, MFS. ; LALUCE, Cecilia . Alterations in the metabolic state of baker's yeast cells during storage in the presence of anions of weak organic acids. In: Tenth International Symposium on Yeasts, 2000, 2000.

• PERES, MFS. ; BELLIN, I. C. ; LALUCE, Cecilia . Improvement of baker's yeast performance using glycerol and organic acids. In: XXVIII Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Bioquímica e Biologia Molecular, 1999, Caxambú, 1999.

• PERES, MFS. ; LALUCE, Cecilia . Tolerance to ethanol of thermotolent yeasts cultured on mixtures od sucrose and ethanol. In: XXVII Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Bioquímica e Biologia Molecular, 1998, Caxambú, 1998.

• ABUD, C. L. ; PERES, MFS. ; GATTAS, E. A. L. ; LALUCE, Cecilia . Variability of a yeast cell population during fermentation at high temperatures. In: XXIV Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Bioquímica e Biologia Molecular, 1996, Caxambú, 1996. p. 51.

• PERES, MFS. ; LALUCE, Cecilia . Methods for determination of alcohol tolerance in wild yeasts strains tolerants to ethanol, temperature, and high sugar concentration: a comparative approach. In: XXIII Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Bioquímica e Biologia Molecular, 1994, Caxambú, 1994.

• ABUD, C. L. ; PERES, MFS. ; GREENHALF, W. ; LALUCE, Cecilia . The use of a temperature gradostat for selection of thermotolerant strains and analysis os strains at high temperature. In: XXII Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Bioquímica e Biologia Molecular, 1993, Caxambú, 1993.

• PERES, MFS. ; GATTAS, E. A. L. ; ABUD, C. L. ; LALUCE, Cecilia . Métodos para determinação de álcool-tolerância de altas concentrações de açúcares- Uma abordagem comparativa. In: XVII Congresso Brasileiro de Microbiologia, 1993, Santos, 1993.

• PERES, MFS. ; PECORARO, E. ; GREENHALF, W. ; LALUCE, Cecilia . Termotolerance study in terms of stability of yeasts grown in sucessive fermentations at 40 C. In: XXI Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Bioquímica e Biologia Molecular, 1992, Caxambú, 1992. p. 396.

• PERES, MFS. ; CRUZ, R. C. L. ; PALMIERI, M. C. ; LALUCE, Cecilia . Improvement of growth and ethanol production at 40 C by addition of complex nutritional sources to the sugarcane syrup. In: XX Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Bioquímica e Biologia Molecular, 1991, Caxambú, 1991. p. 225.

• PERES, MFS. ; CRUZ, R. C. L. ; GREENHALF, W. ; LALUCE, Cecilia . Starch and dextrin fermentation by isolated and improved strains of amylolytic yeast. In: XX Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Bioquímica e Biologia Molecular, 1991, Caxambú, 1991. p. 210.

• DELPHINO, E. ; PALMIERI, M. C. ; PERES, MFS. ; CRUZ, R. C. L. ; LALUCE, Cecilia . Estabilidade genética de linhagens termotolerantes de Saccharomyces cerevisiae em função da temperatura. In: XXXVIII Jornada Farmacêutica da UNESP, 1990, Araraquara. Revista Científica Farmacêutica, 1990. v. 12. p. 227.

• PALMIERI, M. C. ; PERES, MFS. ; CRUZ, R. C. L. ; LALUCE, Cecilia . Melhoramento Genético de Linhagens Termotolerantes Isoladas e Indução de Marca Genética. In: XXXVIII Jornada Farmacêutica da UNESP, 1990, Araraquara. Revista Científica Farmacêutica, 1990. v. 12. p. 226.

• PALMIERI, M. C. ; CRUZ, R. C. L. ; PERES, MFS. ; LALUCE, Cecilia . Efeito da adição de nitrogênio e fosfato inorgânico no crescimento de Saccharomyces cerevisiae a 40 C em xarope, melaço e HTM.. In: XXXVIII Jornada Farmacêutica da UNESP, 1990, Araraquara. Revista Científica Farmacêutica, 1990. v. 12. p. 271.

• YAMANAKA, H. ; PERES, MFS. ; LALUCE, Cecilia . Dosagem de ácido málico em suco de laranja empregando enzima de origem microbiana. In: 13 Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Química, 1990, Caxambú. 13 Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Química, 1990. p. QA-17.

• DELPHINO, E. ; PALMIERI, M. C. ; CRUZ, R. C. L. ; PERES, MFS. ; LALUCE, Cecilia . Efeito da Suplementação nutricional com fosfato e nitrogênio inorgãnico no crescimento de leveduras a 40C. In: II Congresso de Iniciação Científica da UNESP, 1990, Botucatu. II Congresso de Iniciação Científica. Botucatu, 1990. v. 1. p. CB -89.

• DELPHINO, E. ; CRUZ, R. C. L. ; PERES, MFS. ; PALMIERI, M. C. . Estabilidade genética em função da temperatura de linhagens termotoloerantes de Saccharomyces cerevisiae. In: II Congresso de Iniciação Científica da UNESP, 1990, Botucatu. II Congresso de Iniciação Científica da UNESP. Botucatu, 1990. v. 1. p. CB-88.

• CRUZ, R. C. L. ; PERES, MFS. ; PALMIERI, M. C. ; LALUCE, Cecilia . Melhoramento genético da termotoloerância de leveduras para a produção de etanol combustível. In: II Congresso de Iniciação Científica da UNESP, 1990, Botucatu. II Congresso de Iniciação Científica da UNESP. Botucatu, 1990. v. 1. p. CB-110.

• PERES, MFS. ; ZANON, J. P. ; GATTÁS, E. A. L . Optimization of alcohol dehydrogenase activity from dry baker s yeast for determination of ethanol in alcoholic beverages. 2009. (Apresentação de Trabalho/Seminário).

• GATTAS, E. A. L. ; SILVA, Viviane Cristina ; VALENTINI, S. R. ; PERES, MFS. . Determination of glycerol using glycerol kinase and glycerol-3-phosphate dehydrogenase expressed in Pichia pastoris.. 2009. (Apresentação de Trabalho/Seminário).

• PERES, MFS. ; LALUCE, Cecilia . Tolerancia de leveduras ao etanol adicionado ao meio e ao etanol produzido. 1996. (Apresentação de Trabalho/Simpósio).

Outras produções

Projetos de pesquisa

• 2011 - 2013

  Membranas de celulose contendo nanopartículas para conversão ascendente de energia. Fundamentos e aplicações, Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) . , Integrantes: Maristela de Freitas Sanches Peres - Integrante / Sidney José de Lima Ribeiro - Integrante / Antônio Cláudio Tedesco - Coordenador / Karina Nigoghossian - Integrante.

• 2010 - 2011

  Produção de celulose bacteriana, Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Maristela de Freitas Sanches Peres - Integrante / Sidney José de Lima Ribeiro - Coordenador., Financiador(es): Vicunha Textil - Matriz - Bolsa.

• 2006 - 2009

  Indução da expressão recombinante da glicerol-3-fosfato desidrogenase em Pichia pastoris, Descrição: O gene GPD2 de Saccharomyces cerevisiae, que codifica a enzima glicerol-3-fosfato desidrogenase (G3PDH; EC 1.1.1.8; NAD+: oxidoredutase) foi clonado na levedura Pichia pastoris para expressar extracelularmente a enzima em meio de cultura. Essa enzima apresenta aplicação prática em diversos sistemas acoplados para determinação quantitativa de triacilglicerol, glicerol, ácido fosfatídico e outros fosfolipidios também podendo ser usada para medir atividades enzimáticas em diversos tipos de amostras. Para que a atividade extracelular fosse suficiente em ensaios industriais e biológicos, um estudo de indução da expressão da enzima foi realizado no presente trabalho, que consistiu em escolher o clone que melhor secreta a enzima e estudar o meio de crescimento (BMGY), a densidade inicial celular (0,05 mg/mL), o meio de indução enzimática (BMMY), a natureza do tampão (tampão fosfato), o pH (6,0), o tempo de produção da proteína (4 dias), a concentração da enzima através de membrana filtrante (120 vezes), a melhor fonte de peptona (Acumédia), o estudo de pré-indução celular por estresse osmótico (atividade de 0,477 0,0 U/mL em 24 horas com NaCl 0,35M). O processo de produção da G3PDH mostrou que a máxima produtividade enzimática (795 U/mL e atividade específica de 44,49 U/mg) e biomassa final de 17,75 mg/mL foi obtida com as seguintes condições experimentais: 48 horas de indução com meio BMMY, utilizando 1% de metanol, 1% de glicerol, densidade inicial celular de 0,05 mg/mL, pH 5,0 e sobrenadante concentrado 120 vezes em membrana filtrante.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (1) / Mestrado acadêmico: (1) . , Integrantes: Maristela de Freitas Sanches Peres - Coordenador / Edwil Aparecida de Luca Gattás - Integrante / Viviane Cristina Silva - Integrante., Número de produções C, T & A: 2 / Número de orientações: 1

• 2006 - 2008

  Glicerol kinase de levedura de panificação, Descrição: No presente trabalho, a atividade da enzima glicerol quinase (GK; EC 2.7.1.30; ATP: glicerol 3-fosfotransferase), proveniente de extratos de levedura seca de panificação, foi otimizada. A melhor preparação enzimática da GK foi obtida por rompimento celular com esferas de vidro, durante sete minutos, com lise de 54,2% das células. O extrato celular foi parcialmente purificado com 1% de sulfato de estreptomicina, antes da precipitação com igual volume de solução a 30% (m/v) de polietilenoglicol 3350, e posteriormente dialisado. A atividade máxima da GK foi obtida em pH 10,0, a 60ºC e 50mM de substrato, por metodologia clássica. A enzima apresentou alta estabilidade térmica ― a atividade foi completamente mantida até 50ºC, durante uma hora ― e em pH entre 6,0 e 8,0. Além disso, manteve-se estável, por quatro meses, a 4 C, na presença de azida de sódio 0,05% e cloreto de cobalto 10mM, e, por até oito meses, com o extrato liofilizado. Calculados pelos métodos de Lineweaver-Burk, Hanes-Woolf e Eadie-Hofstee, o valor da constante de Michaelis (Km) da enzima variou entre 1,99mM e 3,11mM, e a Vmax, entre 1,14U/mL e 1,19U/mL. Utilizou-se a metodologia de superfície de resposta (MSR) para melhor definição dos parâmetros da reação enzimática, observando-se valores ótimos de atividades a temperaturas entre 52ºC e 56ºC, pH entre 10,2 e 10,5 e concentração de substrato de 150mM a 170mM. A MSR mostrou-se adequada para modelar a reação e maximizar a atividade da glicerol quinase. Este método, de baixo custo, dosa a glicerol quinase em uma seqüência de reações, sendo de grande importância para diversas indústrias, como a de alimentos, açúcar e álcool.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) . , Integrantes: Maristela de Freitas Sanches Peres - Coordenador / Edwil Aparecida de Luca Gattás - Integrante / Caio Casale Aragon - Integrante., Financiador(es): Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - Bolsa., Número de produções C, T & A: 4 / Número de orientações: 1

• 2005 - 2007

  Glicerol-3fosfato oxidase de levedura de panificação, Descrição: O presente trabalho descreve uma metodologia de otimização, purificação e caracterização da enzima glicerol-3-fosfato oxidase (sn-glicerol-3-fosfato: oxigênio 2-oxidorredutase, EC 1.1.3.21, GPO) obtida a partir de fermento de panificação seco instantâneo Fleischmann (Produtos Alimentícios Fleischmann e Royal S/A.), adquirido no comércio. A GPO é uma flavoproteína responsável pela oxidação do glicerol-3-fosfato a fosfato de diidroxiacetona, mediante a redução do oxigênio a peróxido de hidrogênio. Duas metodologias de identificação e dosagem da enzima foram utilizadas: a) Método polarográfico: medida de oxigênio consumido pela reação através de Oxígrafo. b) Método espectrofotométrico: acoplamento da reação da GPO àquela catalisada pela peroxidase (doador: peróxido de hidrogênio oxidorredutase, EC 1.11.1.17, PO) através de espectrofotômetro com leituras a 470 nm. A metodologia empregada neste trabalho permitiu obter GPO a partir de fermento de panificação por rompimento celular com esferas de vidro, seguida de precipitação com acetona e diálise (purificação parcial). Foi possível também caracterizar sua dosagem enzimática, por 2 horas em banho-maria a 60O C (temperatura de ativação e de estabilidade desta enzima), em ensaio contendo: glicerol-3-fosfato 0,45M em tampão Tris-HCl 0,1M pH 8,0 contendo 0,1% Triton X-100, guaiacol 72,4 mM; 4,0 U/mL de PO e água destilada para completar o volume de ensaio. A reação é iniciada pela adição de 0,015 μL de extrato enzimático contendo GPO, diluído 10 vezes. Após 2 horas, a reação é paralisada pela adição de SDS 10% e é feita leitura em espectrofotômetro. Tal método permitiu quantificar 0,1M - 0,45M de glicerol-3-fosfato, importante composto intermediário do metabolismo de biossíntese lipídica e glicólise. . , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) . , Integrantes: Maristela de Freitas Sanches Peres - Integrante / Edwil Aparecida de Luca Gattás - Coordenador / Luciana Amade Camargo - Integrante., Financiador(es): Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 5 / Número de orientações: 1

• 2004 - 2008

  Implantação de um laboratório para ensaio de glicerol, etanol e malato: adaptação a uma rotina industrial e novos ensaios., Descrição: As enzimas (glicerol-3-fosfato desidrogenase, EC 1.1.1.8; glicerol kinase ou gliceroquinase, EC 2.7.1.30; glicerol-3- fosfato oxidase, EC 1.1.3.21; álcool desidrogenase, EC 1.1.1.1.; malato desidrogenase, EC 1.1.1.37) de interesse industrial utilizada em dosagens de glicerol, etanol e malato e obtidas de extrato de levedura comercial foram caracterizadas e suas atividades otimizadas, utilizando metodologia de superfície de resposta (MSR), como função da temperatura de reação, concentração do substrato e pH. Intensificação de fracionamento salino, adição de cisteína durante o rompimento celular e aplicação em colunas de cromatografia de filtração em gel (Sephadex G-100) e de troca iônica (UNOsphere Q Support BIO-RAD) foram propostas do presente trabalho como tentativas de purificações do extrato bruto enzimático, além da padronização do ensaio da dosagem de ácido málico, glicerol e álcool etílico para determinação colorimétrica. Leveduras recombinante de expressão extracelular dos genes das desidrogenases (glicerol-3-fosfato desidrogenase, álcool desidrogenase) e glicerol quinase e estudos sobre a indução na síntese destas enzimas, através do crescimento de levedura recombinante foram obtidos e realizados no presente trabalho. . , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Maristela de Freitas Sanches Peres - Coordenador.

• 2004 - 2006

  Dosagem de etanol utilizando alcool desidrogenase de levedura de panificação, Descrição: O presente trabalho descreve e compara duas metodologias enzimáticas de dosagem de etanol (método UV e colorimétrico), que utilizam desidrogenase alcoólica (álcool: NAD+: oxidoredutase EC 1.1.1.1) de fermento de panificação (Mauri Brasil Ind. Com. e Imp. Ltda), adquirida no comercio na forma seca. A atividade da álcool desidrogenase (ADH) presente no extrato bruto de levedura de panificação, da ordem de 7,8 U/mL, foi utilizada nos ensaios colorímetricos, enquanto que, nos ensaios no ultravioleta (UV), atividades ao redor de 30 U/mL foi obtida através da otimização das condições de extração e purificação parcial da ADH. A estabilidade da atividade da ADH foi mantida durante 2 meses na forma liofilizada a 4ºC (retenção de 96,2% de sua atividade), na presença de 1 mM de azida de sódio. A mesma preparação enzimática reconstituída em PEG 15% e armazenada durante 12 meses em freezer (-18ºC), apresentou retenção de 50% de sua atividade até 2 meses. O método ultravioleta de dosagem de etanol (detecção na faixa de 2,3 x 10 4 g/L a 6,91 x 10-3 g/L ou 5 M a 150 M) se baseia na conversão enzimática do etanol a acetaldeído, através de reação de óxido-redução, tendo o NAD+ como aceptor de elétrons, e o NADH formado pela reação é quantificado com leituras espectrofotométricas a 340 nm, conforme descrito por GATTÁS (2002). Uma preparação enzimática parcialmente purificada e diluída foi utilizada na quantificação de etanol em diferentes bebidas, mostrando desvios dos teores alcoólicos de no máximo 2,1% quando comparados com as especificações do produtor. O ensaio de etanol em vinho foi realizado com uma recuperação da ordem de 99,25% em amostra contendo 249,65  0,2 g/l de etanol originalmente. O método colorimétrico de dosagem de etanol (detecção na faixa de 4,6 x 10-2 g/L a 23,0 x 10-2 g/L ou 1000 M a 5000 M) utiliza o sistema de reagentes de cor MTT/PMS dissolvidos em tampão fosfato salino (PBS), com leituras espectrofotométricas a 57. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) . , Integrantes: Maristela de Freitas Sanches Peres - Integrante / Edwil Aparecida de Luca Gattás - Coordenador / Juliana Pereira Zanon - Integrante., Financiador(es): Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - Auxílio financeiro., Número de produções C, T & A: 7 / Número de orientações: 1

• 1996 - 2001

  Caracterização fisiológica e estabilidade da levedura de panificação prensada e armazenada após a lavagem com soluções de ácidos orgânicos fracos., Descrição: Os ácidos orgânicos fracos são usualmente utilizados como preservativos de alimentos. O fermento comercial de panificação foi lavado com soluções de ácido cítrico, ácidos dicarboxílicos, monocarboxílicos na faixa de pH de 2,5 - 7,5 e glicerol (estabilizante osmótico) e armazenado em estufa a 30C na presença de antibióticos. Os ácidos monocarboxílicos foram utilizados em concentrações baixas (MIC, concentrações inibitórias mínimas) que são bastante conhecidas como inibitórias ao crescimento microbiano. A atividade fermentativa aumentou com a elevação do pH, em todos os casos, na presença dos ácidos orgânicos fracos. No entanto, estes aumentos foram menores em presença de ácidos monocarboxílicos. A atividade fermentativa, obtida em presença de íons cítricos, foi maior que em presença de glicerol tanto a pH 4,5 quanto a pH 7,5. Os aumentos em atividade maltásica acompanharam (não diretamente proporcional) os aumentos em atividade fermentativa. Os aumentos em nível de maltase foram maiores em presença de íons acético e succínico tanto a pH ácido quanto a pH 7,5. Perdas dramáticas em nível de trealose foram observadas durante a estocagem em todos os casos. A trealose foi rapidamente mobilizada e pareceu apresentar pouco efeito protetor sobre a levedura durante a estocagem. A viabilidade celular não variou (100%) após a lavagem do fermento com a adição dos ácidos, independentemente do pH ensaiado. Correlações não foram observadas entre viabilidade, níveis de trealose e atividade fermentativa. Aumentos em atividade fermentativa, seguidos por perdas em viabilidade, ocorreram com o aumento do pH em presença de ácido ascórbico. Atividades fermentativas altas foram observadas em presença de malato e succinato de sódio, apesar das viabilidades baixas observadas após 3 dias de estocagem do fermento. Por outro lado, poucas variações em níveis de viabilidade ocorreram em presença de ácido láctico na faixa de pH 2,5-7,5, apesar das variações em atividade fermentativ. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Doutorado: (1) . , Integrantes: Maristela de Freitas Sanches Peres - Integrante / Cecilia Laluce - Coordenador., Financiador(es): Conselho de Aperfeiçoamentode Pesquisa de São Paulo - Bolsa., Número de produções C, T & A: 9

• 1992 - 1996

  Efeito do etanol adicionado ao meio sobre a tolerância ao etanol em linhagens de leveduras tropicais., Descrição: Células de leveduras ficam expostas ao etanol externo em concentração constante durante os processos contínuos enquanto que em processos de batelada, os níveis de etanol externo aumentam continuamente. Considerando essa observação, as nossas linhagens foram comparadas utilizando-se um meio rico (redução dos efeitos de deficiências nutricionais) contendo alta concentração de açúcar (19% de sacarose) e altas quantidades de etanol adicionado para serem avaliadas em relação a ambos os efeitos, ou seja, níveis altos de etanol adicionado e produzido. As nossas linhagens álcool-tolerantes foram capazes de crescer e produzir etanol na presença de 8% (v/v) de etanol adicionado em culturas de baixa densidade de células, apresentando viabilidades altas (90-70%) no inicio da fase estacionária de produção de etanol com acúmulo de níveis altos de etanol final no meio (18-20%, v/v) em 6-7 dias. A utilização de um único critério para medida de tolerância ao etanol baseado em crescimento, capacidade fermentativa ou viabilidade pode levar a resultados irreais. Concentrações altas de etanol adicionado (6-7%) reduziram a velocidade de fermentação e como conseqüência a perda de viabilidade tornou-se menor que em concentrações baixas de etanol adicionado (2-4%). Além disto, os efeitos do etanol produzido e adicionado (7%) sobre os níveis de trealose e níveis intracelulares de glicerol-3-fosfato desidrogenase foram estudados com os seguintes resultados: a) níveis de trealose aumentaram em todos os casos, mas os aumentos relativos (com/sem etanol adicionado) nem sempre foram indicativos de linhagens tolerantes ao etanol; b) a atividade da glicerol-3-fosfato desidrogenase aumentou mostrando níveis altos em geral para as linhagens menos tolerantes. . , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (1) . , Integrantes: Maristela de Freitas Sanches Peres - Integrante / Cecilia Laluce - Coordenador., Financiador(es): Conselho Nacional de Pesquisa - Bolsa., Número de produções C, T & A: 11

• 1990 - 1992

  Seleção de um vetor apropriado a clonagem gênica em linhagens selvagens da Saccharomyces cerevisiae, Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Integrantes: Maristela de Freitas Sanches Peres - Integrante / Cecilia Laluce - Coordenador / Willian Greenhalf - Integrante., Financiador(es): Fundação Banco do Brasil - Bolsa., Número de produções C, T & A: 14

• 1990 - 1992

  Melhoramento genético de leveduras para a fermentação de sacarose a temperaturas elevadas ., Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (1) . , Integrantes: Maristela de Freitas Sanches Peres - Integrante / Cecilia Laluce - Coordenador., Financiador(es): Fundação Banco do Brasil - Bolsa., Número de produções C, T & A: 14

• 1988 - 1989

  Método enzimático de dosagem de ácido málico, Descrição: Através do meio de cultura obteve-se a malato desidrogenase (MDH) a partir do Streptomyces aureofaciens onde o microrganismo foi fermentado e a enzima foi extraída e estocada. Através de estudos espectrofotométricos foram realizados estudos para definir as melhores condições experimentais para a dosagem do ácido málico em termos de pH do meio de reação através da adição de hidrazina, variação da quantidade de enzima e da concentração do substrato. Foram realizados também alguns estudos visando à imobilização da malato desidrogenase em alginato de sódio.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (1) . , Integrantes: Maristela de Freitas Sanches Peres - Integrante / Hideko Yamanaka - Coordenador., Número de produções C, T & A: 1