Romulo Silva de Oliveira

Formação complementar

Idiomas

Áreas de atuação

Organização de eventos

Participação em eventos

Produções bibliográficas

• OLIVEIRA, R. S. ; CUNHA, R. C. ; MORAIS-FILHO, J. ; GONCALES, R. A. ; LARA, A. P. S. S. ; AVILA, L. F. C. ; LABRUNA, M. B. ; LEITE, F. P. L. . Recombinant gp19 as a potential antigen for detecting anti- Ehrlichia canis antibodies in dog sera. Revista Brasileira de Parasitologia Veterinária (Online) , p. 10.1590/S1984-2, 2015.

• Leite, F. P. L. ; Gonçales, R. A. ; OLIVEIRA, R. S. . Projeto desenvolvido na Biotecnologia é finalista do Prêmio Santander. Jornal da UFPel, Pelotas, p. 07, 01 dez. 2011.

• Gonçales, R. A. ; Leite, F. P. L. ; Lorenzon, L. B. ; OLIVEIRA, R. S. . Projetos Finalistas. Prêmios Santander Universidades, São Paulo, p. 16 - 16, 21 nov. 2011.

• TAVARES, L. A. ; REIS, L. B. ; OLIVEIRA, R. S. ; LEAO, D. P. ; DODE, L. B. . IDENTIDADE E PERTENCIMENTO - RECEPCAO DOS CALOUROS EM BIOTECNOLOGIA DA UFPel EM 2013. In: 9º Simpósio Sul-Rio-Grandense de Professores de Ciências e Matemática, 2013, Pelotas. 9º Simpósio Sul-Rio-Grandense de Professores de Ciências e Matemática, 2013.

• MARONEZE, B. P. ; SILVEIRA, J. S. ; OLIVEIRA, R. S. ; MAIA FILHO, F. S. ; HOFSTATTER, B. ; FONSECA, A. ; PEREIRA, D. I. B. . INTERAÇÃO E EFEITO OVICIDA DO ISOLADO Trichoderma spp. EM OVOS DE Ancylostoma spp. E Toxocara canis. In: VI Simpósio de Microbiologia Aplicada e II Encontro Latino Americano de Microbiologia Aplicada, 2012, Porto Alegre. VI Simpósio de Microbiologia Aplicada e II Encontro Latino Americano de Microbiologia Aplicada, 2012.

• OLIVEIRA, R. S. ; SILVEIRA, J. S. ; BOTTON, S. A. ; AZEVEDO, M. I. ; SANTURIO, J. M. ; GONCALES, R. A. ; LEITE, F. P. L. ; PEREIRA, D. I. B. . PERFIL PROTEICO DE ISOLADOS BRASILEIROS DE Pythium insidiosum - RESULTADOS PRELIMINARES. In: 21º Congresso de Iniciação Científica / 4º Mostra Científica / Universidade Federal de Pelotas, 2012, Pelotas. 21º Congresso de Iniciação Científica / 4º Mostra Científica / Universidade Federal de Pelotas, 2012.

• OLIVEIRA, R. S. ; BARTHER, N. N. ; GONCALES, R. A. ; LARA, A. P. S. S. ; Lorenzon, L. B. ; PINTO, L. ; Leite, F. P. L. . SELEÇÃO DE CLONES DE E.coli PARA A EXPRESSÃO DE gp19 RECOMBINANTE DE Ehrlichia canis. In: VI Simpósio de Microbiologia Aplicada e II Encontro Latino Americano de Microbiologia Aplicada, 2012, Porto Alegre. VI Simpósio de Microbiologia Aplicada e II Encontro Latino Americano de Microbiologia Aplicada, 2012.

• OLIVEIRA, R. S. ; LARA, A. P. S. S. ; Lorenzon, L. B. ; Leite, F. P. L. . PRODUÇÃO HETERÓLOGA DE GLICOPROTEÍNA (GP19) PARA IMUNODIAGNÓSTICO DE ERLIQUIOSE MONOCÍTICA CANINA. In: XVII Congresso Brasileiro de Parasitologia Veterinária, 2012, São Luis, Maranhão. XVII Congresso Brasileiro de Parasitologia Veterinária, 2012.

• Pinto, M. S. ; Gonçales, R. A. ; Lorenzon, L. B. ; OLIVEIRA, R. S. . EXPRESÃO DAS PROTEÍNAS DE Bacillus sphaericus MTX2 e MTX3 em Escherichia coli.. In: V Simpósio Brasileiro de Microbiologia Aplicada, 2011, Porto Alegre. V Simpósio Brasileiro de Microbiologia Aplicada., 2011.

• PALMA, S. ; OLIVEIRA, R. S. ; BERTOLINI, T. B. ; GEMBRE, A. F. ; GOULART, A. ; BONATO, V. L. D. . OBESITY INDUCES THE INCREASE OF SUSCEPTIBILITY TO MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS INFECTION.. 2016. (Apresentação de Trabalho/Outra).

• OLIVEIRA, R. S. ; PALMA, S. ; BERTOLINI, T. B. ; GOULART, A. ; GEMBRE, A. F. ; BONATO, V. L. D. . IL-1 INTERFACE IN OBESE MICE INFECTED WITH MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS.. 2016. (Apresentação de Trabalho/Outra).

• PALMA, S. ; BERTOLINI, T. B. ; OLIVEIRA, R. S. ; GEMBRE, A. F. ; GOULART, A. ; BONATO, V. L. D. . SUSCEPTIBILITY TO MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS IN OBESE MICE.. 2016. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• OLIVEIRA, R. S. ; PALMA, S. ; BERTOLINI, T. B. ; GOULART, A. ; GEMBRE, A. F. ; BONATO, V. L. D. . EVALUATION OF INFLUENCE DIET-INDUCED OBESITY IN EXPERIMENTAL MODEL OF TUBERCULOSIS.. 2016. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• MENEGON, Y. A. ; AVILA, L. C. ; OLIVEIRA, R. S. ; LARA, A. P. S. S. ; SANTOS, F. D. S. ; LEITE, F. P. L. . TOXOCARA CANIS ALTERA RESPOSTA VACINAL CONTRA HERPESVÍRUS BOVINO TIPO 5.. 2016. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• OLIVEIRA, R. S. ; PALMA, S. ; BERTOLINI, T. B. ; GOULART, A. ; GEMBRE, A. F. ; BONATO, V. L. D. . CD4+ AND CD8+ CELLS INCREASE IN THE LUNG OF INFECTED OBESE MICE WITH Mycobacterium tuberculosis. 2016. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• PALMA, S. ; BERTOLINI, T. B. ; OLIVEIRA, R. S. ; GEMBRE, A. F. ; GOULART, A. ; KETTELHUT, I. C. ; RAMALHO, L. Z. ; BONATO, V. L. D. . OBESE INFECTED MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS MICE SHOW AN INCREASED IN THE MONOCYTES AND NEUTROPHILS CELLS IN THE LUNG. 2016. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• MENEGON, Y. A. ; AVILA, L. F. C. ; OLIVEIRA, R. S. ; LEITE, F. P. L. . TOXOCARÍASE CRÔNICA NÃO ALTERA A RESPOSTA IMUNE HUMORAL CONTRA HERPESVIRUS BOVINO TIPO-5 EM CAMUNDONGOS. 2015. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• OLIVEIRA, R. S. ; CUNHA, R. C. ; MORAIS-FILHO, J. ; COSTA, F. ; KRAWCZAK, F. S. ; HORTA, M. C. ; LABRUNA, M. B. ; LEITE, F. P. L. . DESENVOLVIMENTO E CARACTERIZACĀO DE ELISA INDIRETO PARA ERLIQUIOSE EM CĀES UTILIZANDO ANTIGENO RECOMBINANTE GP19 DE EHRLICHIA CANIS. 2015. (Apresentação de Trabalho/Outra).

• OLIVEIRA, R. S. ; AVILA, L. F. C. ; MENEGON, Y. A. ; LEITE, F. P. L. . HELMINTOSE CRÔNICA MODULA A TRANSCRIÇÃO DE IFN- GAMA EM CAMUNDONGOS VACINADOS CONTRA HERPESVÍRUS BOVINO TIPO-5. 2015. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• OLIVEIRA, R. S. ; BARTHER, N. N. ; GONCALES, R. A. ; LARA, A. P. S. S. ; LORENZON, L. ; PINTO, L. S. ; LEITE, F. P. L. . CARACTERIZAÇÃO DE PROTEÍNA TÓXICA RECOMBINANTE DE Ehrlichia canis EXPRESSA EM Escherichia coli PARA UTILIZAÇÃO EM IMUNODIAGNOSTICO DE CÃES. 2013. (Apresentação de Trabalho/Outra).

• OLIVEIRA, R. S. ; BARTHER, N. N. ; GONCALES, R. A. ; LARA, A. P. S. S. ; LORENZON, L. B. ; PINTO, L. ; LEITE, F. P. L. . SELEÇÃO DE CLONES DE E.coli PARA A EXPRESSÃO DE gp19 RECOMBINANTE DE Ehrlichia canis. 2012. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• OLIVEIRA, R. S. ; SILVEIRA, J. S. ; BOTTON, S. A. ; AZEVEDO, M. I. ; SANTURIO, J. M. ; GONCALES, R. A. ; PEREIRA, D. I. B. ; LEITE, F. P. L. . PERFIL PROTEICO DE ISOLADOS BRASILEIROS DE Pythium insidiosum - RESULTADOS PRELIMINARES. 2012. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

• Lorenzon, L. B. ; GRASSMAN, A. A. ; GONCALES, R. A. ; LEITE, F. P. L. ; BERNE, M. E. A. ; OLIVEIRA, R. S. . EXPRESSÃO DE PROTEÍNAS RECOMBINANTES EM Escherichia coli VISANDO PRODUÇÃO DE VACINA CONTRA NEOSPOROSE. 2012. (Apresentação de Trabalho/Congresso).

Projetos de pesquisa

• 2016 - Atual

  INTERFACE DA RESPOSTA IMUNOLÓGICA NA OBESIDADE E TUBERCULOSE, Descrição: A tuberculose é a doença que causa o maior número de mortes no mundo decorrente de infecção bacteriana. Mesmo sendo amplamente estudada considerando-se a relação do hospedeiro com o bacilo Mycobacterium tuberculosis, agente etiológico da doença, o conjunto de fatores que levam indivíduos imunocompetentes a desenvolverem a tuberculose ativa e progressiva é complexo e ainda não está completamente esclarecido. Dados gerados a partir de modelos experimentais mostram que a infecção com M. tuberculosis gera resposta imune celular, caracterizada, de modo geral, pela presença de macrófagos classicamente ativados (M1) e linfócitos T CD4+ produtores de IFN-, sendo tal padrão associado com perfil protetor. Porém, esse mesmo perfil de resposta promove intensa inflamação nessa doença crônica. Dentre os fatores sócio-econômicos associados ao maior risco de desenvolver ou reativar a tuberculose destacam-se a desnutrição, o alcoolismo e os aglomerados populacionais. Compreender como diferentes fatores interferem na resposta dos indivíduos frente ao bacilo M. tuberculosis é imprescindível para auxiliar na busca de novas terapias para tuberculose. Nesse contexto, surge um novo campo de pesquisa, o Imunometabolismo. Durante os últimos 25 anos, houve aumento na incidência da obesidade no mundo. Nos indivíduos obesos, o tecido adiposo constitui-se, além dos adipócitos, de leucócitos, como macrófagos e células T. Disfunções metabólicas em pessoas obesas estão diretamente relacionadas com abundância de citocinas proinflamatórias. A inflamação gerada em decorrência da obesidade é denominada metainflamação. Caracteriza-se por menor magnitude que aquela existente nas doenças imuno-mediadas. A metainflamação contribui para o desenvolvimento de doenças crônicas, infecciosas ou não. Porém, associações entre a obesidade e infecção por M. tuberculosis ainda não foram investigadas detalhadamente. Nossa hipótese inicial é de que a resposta inflamatória gerada em decorrência da obesidade pode ser deletéria e promover progressão da tuberculose, embora uma associação inversa entre sobrepeso e tuberculose tenha sido descrita em estudos epidemiológicos. Além disso, também foi descrito que a obesidade pode modular negativamente a função de determinadas células do sistema imunológico. Assim, visando compreender melhor o papel da inflamação na tuberculose, nesse projeto vamos estudar como a obesidade afeta a suscetibilidade ou resistência e mecanismos intrínsecos à infecção por M. tuberculosis.. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Mestrado acadêmico: (2) Doutorado: (1) . , Integrantes: Rômulo Silva de Oliveira - Coordenador / Thaís B. Bertolini - Integrante / Sandra Palma - Integrante / Vânia Luiza Deperon Bonato - Integrante / Ana Flávia Gembre - Integrante / Amanda Goulart - Integrante., Financiador(es): Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - Auxílio financeiro.

• 2016 - Atual

  AVALIAÇÃO DA FUNÇÃO DA IL-1 NA MAGNITUDE DA INFLAMAÇÃO PULMONAR DECORRENTE DA OBESIDADE NA TUBERCULOSE EXPERIMENTAL, Descrição: A tuberculose (TB) está entre as doenças classificadas como prioridade de saúde pública pela Organização Mundial de Saúde. Embora exista grande progresso no entendimento da resposta imune gerada após a infecção por Mycobacterium tuberculosis, ainda nos falta a compreensão dos mecanismos que promovem ?equilíbrio imunológico?, considerando a resposta protetora do hospedeiro infectado visando à eliminação dos bacilos, e os mecanismos reguladores que modulam a magnitude da resposta inflamatória, protegendo o tecido pulmonar do hospedeiro. Assim como a TB, a obesidade é outra questão alarmante. A incidência da obesidade na população aumentou drasticamente nos últimos anos. O tecido adiposo de indivíduos obesos constitui-se, além dos adipócitos, de leucócitos, e é caracterizado por um estado denominado metainflamação, ou inflamação de magnitude inferior comparada com as imunomediadas. A metainflamação induzida pelo tecido adiposo modificado, em consequência da obesidade, afeta a função pulmonar, aumentando a suscetibilidade de indivíduos obesos à pneumonia e à TB. No entanto, a relação da obesidade com a suscetibilidade à TB ainda não está bem esclarecida. Resultados preliminares de nosso grupo mostram que camundongos obesos, em decorrência da ingestão de dieta hiperlipídica, quando infectados com M. Tuberculosis, são mais suscetíveis e apresentam inflamação pulmonar de maior magnitude quando comparados aos animais alimentados com dieta padrão e infectados. Sabendo que a metainflamação, gerada no tecido adiposo, e a inflamação, gerada durante a resposta imunológica na TB, induzem a produção IL-1, nosso objetivo é avaliar se essa citocina é fator determinante para o aumento da magnitude da inflamação pulmonar, e consequentemente, para a progressão da infecção, como evidenciado pela maior suscetibilidade dos animais obesos. Nossa hipótese é de que o aumento na produção de IL-1, em decorrência da inflamação gerada pela obesidade, esteja associado com inflamação deletéria no pulmão dos animais obesos e, consequentemente, com maior suscetibilidade. Para testar nossa hipótese, animais C57BL/6 WT (Wild Type) e animais deficientes para a expressão de IL1-R (IL-1R-/-) serão alimentados com dieta hiperlipídica ou dieta padrão, e infectados com M. tuberculosis. A identificação de moléculas-alvo e populações de leucócitos que modulem diretamente a inflamação pulmonar em condição de comorbidade obesidade e TB pode auxiliar na descoberta de marcadores imunológicos relacionados tanto com gravidade da doença como com a magnitude da resposta inflamatória, visando ao delineamento de imunoterapias contra ambas as doenças.. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (0) / Especialização: (0) / Mestrado acadêmico: (1) / Doutorado: (1) . , Integrantes: Rômulo Silva de Oliveira - Coordenador / Thaís B. Bertolini - Integrante / Sandra Palma - Integrante / Vânia Luiza Deperon Bonato - Integrante / Ana Flávia Gembre - Integrante., Financiador(es): Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - Auxílio financeiro.

• 2014 - 2015

  AVALIAÇÃO DA IMUNOMODULACAO EXERCIDA PELO NEMATOIDE TOXOCARA CANIS EM MODELO EXPERIMENTAL IMUNIZADO COM VACINA VÍRICA, Descrição: Estudos com modelos experimentais revelam que determinados helmintos são capazes de modular o sistema imune do hospedeiro, podendo alterar a resposta vacinal. Estudos preliminares realizados em nosso laboratório revelam que o T. canis é capaz de alterar a resposta imune de animais vacinados contra Herpesvírus bovino tipo 5, diminuído a expressão de IFNg. Assim, acreditamos que se faz necessária a continuação de estudos que visem avaliar a modulação que este parasito realiza em animais imunizados com vacinas víricas.No presente estudo será avaliada a modulação realizada por T. canis em modelo experimental vacinado contra Parvovírus canino (CPV). Serão formados três grupos de 25 animais cada. G1: camundongos infectados cronicamente por T. canis, G2: camundongos com infecção aguda por T. canis e G3: controle sem infecção. Todos os animais serão vacinados com vacina contra Parvovíruscaninum. Semanalmente será coletado sangue, para avaliar a resposta imune humoral contra CPV, e ao final do experimento será realizado cultivo de esplenócitos para a avaliação da resposta celular através da expressão gênica de citocinas Th1, Th2, Th17 e Treg por qPCR.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (1) / Doutorado: (3) . , Integrantes: Rômulo Silva de Oliveira - Coordenador / Fabio Leivas Leite - Integrante / Maria Elisabeth Aires Berne - Integrante / Luciana Costa de Avila - Integrante.

• 2014 - 2015

  UTILIZAÇÃO DA PROTEÍNA EMA-2 RECOMBINANTE, EXPRESSA EM PICHIA PASTORIS, COMO IMUNOBIOLÓGICO, Descrição: A Piroplasmose equina causada por Theileria equi e Babesia caballi, protozoários intracelulares, é considerada a mais importante doença dos equinos em regiões tropicais e subtropicais. O Brasil possui o maior rebanho de equinos na América Latina e o terceiro mundial. Somados aos muares (mulas) e asininos (asnos) são 8 milhões de cabeças, movimentando R$ 7,3 bilhões, somente com a produção de cavalos. Entre as enfermidades que acometem equinos, destacamos a Theileriose que provoca perdas associadas tanto a fatores clínicos como a restrição ao trânsito internacional de animais soropositivos (FRIEDHOFF, 1990). A transmissão de T. equi ocorre pela picada do carrapato contendo suas formas infectantes (esporozoítos), que penetram nos leucócitos antes de penetrarem nos eritrócitos. Theileriose pode ser diagnosticada por diversos métodos como: Esfregaços sanguíneos corados por Giemsa, TFC (Teste de Fixação do Complemento), IFAT (Teste de Imunofluorescência Indireta), PCR (Reação em Cadeia da Polimerase) e ELISA utilizando lisados do parasito. Muitas limitações, incluindo baixa sensibilidade foram descritas para TFC e outros métodos de diagnóstico foram propostos para aumentar a detecção de equinos portadores. Em testes de diagnóstico imunológicos a especificidade, sensibilidade e custo dependem principalmente do antígeno utilizado. Preparações em larga escala são extremamente complicadas e laboriosas, por isto a utilização de antígenos recombinantes para a detecção de T. equi tornou-se uma alternativa. Vários ELISAs tem sido realizados com a utilização de antígenos recombinantes, o que demonstra que pode ser um teste útil para identificação de theileriose crônica em equinos. Em T. equi duas proteínas de superfície de merozoítos, equi merozoítos antígeno (EMAs): EMA-1 (34 kDa) e EMA-2 (30 kDa) foram identificadas como os antígenos imunodominantes. Entretanto, EMA-2 é liberada no citoplasma e na membrana deste eritrócito, sugerindo ser um dos primeiros antígenos a serem reconhecidos pelo sistema imune. A clonagem e expressão da EMA-2 de T. equi em Pichia pastoris como a obtenção desta glicoproteína recombinante em quantidades que permitam a avaliação desta como uma vacina de subunidade bem como uma ferramenta no diagnóstico de infecções por T. equi.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Doutorado: (1) . , Integrantes: Rômulo Silva de Oliveira - Integrante / Fabio Pereira Leivas Leite - Coordenador / Luciano da Silva Pinto - Integrante / Ana Muñoz Vianna - Integrante / Yasmine Alves MENEGON - Integrante.

• 2012 - 2014

  PERFIL PROTEICO DE ISOLADOS BRASILEIROS DE Pythium insidiosum, Descrição: A pitiose é uma enfermidade piogranulomatosa do tecido subcutâneo causada pelo oomiceto aquático Pythium insidiosum. No Brasil, foi descrita em eqüinos, bovinos, ovinos, caninos e humanos, porém a maioria dos casos corresponde a lesões cutâneas em eqüinos. Em todas as espécies afetadas pode ocorrer a morte, especialmente quando não tratadas. Atualmente, a imunoterapia é a única alternativa mais eficaz no tratamento da pitiose equina. Porém, há muitos casos de equinos não responsivos e além disso, os imunoterápicos de corrente uso apresentam apenas propriedades curativas. Como o efeito curativo é lento, veterinários e proprietários desistem dos tratamentos e optam pela eutanásia dos animais. Uma vez que as propriedades profiláticas dos imunoterápicos não têm sido completamente avaliadas, acredita-se que a identificação de proteínas imunodominantes expressas pelo P. insidiosum poderia auxiliar a eficácia dos imunoterápicos já disponíveis e /ou estimular o desenvolvimento de vacinas de uso profilático. Alguns estudos têm demonstrado a expressão de diferentes antígenos imunodominantes em isolados de P. insidiosum provenientes de diferentes espécies e inclusive em isolados do microrganismo de ambientes aquáticos, o que evidencia a presença de prováveis proteínas imunogênicas e sugere a existência de variabilidade antigênica deste microrganismo. No Brasil, onde a pitiose é endêmica, é de urgência a realização de estudos que caracterizem e comparem o perfil protéico dos isolados de P. insidiosum. Desta forma, propõe-se o presente estudo que tem por objetivo avaliar o perfil protéico de isolados brasileiros de P. insidiosum oriundos de animais e ambientes aquáticos. Para isto, 60 isolados de P. insidiosum oriundos de equinos e 10 isolados oriundos de ambientes aquáticos, previamente identificados através da caracterização morfológica e molecular, serão submetidos a eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) para identificação de proteínas. Em sequência, essas proteína. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (4) / Mestrado acadêmico: (1) . , Integrantes: Rômulo Silva de Oliveira - Integrante / Fabio Leivas Leite - Integrante / Anelise de Oliveira fonseca - Integrante / Julia de Souza Silveira - Integrante / Beatriz Persici - Coordenador / Francieli Elisa Stoll - Integrante / Daniela Isabel Brayer Pereira - Integrante.

• 2012 - Atual

  PRODUÇÃO HETERÓLOGA DE GLICOPROTEÍNA (GP19) PARA IMUNODIAGNOSTICO DE ERLIQUIOSE MONOCÍTICA CANINA (EMC)., Descrição: A Ehrlichia canis é a responsável pela erliquiose monocitica canina (EMC), doença considerada endêmica principalmente nas áreas urbanas. A infecção dos hospedeiros vertebrados por E. canis ocorre quando carrapatos infectados se alimentam e sua secreção salivar infectada com erliquia é inoculada no local da picada. O período de incubação da EMC é de 8 a 20 dias; a doença apresenta três fases: aguda, subclínica e crônica. As espécies de E. canis são transmitidas para o cão e para o homem pelo carrapato da espécie Rhipicephalus sanguineus. O diagnóstico é realizado através de esfregaços sanguíneos, métodos sorológicos ou reação em cadeia da polimerase (PCR), sendo a Imunofluorescência o método mais utilizado. Recentemente E. canis, foi descrita como sendo capaz de causar doença grave em humanos, com casos de óbito principalmente em crianças e idosos. A proteína GP19 é um importante antígeno imunodominante, pois induz rápida resposta imunológica nos cães. A similaridade entre as amostras geograficamente distintas sugere que a proteína GP19 possa ser usada para ensaios de imunoenzimáticos de diagnóstico, bem como em programas vacinais, pois esta proteína é especifica para E. canis não tendo assim reações cruzadas com outros gêneros de Ehrlichia. Este estudo teve como objetivo a clonagem da glicoproteína 19 de Ehrlichia canis em Escherichia coli para ser utilizada como antígeno na detecção rápida e precisa desta doença. O gene gp 19 foi amplificado pela reação da polimerase em cadeia (PCR) utilizando oligonucleotídeos iniciadores específicos contendo sítios para enzimas de restrição. O produto da PCR, após digestão, foi purificado e clonado no vetor pAE e inserido em E. coli TOP 10 competente por eletroporação. Dos clones identificados extraiu-se o plasmídio, o qual foi digerido com as enzimas de restrição e sequenciado para comprovar a presença do inserto. Após seleção dos clones recombinantes contendo o gene ligado ao vetor, este foi purificado e inserido por choque tér. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (3) / Especialização: (1) / Mestrado acadêmico: (1) / Doutorado: (1) . , Integrantes: Rômulo Silva de Oliveira - Integrante / Lucas Lorenzon - Integrante / Fabio Leivas Leite - Coordenador / Mariana da Silva Pinto - Integrante / Luciana Laitano Dias de Castro - Integrante / Isabel Martins Madrid - Integrante / Fernanda Brum - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro.

• 2011 - 2014

  POLISSACARÍDEO BACTERIANO COMO ADJUVANTE VACINAL, Descrição: O desenvolvimento de novos adjuvantes para uso vacinas transformou-se num campo de pesquisa em expansão nos últimos anos, devido à necessidade de gerar vacinas mais eficazes na indução de uma proteção de longa duração em seres humanos e em animais. O objetivo do presente trabalho é avaliar a atividade adjuvante de polissacarídeo bacteriano. Para isso serão realizadas vacinações em camundongos utilizando-se vacinas com o polissacarídeo como adjuvante associado á antígenos bacteriano, viral e de protozoário. Será avaliada a resposta imune vacinal humoral por soroconversão através de ELISA, celular por expressão de citocinas através de RT-PCR, e presença de células imunes no local de vacinação por histopatologia.. , Situação: Em andamento; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (1) / Doutorado: (3) . , Integrantes: Rômulo Silva de Oliveira - Integrante / Relber Gonçales Aguiar - Integrante / Fabio Leivas Leite - Coordenador / Mariana da Silva Pinto - Integrante / Tiago da Silva Heres - Integrante / Luciana Farias da Costa de Avila - Integrante / Régis Tuchtenhagen Sturbelle - Integrante.

• 2008 - 2015

  DESENVOLVIMENTO DE INSUMOS IMUNOQUÍMICOS E MOLECULARES PARA DIAGNÓSTICO DE NEOSPOROSE, Descrição: A neosporose é uma enfermidade importante em bovinos, devido à ocorrência de abortos nos animais infectados e causa grandes perdas econômicas na pecuária de corte e de leite de vários países do mundo. No Brasil, a neosporose tem sido diagnosticada por sorologia em gado de corte e leite, mas seu impacto econômico ainda não está bem definido. Além disto, a presença de anticorpos detectáveis no soro dos animais indica exposição ao agente, mas não necessariamente infecção, devendo ser realizado o diagnóstico diferencial para a diarréia viral bovina (BVD), rinotraqueíte infecciosa bovina (IBR), leptospirose e brucelose. Testes diagnósticos sensíveis e específicos, que possam identificar a presença do agente em fluidos biológicos, produzidos a baixos custos, são necessários para identificar bovinos infectados e possibilitar a implantação de medidas de controle adequadas. O projeto proposto visa o desenvolvimento de testes ELISA para diagnóstico de neosporose em mamíferos. Para este fim, propõe implantar o cultivo permanente de Neospora caninum em cultivos celulares, disponibilizando antígenos para diagnóstico por imunofluorescência (IF) e estudos da biologia do parasito; clonar e expressar proteínas de Neospora caninum em sistemas heterologos; utilizar proteínas recombinantes para a produção de anticorpos monoclonais (mAbs); produzir conjugados para utilização em ELISA e IF, visando à identificação de antígenos em fluidos biológicos de bovinos, possibilitando assim a diferenciação entre exposição ao agente e infecção. Ainda, os insumos a serem produzidos possibilitarão o diagnóstico em caninos e espécies silvestres, possíveis hospedeiras definitivas de N. caninum.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (2) / Mestrado acadêmico: (1) . , Integrantes: Rômulo Silva de Oliveira - Coordenador / Maria Elizabeth Aires Berne - Integrante / Fabio Pereira Leivas Leite - Integrante / Sibele Borsuk - Integrante / Relber Aguiar Gonçales - Integrante / Talita Roos - Integrante / Renato Andreotti e Silva - Integrante / Jorge Vitor Bacila Agottani - Integrante / Luciano da Silva Pinto - Integrante / Lucas Lorenzon - Integrante., Financiador(es): Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Auxílio financeiro / Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária - Cooperação.

• 2008 - 2011

  PRODUÇÃO E UTILIZAÇÃO DE ANTÍGENOS PARA DETECÇÃO DE EHRLICHIA CANIS, Descrição: O gênero Ehrlichia é classificado atualmente na família Anaplasmataceae, contemplando cinco espécies: E. canis, E. chaffensis, E. ewingii, E. muris e E. ruminantium. São cocobacilos gram-negativos, de vida intracelular obrigatória de células hematopoiéticas maduras ou imaturas, tais como monócitos e macrófagos.As espécies de erliquias são transmitidas para o homem e cães no país pelo carrapato da espécie Rhipicephalus sanguineus. A E. canis é a responsável pela erliquiose monocitica canina (EMC), doença considerada endêmica principalmente nas áreas urbanas. A infecção dos hospedeiros vertebrados por E. canis ocorre quando carrapatos infectados se alimentam e sua secreção salivar contaminada com erliquias é inoculada no local da picada. O período de incubação da EMC é de 8 a 20 dias; a doença apresenta três fases: aguda, subclínica e crônica. O diagnóstico é realizado através de esfregaços sanguíneos, métodos sorológicos ou reação em cadeia da polimerase (PCR). Recentemente E. canis, foi descrita como sendo capaz de causar doença grave em humanos, com casos de óbito principalmente em crianças e idosos. Na Venezuela há um relato recente de pelo menos seis casos clínicos de erliquiose humana causada por E. canis. Este estudo tem como objetivo clonar e expressar a proteína gp19 de Ehrlichia canis para ser utilizada como imunobiologico. Materiais e Métodos: O estudo que se pretende desenvolver será realizado no Município de Pelotas, no Laboratório de Microbiologia do Departamento de Microbiologia e Parasitologia na Universidade Federal de Pelotas. As amostras de sangue dos cães, necessárias para este estudo, serão obtidas na soroteca do Laboratório de Parasitologia.O gene gp 19 será amplificado por PCR utilizando os oligonucleotídeos iniciadores (for- E.canis PARA p19, 5-AAAATTAGTGTTGTGGTTATG-3, e rev-E. canis p19, 5-TTTTACGCTTGCTGAAT-3). Posteriormente, o amplicon será purificado e clonado em plasmídeo. Os clones recombinantes serão repicados e os plasmídeos extraídos.. , Situação: Concluído; Natureza: Pesquisa. , Alunos envolvidos: Graduação: (3) / Mestrado acadêmico: (1) . , Integrantes: Rômulo Silva de Oliveira - Integrante / Fabio Pereira Leivas Leite - Coordenador / Luciano Pinto - Integrante / Lucas Bigolin Lorenzon - Integrante / Relber Aguiar Gonçales - Integrante / Fernanda Brum Lacau - Integrante.

Prêmios